豬支原體肺炎的流行病學(xué)調(diào)查及血清學(xué)檢測(cè)

師麗敏+馮?？?杜曉允+孫倩+張育豪

摘要：對(duì)海南省?？谑屑爸苓叺貐^(qū)感染豬支原體肺炎的病例進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查和血清學(xué)檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同年齡、性別和品種的豬都可感染豬支原體肺炎，其中以哺乳仔豬和保育豬的感染率、發(fā)病率、病死率較高。成年豬感染率高，但發(fā)病率和死亡率低。血清學(xué)診斷主要采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，結(jié)果表明該病以慢性或隱性經(jīng)過(guò)為主，部分豬臨床無(wú)明顯癥狀，但檢測(cè)結(jié)果顯示抗體水平較高，為支原體肺炎陽(yáng)性。

關(guān)鍵詞：豬支原體肺炎；豬支原體；流行病學(xué)調(diào)查；血清學(xué)檢測(cè)；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1007-273X（2017）12-0013-03

豬支原體肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine，MPS）是由豬肺炎支原體（Mycoplasmal hyopneumoniae，Mhp）引起的一種慢性、接觸性傳染病， 該病發(fā)病率高、死亡率低，是一種重要的免疫抑制性疾病， 也是豬呼吸道疾病綜合征（Porcine respiratory disease complex，PRDC）的重要病原之一。因該病臨床以氣喘為主要特征，所以在我國(guó)又常被稱(chēng)為氣喘?。ɑ虼瓪獠。1]。

該病長(zhǎng)期危害養(yǎng)豬業(yè)， 并廣泛分布于世界各國(guó)。豬群中該病的感染率在90%以上，發(fā)病率極高，而且很難控制。除豬支原體肺炎外， 其他豬呼吸道疾病包括巴氏桿菌 、胸膜肺炎放線桿菌、豬鼻支原體、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌以及豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）、豬偽狂犬病病毒（PRV）、豬流感病毒（SIV）、豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）引起的感染[2]。這些病原的長(zhǎng)期存在嚴(yán)重威脅著養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展，使其飼料轉(zhuǎn)化率降低，還可出現(xiàn)食欲減退、發(fā)熱、咳嗽、呼吸困難等癥狀。因該病侵入初期主要呈慢性或隱性感染，豬只臨床癥狀不明顯或沒(méi)有臨床癥狀，不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和消除傳染源，導(dǎo)致該病傳染給其他易感豬群。當(dāng)感染肺炎支原體沒(méi)有并發(fā)感染時(shí)， 出現(xiàn)亞臨床癥狀，表現(xiàn)溫和， 不出現(xiàn)咳嗽，平均日增重降低和飼料轉(zhuǎn)化率降低。當(dāng)繼發(fā)感染時(shí)，出現(xiàn)呼吸困難，發(fā)熱等臨床癥狀，有時(shí)也有死亡病例。該病一旦傳入豬群很難徹底清除。因此，對(duì)該病流行病學(xué)的認(rèn)識(shí)以及診斷技術(shù)的研究和應(yīng)用具有十分重要的意義。

筆者主要在?？诩爸苓吺锌h的規(guī)?；i場(chǎng)調(diào)查了自然發(fā)病的MPS病例的流行病學(xué)資料，并觀察記錄該病的臨床表現(xiàn)和部分病理剖檢變化，采集疑似該病的血清進(jìn)一步檢測(cè)診斷，以期為豬支原體肺炎的診斷提供更加可靠便捷的方法。

1 材料與方法

1.1 材料

海南省海口市、屯昌縣等市（縣）部分豬場(chǎng)中自然感染MPS的病例，采集212份不同日齡階段的豬只血清作為待檢樣品，血清樣品來(lái)自3個(gè)規(guī)?；唐坟i場(chǎng)，分別采集110份、48份、44份血清樣品。所采血清樣品豬場(chǎng)均未接種豬肺炎支原體疫苗。

血清學(xué)檢測(cè)試劑盒：豬肺炎支原體間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（深圳真瑞生物科技有限公司）；批號(hào)：2016112311；有效期：2017年11月23日。

