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    玉米赤霉烯酮對斷奶小母豬生產(chǎn)性能、血清抗氧化功能和免疫功能的影響

    2017-08-16 09:40:00楊立杰王淑靜楊維仁黃麗波劉法孝姜淑貞楊在賓
    關(guān)鍵詞:赤霉增殖率烯酮

    楊立杰 王淑靜 楊維仁 黃麗波 劉法孝 姜淑貞 楊在賓

    (山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,泰安271018)

    玉米赤霉烯酮對斷奶小母豬生產(chǎn)性能、血清抗氧化功能和免疫功能的影響

    楊立杰 王淑靜 楊維仁 黃麗波 劉法孝 姜淑貞*楊在賓*

    (山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,泰安271018)

    為了研究不同水平玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)污染飼糧對斷奶小母豬生產(chǎn)性能、血清抗氧化功能、血清抗體水平及外周血淋巴細(xì)胞增殖率的影響。將40頭健康三元雜交(杜×長×大)斷奶小母豬按日齡[(35±1)日齡]和平均體重[(14.01±0.86) kg]分為4組,對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(ZEA水平的測定值為0 mg/kg),試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.5、1.0及1.5 mg/kg ZEA[ZEA水平的測定值分別為(0.52±0.07) mg/kg、(1.04±0.03) mg/kg和(1.51±0.13) mg/kg]。預(yù)試期10 d,正試期35 d。結(jié)果表明:飼糧ZEA對斷奶小母豬平均日采食量、平均日增重和料重比沒有顯著影響(P>0.05)。與對照組相比,ZEA顯著降低了血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px,0.5、1.0和1.5 mg/kg ZEA)活性、豬瘟(1.0和1.5 mg/kg ZEA)和偽狂犬病病毒抗體水平(1.5 mg/kg ZEA)以及外周血淋巴細(xì)胞增殖率(1.0和1.5 mg/kg ZEA)(P<0.05),而顯著升高了血清丙二醛(MDA,0.5、1.0和1.5 mg/kg ZEA)含量(P<0.05)。隨著飼糧中ZEA水平的升高,斷奶小母豬的料重比呈一次線性降低趨勢(P=0.075),血清GSH-Px、超氧化物歧化酶(SOD)活性,血清病毒(豬瘟、偽狂犬病和高致病性豬藍(lán)耳病病毒)抗體水平和外周血淋巴細(xì)胞增殖率均呈一次線性降低(P<0.05),而血清MDA含量則呈一次線性升高(P<0.05)。由此可見,飼糧中0.5 mg/kg的ZEA足以誘導(dǎo)小母豬的氧化應(yīng)激反應(yīng),1.0 mg/kg的ZEA能夠顯著降低斷奶小母豬的特異性體液免疫和細(xì)胞免疫功能。

    玉米赤霉烯酮;斷奶小母豬;生產(chǎn)性能;谷胱甘肽過氧化物酶;丙二醛;抗體水平;淋巴細(xì)胞增殖率

    玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)又名F-2毒素,是由鐮刀菌產(chǎn)生的一種2,4-二羥基苯甲酸內(nèi)酯類化合物[1]。調(diào)查結(jié)果顯示,ZEA是中國飼料原料及配合飼料檢出水平最高的霉菌毒素之一[2]。飼料中較高水平的ZEA能夠引起母豬不孕、流產(chǎn)和假發(fā)情等繁殖障礙[3],長期飼喂低水平ZEA飼料,造成母豬發(fā)情周期延長、產(chǎn)仔數(shù)減少、仔豬體弱、死胎和不育[4],ZEA已經(jīng)成為養(yǎng)豬業(yè)的第二大殺手[5-6]。國內(nèi)外有關(guān)ZEA的研究多集中在生殖系統(tǒng)[7],而ZEA對斷奶小母豬血清抗氧化功能、血清抗體水平及外周血淋巴細(xì)胞增殖率的影響尚未見系統(tǒng)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在研究飼糧中不同水平ZEA(0.5~1.5 mg/kg)對斷奶小母豬生長性能,血清抗氧化功能,血清豬瘟、偽狂犬病和高致病性豬藍(lán)耳病病毒抗體水平及外周血淋巴細(xì)胞增殖率的影響,以期揭示ZEA的氧化應(yīng)激和免疫毒性,為ZEA的毒性機(jī)制及養(yǎng)豬生產(chǎn)中相關(guān)疾病的防治和繁殖障礙提供理論依據(jù)和思路。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    ZEA購自于以色列Fermentek公司,色譜純,純度保證值為98%。

