化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

程育春

【摘要】 目的 研究探討化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)（ECLIA）和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）在乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值。方法 141例疑似乙肝患者， 均在晨間空腹靜脈采血分離血清后分別采用ECLIA、ELISA兩種方式進(jìn)行檢測(cè)， 對(duì)比分析兩種檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 141例疑似乙肝患者通過ECLIA、ELISA兩種方式檢驗(yàn)病毒血清， 其中ELISA方式檢驗(yàn)乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物[乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗體（HBsAb）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝核心抗體（HBcAb）]與ECLIA檢測(cè)結(jié)果比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；但是兩種方式檢測(cè)HBeAb標(biāo)志物差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 在乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中采用ECLIA診斷價(jià)值顯著高于ELISA方式， 前者在乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）陽性檢出率明顯高于后者， 具有重要臨床意義。

【關(guān)鍵詞】 化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；乙肝病毒；血清學(xué)檢驗(yàn)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.15.030

乙型病毒性肝炎（viral hepatitis type B， 簡(jiǎn)稱乙肝）系由乙肝病毒（HBV）引起， 以乏力、食欲減退、惡心、嘔吐、厭油、肝大及肝功能異常為主要臨床表現(xiàn)。部分病例有發(fā)熱和黃疸；少數(shù)病例病程遷延轉(zhuǎn)為慢性， 或發(fā)展為肝硬化甚至肝癌；重者病情進(jìn)展迅猛可發(fā)展為重型肝炎。乙型肝炎屬全球流行性病毒感染性疾病， 尤其在國內(nèi)部分地區(qū)發(fā)病率較高。乙型肝炎會(huì)隨著病癥發(fā)展進(jìn)而增加患者肝硬化、肝細(xì)胞癌等惡性疾病發(fā)病率， 同時(shí)目前臨床中對(duì)于該病的治療尚無特效藥物或療法， 導(dǎo)致乙型肝炎對(duì)患者、家庭、社會(huì)等產(chǎn)生沉重負(fù)擔(dān)[1]。對(duì)此如何在乙型肝炎病發(fā)初期明確診斷成為當(dāng)前臨床中較為關(guān)注的問題， 當(dāng)前臨床中主要通過免疫學(xué)方面結(jié)合乙型肝炎血清標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)診斷。本文通過分析ECLIA、ELISA兩種方式在乙肝病毒血清的檢驗(yàn)結(jié)果分析其方式診斷乙型肝炎的應(yīng)用價(jià)值， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2014年7月～2015年12月就診檢查的疑似乙肝患者141例， 男92例， 女49例， 年齡23～65歲，平均年齡（43.5±5.9）歲， 全部患者經(jīng)檢測(cè)均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)會(huì)共同修訂的《病毒性肝炎防治方案》診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1. 2 方法 患者均在晨間空腹取肘靜脈血10 ml， 行離心分離血清（離心率3000 r/min， 離心15 min）， 隨后將血清樣本均分為兩份待檢。ECLIA法定量檢測(cè)乙肝病毒血清選擇美國雅培公司生產(chǎn)的ARCHITECT i2000sr型化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)進(jìn)行檢驗(yàn)， 采用該公司同批進(jìn)口試劑， 按照操作說明書進(jìn)行規(guī)范操作， 行化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析。ELISA定性測(cè)定選擇鄭州安圖實(shí)驗(yàn)儀器有限公司生產(chǎn)Iwo-960 型洗板機(jī)與PHOMO酶標(biāo)儀， 選擇上海榮盛生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的試劑， 嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行規(guī)范操作。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在本次研究中， 141例疑似乙肝患者通過ECLIA、ELISA兩種方式檢驗(yàn)病毒血清， 其中ELISA方式檢驗(yàn)乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb） 與ECLIA檢測(cè)結(jié)果比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；但是兩種方式檢測(cè)HBeAb標(biāo)志物差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。其中HBsAg符合率94.33%， HBsAb符合率95.04%， HBeAg符合率94.33%， HBeAb符合率80.14%， HBcAb符合率95.04%。見表1。

3 討論

乙型肝炎病毒屬全世界各地區(qū)均較為多發(fā)的傳染性疾病， 而我國作為乙型肝炎高發(fā)國， 其中約有7%～11%人員攜帶HBsAg[2]。HBsAg是指人體在感染乙型病毒性肝炎之后機(jī)體免疫系統(tǒng)針對(duì)HBV特點(diǎn)形成特異性抗體。不過目前我國臨床中對(duì)于該病癥尚無特效藥物或療法， 因此針對(duì)HBsAg的早期診斷具有重要意義[3]。本組研究中分別采用ECLIA和ELISA檢驗(yàn)乙肝病毒血清， 并對(duì)兩種方式進(jìn)行對(duì)照性研究分析， 其結(jié)果表明采用ECLIA技術(shù)在檢測(cè)HBeAb具有較高陽性檢出率， 顯著高于ELISA方式， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 不過兩種方式 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb標(biāo)志物檢測(cè)比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。作者對(duì)此結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)分析認(rèn)為， ELISA屬于我國基層醫(yī)院最為常用的乙肝檢測(cè)手段， 其具有操作簡(jiǎn)便、檢驗(yàn)迅速以及成本低廉等優(yōu)點(diǎn)而廣泛應(yīng)用。但是這一檢測(cè)方法在乙肝病毒血清標(biāo)志物的檢測(cè)中雖能夠進(jìn)行定性分析， 不過在定量分析中尚有不足， 尤其當(dāng)血清標(biāo)本中濃度過高時(shí)易出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象， 加之檢驗(yàn)中抗體與抗體試劑的生產(chǎn)差異性也會(huì)造成誤差， 影響檢驗(yàn)結(jié)果。該方式利用電磁鐵控制的順磁性微粒形成自動(dòng)化操作， 避免了人為操作存在的失誤率， 加強(qiáng)了精確定量分析的可行性；加之電磁鐵的電磁快速消失性有利于游離抗體和復(fù)合抗體的分離， 因此減少游離抗體所產(chǎn)生的陽性影響， 增加患者陰性檢出率， 增加HBeAb在化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)中的特異性[4-7]。

綜上所述， 在乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中采用ECLIA診斷價(jià)值顯著高于ELISA方式， 前者在乙型肝炎病毒HBeAb陽性檢出率明顯高于后者， 可在乙肝發(fā)病初期進(jìn)行發(fā)現(xiàn)， 為今后病情治療控制提供重要數(shù)據(jù)參考， 具有重要臨床意義。不過從經(jīng)濟(jì)學(xué)角度， ELISA方式成本相對(duì)低廉， 在我國基層應(yīng)用廣泛， 而ECLIA技術(shù)檢驗(yàn)成本相對(duì)較高， 難以在基礎(chǔ)醫(yī)院普及， 尚需進(jìn)一步發(fā)展。

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[收稿日期：2015-12-29]