操作方法及結(jié)果判定依據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。S/P<0.2，判定為支原體肺炎血清抗體陰性；S/P>0.4判定為支原體肺炎血清抗體陽(yáng)性；S/P在0.2～0.4之間，判為支原體肺炎血清抗體可疑。

1.2 流行病學(xué)調(diào)查

主要通過(guò)深入發(fā)病豬場(chǎng)和部分散養(yǎng)村組調(diào)查，以及與養(yǎng)殖場(chǎng)獸醫(yī)、技術(shù)員和散養(yǎng)戶群眾電話、座談等方法，對(duì)自然感染豬支原體肺炎的發(fā)病地區(qū)進(jìn)行疫情來(lái)源及流行情況調(diào)查分析，包括發(fā)病的數(shù)量、年齡及感染率、發(fā)病率、病死率等內(nèi)容，并根據(jù)疫病流行可能的傳播途徑和方式、豬群的飼養(yǎng)管理方法等，詳細(xì)了解和掌握豬支原體肺炎流行的基本情況。

1.3 典型病例的臨床診斷

選擇臨床癥狀比較典型的病例，觀察其個(gè)體及群體發(fā)病的具體臨床表現(xiàn)，如豬的體溫，呼吸次數(shù)，早晚的呼吸咳嗽情況等，并進(jìn)行詳細(xì)的文字記錄。

1.4 血清學(xué)診斷（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）

血清學(xué)抗體診斷用于監(jiān)測(cè)豬群的健康狀況，用已知特異性豬肺炎支原體抗原檢測(cè)豬只血清中特異性抗體，通過(guò)比較動(dòng)物不同年齡和不同生產(chǎn)周期血清中抗體效價(jià)的變化或特異性抗體有無(wú)，來(lái)判斷是否存在病原體感染或檢測(cè)免疫效果。經(jīng)研究酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是豬肺炎支原體血清學(xué)試驗(yàn)中抗體檢測(cè)最敏感的試驗(yàn)方法，故本實(shí)驗(yàn)選擇此方法進(jìn)行鑒定[3]。

對(duì)未接種過(guò)豬肺炎支原體疫苗的種豬場(chǎng)，采集癥狀較明顯的豬只血清進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。

2 結(jié)果與分析

2.1 流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果

筆者對(duì)?？谑?、文昌市、屯昌縣的3個(gè)大型豬場(chǎng)和部分養(yǎng)殖戶進(jìn)行了豬支原體肺炎的流行病學(xué)資料調(diào)查，通過(guò)臨床觀察、病理剖檢及血清學(xué)檢測(cè)等方法確診為豬支原體肺炎。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同年齡、品種和性別的豬都可能感染該病，育肥豬感染率在93.3%及以上。其中以哺乳仔豬和幼齡豬的發(fā)病率最高，高達(dá)62%和57%。其次是妊娠后期的母豬和哺乳母豬，發(fā)病率為28%，育肥豬和種豬、后備豬發(fā)病率最低，多呈隱性感染。不表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀。但通過(guò)血清學(xué)檢測(cè)可檢測(cè)到陽(yáng)性。

由于海南尤其?？诟浇貐^(qū)的氣候潮濕等原因，該病發(fā)病率相比其他地區(qū)更高。該病一年四季均有發(fā)生，尤其是在寒冷、多雨、潮濕及氣候驟變時(shí)較為多見(jiàn)。此時(shí)的發(fā)病率會(huì)明顯增高，甚至引起大批發(fā)病和急性死亡。特別是高密度飼養(yǎng)的集約化豬場(chǎng)，該病發(fā)生率更高，一旦發(fā)病，就會(huì)引起大面積傳播，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。

2.2 臨床特征

臨床癥狀比較明顯的病例主要是哺乳期仔豬，呈急性發(fā)作，表現(xiàn)為精神不振，頭下垂，獨(dú)立一隅或趴于地面，呼吸次數(shù)劇增至90次/min以上，病豬呼吸困難，嚴(yán)重者張口呼吸，并發(fā)出喘鳴音，呈明顯的腹式呼吸?？人源螖?shù)少而低沉，偶爾會(huì)有痙攣性咳嗽的癥狀。endprint