    1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

    選擇25~28日齡健康的三元雜交(杜×長×大)斷奶雌性小母豬40頭,在產(chǎn)床上繼續(xù)飼養(yǎng)10 d,然后轉(zhuǎn)入試驗(yàn)籠,單籠(0.48 m2)飼養(yǎng),根據(jù)日齡[(35±1) 日齡]和平均體重[(14.01±0.86) kg]分成4組,每組10頭,組間初始體重差異不顯著(P>0.05)。斷奶小母豬基礎(chǔ)飼糧參考NRC(2012)營養(yǎng)需要配制,其組成及營養(yǎng)水平見表1。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.5、1.0和1.5 mg/kg ZEA,ZEA測定值分別為(0.52±0.07) mg/kg、(1.04±0.03) mg/kg和1.51±0.13 mg/kg。預(yù)試期10 d,正試期35 d。

    表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

    1)預(yù)混料為每千克飼糧提供Premix provided the following per kg of the diet:VA 3 300 IU,VD3330 IU,VE 24 IU,VK30.75 mg,VB11.50 mg,VB25.25 mg,VB120.026 mg,泛酸 pantothenic acid 15.00 mg,煙酸 niacin 22.50 mg,生物素 biotin 0.075 mg,葉酸 folic acid 0.45 mg,Mn 6.00 mg,F(xiàn)e 150 mg,Zn 150 mg,Cu 9.00 mg,I 0.21 mg,Se 0.45 mg。

    2)測定值 Measured values。

    單體籠使用塑料漏縫地板,安裝有乳頭飲水器和料槽,小母豬自由采食和飲水。試驗(yàn)開始前對豬舍進(jìn)行全面清掃、消毒,試驗(yàn)期間每周進(jìn)行1次豬舍消毒。舍內(nèi)安裝紅外保溫?zé)?,?周維持試驗(yàn)籠內(nèi)溫度在30 ℃左右,第2周將豬舍內(nèi)環(huán)境溫度維持在26~28 ℃。豬舍相對濕度為65%。預(yù)試期10 d,正試期35 d,自由采食飲水。小母豬管理和免疫按常規(guī)進(jìn)行。其中,豬瘟病毒疫苗于小母豬出生后第21天肌肉注射;偽狂犬病病毒疫苗于小母豬出生后72 h內(nèi)滴鼻,第28天進(jìn)行2次免疫;高致病性豬藍(lán)耳病病毒疫苗于小母豬出生第14天進(jìn)行肌肉注射免疫。試驗(yàn)結(jié)束后小母豬全部屠宰。動(dòng)物試驗(yàn)于2016年4—6月在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧科技園進(jìn)行。

    1.3 ZEA污染飼糧的配制

    將色譜純(純度為98%)的晶體粉末狀ZEA由乙酸乙酯溶解制成溶液,再將含有ZEA的乙酸乙酯溶液噴灑到一定量的滑石粉載體上,并放置過夜使乙酸乙酯揮發(fā),制成1 000 mg/kg的ZEA預(yù)混劑,然后用不含毒素的玉米粉進(jìn)一步將1 000 mg/kg的ZEA預(yù)混劑稀釋成10 mg/kg的ZEA預(yù)混劑,最后按照各組飼糧中ZEA的設(shè)計(jì)水平,用ZEA預(yù)混劑替代配方中的玉米和載體配制成試驗(yàn)飼糧。試驗(yàn)所需飼糧于試驗(yàn)正式開始前1周一次性配合完成,裝袋后儲(chǔ)存于干燥通風(fēng)處。在試驗(yàn)前和試驗(yàn)結(jié)束分別取樣后,立即進(jìn)行飼糧中養(yǎng)分含量和毒素水平檢測。取樣方法按照《飼料采樣方法》(GB/T 14699.1—1993)。

    1.4 飼糧常規(guī)養(yǎng)分和毒素的測定

    飼糧常規(guī)養(yǎng)分測定參考AOAC(2012)的方法進(jìn)行。粗蛋白質(zhì)含量用凱氏定氮法測定;消化能用HR-15氧彈式熱量計(jì)測定;鈣含量根據(jù)高錳酸鉀滴定法測定;總磷含量根據(jù)鉬黃比色法測定;氨基酸含量用日立835-50氨基酸自動(dòng)分析儀進(jìn)行測定。

    飼糧毒素水平測定:飼糧中ZEA、嘔吐毒素、黃曲霉毒素和煙曲霉毒素水平委托青島出入境檢測檢疫局測定。采用免疫親和柱層析凈化,以液相色譜法熒光檢測器測定ZEA和黃曲霉毒素的水平,外標(biāo)法定量。采用免疫親和層析凈化高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法,以液相色譜結(jié)合紫外檢測器測定煙曲霉毒素和嘔吐毒素的水平,外標(biāo)法定量。黃曲霉毒素、ZEA、嘔吐毒素和煙曲霉毒素的最低檢測限分別為1.0 μg/kg、0.1 mg/kg、0.1 mg/kg和0.25 mg/kg。各組飼糧ZEA的實(shí)際測定值分別為0 mg/kg(0、0) mg/kg,(0.52±0.07) mg/kg(0.59、0.45 mg/kg),(1.04±0.03) mg/kg(1.01、1.07 mg/kg)和(1.51±0.13) mg/kg(1.38、1.64 mg/kg)(括號(hào)內(nèi)為2次的測定值),2次均未檢測到其他毒素或者毒素水平低于檢測限水平。

    1.5 樣品采集與指標(biāo)測定

    1.5.1 生長性能測定

    每天記錄小母豬采食量與剩料量,試驗(yàn)前后對小母豬進(jìn)行稱重,計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

    1.5.2 血樣的采集、處理與測定

    正試期第35天晨飼前,對小母豬進(jìn)行前腔和耳緣靜脈空腹采血。使用真空抗凝管(內(nèi)加K2EDTA)采集耳緣靜脈全血15 mL,采血后立即顛倒混勻8次,血液標(biāo)本于0 ℃中暫存,立即帶回實(shí)驗(yàn)室用于測定外周血淋巴細(xì)胞增殖率。另用真空促凝管采集前腔靜脈血30 mL,于3 000 r/min下離心10 min分離血清,用以測定抗體水平、抗氧化功能。

    1.5.3 血清抗氧化功能分析

    血清中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量均采用752型紫外可見分光光度計(jì)測定,具體步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行測定。GSH-Px試劑盒(A005)、MDA試劑盒(A003)和SOD試劑盒(A001-1)購于南京建成生物工程研究所。

    1.5.4 血清抗體水平分析

    按照豬瘟、偽狂犬病和高致病性豬藍(lán)耳病病毒抗體酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒(CIVTEST SUISHC/PPC,法國LSI公司)說明書步驟進(jìn)行操作,ELISA儀(FAME 24/20,瑞士HAMILTON公司)測450 nm波長下吸光度(OD)值,與ELISA試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)品及其對應(yīng)OD值進(jìn)行比對,進(jìn)行抗體水平分析。

    1.5.5 外周血淋巴細(xì)胞增殖率的測定

    血液預(yù)處理:將全血與D-Hanks溶液按1∶1混合,加入到淋巴細(xì)胞分離液中于2 000 r/min 離心30 min。取中間白細(xì)胞部分,用紅細(xì)胞裂解液裂解其中紅細(xì)胞后,用RPMI-1640(美國Hyclone公司)清洗3次,每次清洗后離心5 min(2 000 r/min),用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)(應(yīng)在95%以上),然后將脾淋巴細(xì)胞懸浮于RPMI-1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞密度到2×106個(gè)/mL。