2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果

由表1可以看出，豬只在80日齡前感染豬肺炎支原體的比例相對(duì)較低，但是在育肥豬、公豬、母豬群感染卻很普遍。幾個(gè)豬場(chǎng)的母豬群均出現(xiàn)100%的感染率，說(shuō)明該地區(qū)豬場(chǎng)感染豬肺炎支原體的比例較高[4]。由于本試驗(yàn)使用固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），只能定性檢測(cè)豬血清中的豬肺炎支原體特異性抗體IgG，不能將母源抗體和感染抗體分開(kāi)。所以推測(cè)哺乳仔豬可能在初乳中被動(dòng)獲得母源抗體。試驗(yàn)結(jié)果顯示哺乳仔豬（20日齡內(nèi)）的血清陽(yáng)性率分別為55.6%和46.2%，隨著日齡增長(zhǎng)，母源抗體逐漸降低，所以檢測(cè)到的血清陽(yáng)性率也在逐步降低，到40日齡段達(dá)到最低（12.3%）。但隨后由于受到周?chē)≡w的感染，從50日齡開(kāi)始檢測(cè)到抗體水平開(kāi)始明顯提高，80日齡時(shí)達(dá)到68.3%，直至在母豬群中檢測(cè)到100%的感染率。

3 小結(jié)與討論

3.1 豬支原體肺炎的高感染率和母源抗體在哺乳階段給與仔豬有效保護(hù)

從試驗(yàn)結(jié)果分析看出，育肥豬和母豬的感染率較高，母豬達(dá)到100%。說(shuō)明豬支原體肺炎在該地區(qū)呈現(xiàn)高暴露。由于母豬的高感染率，導(dǎo)致初生仔豬被傳染，甚至在整個(gè)豬群中傳播并持續(xù)存在。由于母源抗體的影響，使哺乳仔豬暫時(shí)性獲得抵抗力，但隨著日齡增長(zhǎng)，斷奶后仔豬的抗體水平明顯下降，此時(shí)，豬體由于受到周?chē)гw的感染而又逐步產(chǎn)生抗體，但在此階段由于抗體水平增加速度有限，如果環(huán)境或飼養(yǎng)條件突然改變，很可能導(dǎo)致機(jī)體被肺炎支原體侵襲，該階段豬的發(fā)病率和死亡率相對(duì)其他階段明顯升高。隨著日齡增加抗體水平不斷提高，在育肥階段抗體水平達(dá)到93.3%，但后期階段豬的發(fā)病率和死亡率又開(kāi)始下降[5，6]。

3.2 豬肺炎支原體疫苗免疫接種不容忽視

本試驗(yàn)采集的從10日齡到母豬不同階段豬的血清，抽檢發(fā)現(xiàn)豬肺炎支原體的感染情況在50日齡后隨著日齡增加逐步加重。說(shuō)明?？谑懈浇貐^(qū)的豬場(chǎng)豬肺炎支原體感染的情況較為嚴(yán)重，尤其是母豬的感染情況最為嚴(yán)重，也是導(dǎo)致豬群大面積繼發(fā)感染其他呼吸道疫病的根源[7]，給其他呼吸道疾病如豬肺疫、豬傳染性胸膜肺炎及藍(lán)耳病等的防治增加了難度。

部分養(yǎng)殖戶認(rèn)為豬肺炎支原體疫苗不能顯著減少豬群的感染率[8，9]，且因?yàn)榭贵w維持時(shí)間短、該病的死亡率較低等原因，不進(jìn)行豬肺炎支原體疫苗的接種，一旦發(fā)病，采用泰樂(lè)菌素、替米考星等藥物進(jìn)行治療以及隔離飼養(yǎng)的方法來(lái)解決，但效果并不明顯。有研究表明，雖然疫苗不能很有效地阻止豬群感染，但是能有效減少肺炎支原體在呼吸道和肺部的定殖，從而降低豬群感染其他呼吸道疾病的風(fēng)險(xiǎn)。所以，在一些發(fā)病率較高的豬場(chǎng)，建議進(jìn)行豬肺炎支原體疫苗的免疫接種，同時(shí)注意豬舍的通風(fēng)，環(huán)境溫度、濕度的控制，定期消毒，以及制定合理的飼養(yǎng)管理制度，及時(shí)處理陽(yáng)性豬，對(duì)該病的控制可起到較好的效果。

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