    淋巴細(xì)胞增殖率測定:將上述細(xì)胞懸液分加于96孔培養(yǎng)板中,每孔190 μL,同時(shí)加10 μL伴刀豆凝集素A(ConA)。將培養(yǎng)板置于5%的CO2培養(yǎng)箱內(nèi),37 ℃培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結(jié)束前4 h,每孔加入100 μL 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT),繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束后,每孔吸出100 μL上清液,加入100 μL二甲基亞砜(DSMO)溶解紫色結(jié)晶產(chǎn)物,用酶聯(lián)免疫檢測儀在570 mn波長下測定OD值。以對照組吸光度值為1,將試驗(yàn)組與對照組進(jìn)行比較,分析得出各試驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)量相對于對照組的百分比,即為淋巴細(xì)胞增殖率。

    1.6 數(shù)據(jù)處理與分析

    數(shù)據(jù)分析采用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件,各組間差異采用單因素方差(one-way ANOVA)分析,采用正交多項(xiàng)式比較法對不同ZEA水平梯度的處理效應(yīng)進(jìn)行一次線性回歸分析,用Duncan氏多組極差檢驗(yàn)法進(jìn)行多重比較,顯著性水平P<0.05。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 ZEA對斷奶小母豬生長性能的影響

    由表2可知,ZEA對斷奶小母豬的平均日增重、平均日采食量和料重比均沒有顯著影響(P>0.05)。但是,隨著飼糧ZEA水平的升高,飼糧料重比呈一次線性降低的趨勢(P=0.075)。

    2.2 ZEA對斷奶小母豬血清抗氧化功能的影響

    由表3可知,與對照組相比,0.5、1.0和1.5 mg/kg ZEA組的血清GSH-Px活性均顯著降低(P<0.05),而血清MDA含量則顯著升高(P<0.05)。隨著飼糧ZEA水平的增加,血清GSH-Px和SOD活性呈一次線性降低(P<0.05),血清MDA含量則呈一次線性升高(P<0.05)。

    表2 玉米赤霉烯酮對斷奶小母豬生產(chǎn)性能的影響

    同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母者差異顯著(P<0.05)。下表同。

    Values in the same row with different letter superscripts differed significantly (P<0.05). The same as below.

    表3 玉米赤霉烯酮對斷奶小母豬血清抗氧化功能的影響

    2.3 ZEA對斷奶小母豬血清抗體水平的影響

    由表4可知,1.5 mg/kg ZEA組的血清豬瘟、偽狂犬病病毒抗體水平均顯著低于對照組(P<0.05),1.0 mg/kg ZEA組的血清豬瘟病毒抗體水平顯著低于對照組(P<0.05),各組間的血清高致

    病性豬藍(lán)耳病病毒抗體水平差異不顯著(P>0.05)。隨著飼糧ZEA水平的增加,斷奶小母豬的血清豬瘟、偽狂犬病和高致病性豬藍(lán)耳病病毒抗體水平均呈一次線性降低(P<0.05)。

    表4 玉米赤霉烯酮對斷奶小母豬血清抗體水平的影響(以O(shè)D450 nm表示)

    2.4 ZEA對斷奶小母豬外周血淋巴細(xì)胞增殖率的影響

    由圖1可知,與對照組相比,1.0和1.5 mg/kg ZEA組的外周血淋巴細(xì)胞增殖率顯著降低(P<0.05),而0.5 mg/kg組無顯著變化(P>0.05)。隨著飼糧ZEA水平的增加,斷奶小母豬的外周血淋巴細(xì)胞增殖率呈一次線性降低(P<0.05)。

    3 討 論

    近期有關(guān)ZEA在動(dòng)物飼糧中的研究,多是采用已知ZEA水平的天然污染飼糧為試驗(yàn)材料[1,8-10]。為了避免天然污染飼糧中,其他毒素對ZEA毒性的機(jī)制研究產(chǎn)生的干擾,本研究選擇高純度ZEA,在本實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果[1,3,9-10]基礎(chǔ)上,繼續(xù)探索較低水平ZEA(0.5~1.5 mg/kg)對斷奶小母豬的氧化應(yīng)激和免疫毒性。

    數(shù)據(jù)柱形標(biāo)注不同字母表示差異顯著(P<0.05)。

    Data columns with different letters mean significant difference (P<0.05).

    圖1 玉米赤霉烯酮對斷奶小母豬外周血淋巴細(xì)胞增殖率的影響

    Fig.1 Effects of ZEA on lymphocyte proliferation rate in peripheral blood of weaning gilts (n=10)

    3.1 ZEA對斷奶小母豬生長性能的影響

    ZEA在斷奶小母豬平均日采食量、平均日增重及料重比方面的研究結(jié)論并不一致。有研究報(bào)道,斷奶仔豬飼糧中添加3 mg/kg的ZEA沒有顯著影響仔豬平均日采食量、平均日增重和料重比[11]。飼糧添加1~3 mg/kg的ZEA對仔豬的平均日增重和料重比也沒有顯著改變[12]。然而Powell-Jones等[13]研究發(fā)現(xiàn),ZEA具有潛在促生長作用,而在結(jié)論中,并未對ZEA具體水平進(jìn)行分析。本研究條件下,飼糧中添加0.5~1.5 mg/kg ZEA對小母豬的平均日采食量、平均日增重和料重比均沒有顯著影響,但值得一提的是,斷奶小母豬的料重比隨著ZEA水平的增加呈現(xiàn)出線性降低趨勢(P=0.075),表明低水平(0.5~1.5 mg/kg)ZEA具有潛在的促生長作用。另有報(bào)道顯示,隨著飼糧中ZEA水平(3.0~9.0 mg/kg)的增加,母豬(初始體重為64 kg)的采食量、平均日增重和飼糧報(bào)酬均呈現(xiàn)下降趨勢[14]。綜上所述,飼糧中不同水平的ZEA在生豬不同生長階段具有不同的作用效果,有關(guān)ZEA水平與動(dòng)物生長性能之間的相關(guān)性及其作用機(jī)理的研究,尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。

    3.2 ZEA對斷奶小母豬血清抗氧化功能的影響

    自由基反應(yīng)對動(dòng)物機(jī)體的防御機(jī)制是必要的,正常動(dòng)物體內(nèi)自由基的產(chǎn)生與清除處于動(dòng)態(tài)平衡。研究表明,ZEA能夠刺激動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生氧化應(yīng)激[15-16],使機(jī)體氧化能力超過抗氧化能力,進(jìn)而增加動(dòng)物體內(nèi)氧自由基的數(shù)量,最終導(dǎo)致生物膜脂過氧化[17-18]。飼糧中添加2.0和3.2 mg/kg ZEA使仔豬血清中GSH-Px的活性顯著低于不添加ZEA組[19]。血清MDA含量作為反映細(xì)胞損傷的生物標(biāo)記物,在本研究條件下,對照組血清MDA含量均顯著低于ZEA組,且隨著ZEA水平的增加呈一次線性增加;對照組血清GSH-Px活性顯著高于ZEA組,隨著ZEA水平增加呈一次線性下降。我國《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定仔豬飼糧中ZEA最高限定水平為0.5 mg/kg(GB 13078.2—2006),歐盟關(guān)于仔豬飼糧中ZEA的最高限定水平為0.1 mg/kg[20]。值得強(qiáng)調(diào)的是,本研究條件下,飼糧中添加0.5 mg/kg ZEA足以能夠引起仔豬氧化應(yīng)激反應(yīng),使機(jī)體血清抗氧化功能顯著降低,給我國《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》仔豬飼糧中ZEA限量標(biāo)準(zhǔn)提供了理論依據(jù)。盡管研究者們對ZEA降低血清抗氧化功能的觀點(diǎn)普遍認(rèn)可[21-23],但尚未見低水平ZEA對動(dòng)物機(jī)體啟動(dòng)過氧化機(jī)制的研究報(bào)道,其分子機(jī)制有待畜牧工作者進(jìn)行更深層次的探究。

    3.3 ZEA對斷奶小母豬血清抗體水平的影響

    豬瘟、偽狂犬病和高致病性豬藍(lán)耳病均是對仔豬健康有巨大威脅的傳染病。多數(shù)情況下,免疫接種能夠起到相對理想的效果,但是多年來免疫失敗或豬群體免疫反應(yīng)低下的現(xiàn)象也是屢見不鮮,成為疫情爆發(fā)的重大安全隱患。報(bào)道顯示,正常豬瘟免疫18 d后,2.0和3.2 mg/kg ZEA組仔豬體內(nèi)豬瘟病毒抗體水平顯著低于對照組[24]。本研究結(jié)果顯示,飼糧中添加1.0和1.5 mg/kg ZEA能夠顯著降低豬瘟病毒抗體水平,且1.5 mg/kg ZEA組偽狂犬病病毒抗體水平顯著低于對照組;豬瘟、偽狂犬病和高致病性豬藍(lán)耳病病毒抗體水平隨著飼糧中ZEA水平的增加均呈一次線性下降,提示ZEA抑制了病毒抗體的產(chǎn)生,對斷奶小母豬體液免疫功能產(chǎn)生了負(fù)面影響。單一毒素ZEA啟動(dòng)機(jī)體病毒抗體水平降低的最低水平尚未見報(bào)道,因此飼糧中ZEA水平與斷奶小母豬體內(nèi)病毒抗體水平變化的相關(guān)性探索及其機(jī)理,將是本課題組接下來的重要研究內(nèi)容之一。

    3.4 ZEA對斷奶小母豬外周血淋巴細(xì)胞增殖率的影響

    淋巴細(xì)胞的增殖能力是反映細(xì)胞免疫功能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。Lioi等[25]研究發(fā)現(xiàn),ZEA能夠抑制牛淋巴細(xì)胞的增殖;另有研究顯示,ZEA能夠極顯著抑制離體小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖[26-27]。眾多研究表明,離體條件下ZEA可使淋巴細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)失調(diào)而發(fā)揮免疫毒性作用,對小鼠外周血淋巴細(xì)胞產(chǎn)生直接毒害作用[28-30]。前人關(guān)于ZEA對淋巴細(xì)胞增殖率的研究結(jié)論,大多是在離體條件下得出的,而采食ZEA飼糧對斷奶小母豬外周血淋巴細(xì)胞增殖率的研究卻鮮有報(bào)道。本研究結(jié)果表明,飼糧中添加1.0 mg/kg的ZEA能夠使小母豬外周血淋巴細(xì)胞增殖率顯著降低,提示飼糧中1.0 mg/kg ZEA足以誘導(dǎo)小母豬的細(xì)胞免疫。本課題組將通過細(xì)胞和分子生物學(xué)手段,進(jìn)一步探索飼糧中ZEA水平與斷奶小母豬細(xì)胞免疫和體液免疫的相關(guān)性。

    4 結(jié) 論

    ① 飼糧中0.5~1.5 mg/kg ZEA對斷奶小母豬生長性能沒有顯著影響,但小母豬料重比隨飼糧ZEA水平的升高呈一次線性降低。

    ② 飼糧0.5 mg/kg ZEA足以誘導(dǎo)斷奶小母豬血清的氧化應(yīng)激反應(yīng),血清GSH-Px活性顯著降低,血清MDA含量則顯著升高,且二者隨飼糧ZEA水平升高呈一次線性變化。

    ③ 飼糧1.0 mg/kg ZEA足以誘導(dǎo)斷奶小母豬的體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng),血清病毒(豬瘟、偽狂犬病和高致病性豬藍(lán)耳病病毒)抗體水平和外周血淋巴細(xì)胞增殖率隨飼糧ZEA水平增加均呈一次線性降低。

    [1] 陳祥興,楊維仁,張崇玉,等.鐮刀菌毒素對斷奶仔豬生長性能、小腸二糖酶活性和抗氧化能力的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(6):1875-1882.

    [2] 戎曉平,趙麗紅,計(jì)成,等.我國部分地區(qū)飼料原料及配合飼料玉米赤霉烯酮污染情況調(diào)研[J].中國畜牧雜志,2015,51(22):20-24.

    [3] JIANG S Z,YANG Z B,YANG W R,et al.Effects of purified zearalenone on growth performance,organ size,serum metabolites,and oxidative stress in postweaning gilts[J].Journal of Animal Science,2011,89(10):3008-3015.

    [4] 陳繼發(fā),曲湘勇,彭燦陽,等.玉米赤霉烯酮對豬生產(chǎn)的影響及其毒性吸附研究[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(3):680-686.

    [5] FITZPATRICK D W,PICKEN C A,MURPHY L C,et al.Measurement of the relative binding affinity of zearalenone,α-zearalenol and β-zearalenol for uterine and oviduct estrogen receptors in swine,rats and chickens:an indicator of estrogenic potencies[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part C:Comparative Pharmacology,1989,94(2):691-694.

    [6] 鄧友田,袁慧.玉米赤霉烯酮毒性機(jī)理研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2007,28(2):89-92.

    [7] ZHENG W L,PAN S Y,WANG G G,et al.Zearalenone impairs the male reproductive system functions via inducing structural and functional alterations of sertoli cells[J].Environmental Toxicology and Pharmacology,2016,42:146-155.

    [8] D?LL S,GERICKE S,DNICKE S,et al.The efficacy of a modified aluminosilicate as a detoxifying agent inFusariumtoxin contaminated maize containing diets for piglets[J].Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition,2005,89(9/10):342-358.

    [9] 楊立杰,牛群升,張崇玉,等.短期飼喂鐮刀菌毒素飼糧誘導(dǎo)斷奶仔豬陰戶、血清代謝和氧化應(yīng)激指標(biāo)的改變[J].豬業(yè)科學(xué),2016,33(3):85-88.

    [10] 牛群升,楊維仁,黃麗波,等.鐮刀菌毒素對斷奶小母豬陰戶、生殖器官指數(shù)、子宮雌激素受體分布和表達(dá)的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(5):1525-1533.

    [12] 趙虎,楊在賓,楊維仁,等.玉米赤霉烯酮對仔豬生產(chǎn)性能和內(nèi)臟器官發(fā)育影響的研究[J].糧食與飼料工業(yè),2008(10):37-38.

    [13] POWELL-JONES W,RAEFORD S,LUCIER G W.Binding properties of zearalenone mycotoxins to hepatic estrogen receptors[J].Molecular Pharmacology,1981,20(1):35-42.

    [14] YOUNG L G,VESONDER R F,FUNNELL H S,et al.Moldy corn in diets of swine[J].Journal of Animal Science,1981,52(6):1312-1318.

    [15] 王建花,張燚,龍淼.玉米赤霉烯酮所致氧化應(yīng)激的研究進(jìn)展[J].畜牧與飼料科學(xué),2015,36(9):30-32.

    [16] 王旭,黃德玉,吳慶華,等.真菌毒素引起的氧化應(yīng)激及其毒理學(xué)意義[J].生態(tài)毒理學(xué)報(bào),2015,10(6):62-70.

    [17] LAUTERT C,FERREIRO L,WOLKMER P,et al.Individualinvitroeffects of ochratoxin A,deoxynivalenol and zearalenone on oxidative stress and acetylcholinesterase in lymphocytes of broiler chickens[J].SpringerPlus,2014,3(1):506.

    [18] 伍宇超,楊維仁,楊在賓,等.低劑量玉米赤霉烯酮和吸附劑對育成期蛋雞生長性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(4):1137-1144.

    [19] 姜淑貞.玉米赤霉烯酮對斷奶仔豬的毒性初探及改性蒙脫石的脫毒效應(yīng)研究[D].博士學(xué)位論文.泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.

    [20] European Commission.Commission recommendation of 17 August 2006 on the presence of deoxynivalenol,zearalenone,ochratoxin A,T-2 and HT-2 and fumonisins in products intended for animal feeding[J].Official Journal of the European Union,2006,229:7-9.

    [21] 朱祖賢,朱風(fēng)華,王友令,等.霉菌毒素對肉雞抗氧化和免疫功能的影響[J].中國畜牧雜志,2014,50(19):78-82.

    [22] 尹淑彤,張圓圓,單安山,等.玉米赤霉烯酮對鼠和豬母體免疫損傷的影響及改性埃洛石脫毒作用的研究[C]//中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì).中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)分會(huì)第七屆中國飼料營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集.北京:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì),2014.

    [23] 徐明龍,郭保平,胡進(jìn),等.玉米赤霉烯酮對原代大鼠睪丸支持細(xì)胞增殖相關(guān)基因表達(dá)以及氧化應(yīng)激的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2016,44(4):298-302.

    [24] 姜淑貞,楊維仁,楊在賓,等.玉米赤霉烯酮污染日糧添加改性蒙脫石對斷奶仔豬免疫指標(biāo)的影響[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,45(16):3382-3390.

    [25] LIOI M B,SANTORO A,BARBIERI R,et al.Ochratoxin A and zearalenone:a comparative study on genotoxic effects and cell death induced in bovine lymphocytes[J].Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis,2004,557(1):19-27.

    [26] 范小龍,劉長永,剡海闊,等.玉米赤霉烯酮對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖及分泌細(xì)胞因子的影響[J].中國畜牧獸醫(yī),2011,38(5):48-54.

    [27] 潘順葉,王光光,范文桐,等.玉米赤霉烯酮誘導(dǎo)CTLL-2細(xì)胞凋亡途徑的研究[J].中國獸醫(yī)科學(xué),2016,46(3):398-402.

    [28] 王亞超,鄧俊良,徐世文.玉米赤霉烯酮對體外培養(yǎng)雞脾臟淋巴細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的影響[C]//中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì).中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜內(nèi)科學(xué)分會(huì)第七屆代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集(下冊).北京:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì),2011.

    [29] 許利娜.玉米赤霉烯酮對離體培養(yǎng)小鼠胸腺細(xì)胞、胸腺上皮細(xì)胞及脾臟淋巴細(xì)胞的毒性研究[D].碩士學(xué)位論文.廣州:華南農(nóng)業(yè)大學(xué),2008.

    [30] 梁梓森,許利娜,鄧銜柏,等.玉米赤霉烯酮對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖與細(xì)胞凋亡的影響[C]//中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì).中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)分會(huì)第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集.楊凌:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì),2008.

    *Corresponding authors: JIANG Shuzhen, associate professor, E-mail: shuzhen305@163.com; YANG Zaibin, professor, E-mail: yzb204@163.com

    (責(zé)任編輯 王智航)

    Effects of Zearalenone on Production Performance, Serum Antioxidant Capacity and Immune Function of Weaning Gilts

    YANG Lijie WANG Shujing YANG Weiren HUANG Libo LIU Faxiao JIANG Shuzhen*YANG Zaibin*

    (CollegeofAnimalScienceandTechnology,ShandongAgriculturalUniversity,Tai’an271018,China)

    The aim of the present study was to investigate the effects of diet polluted by different levels of zearalenone (ZEA) on performance, serum antioxidant capacity, serum antibody levels and lymphocyte proliferation rate of weaning gilts. Forty healthy weaning piglets (Duroc × Landrace × Large white) were allocated into 4 groups according to age [(35±1) days of age] and average body weight [(14.01±0.86) kg]. Piglets were fed a basal diet supplemented with 0 (Control), 0.5, 1.0 and 1.5 mg/kg ZEA, respectively, and the measured values of ZEA were 0 mg/kg, (0.52±0.07) mg/kg, (1.04±0.03) mg/kg and (1.51±0.13) mg/kg, respectively. The adaptation period lasted for 10 days and the trial period lasted for 35 days. The results showed as follows: average daily feed intake, average daily gain and feed to gain ratio (F/G) of weaning piglets were not significantly affected by dietary ZEA (P>0.05). Compared with control group, serum glutathione peroxidase (GSH-Px) activity in 0.5, 1.0 and 1.5 mg/kg ZEA groups, antibody levels of classical swine fever virus in 1.0 and 1.5 mg/kg ZEA groups and herpes virus in 1.5 mg/kg ZEA group, and lymphocyte proliferation rate in peripheral blood in 1.0 and 1.5 mg/kg ZEA groups were significantly decreased (P<0.05), however, serum malondialdehyde (MDA) content in 0.5, 1.0 and 1.5 mg/kg ZEA groups was significantly increased (P<0.05). With the increase of ZEA level in diet for weaning gilts, feed to gain ratio showed a linear decreasing trend (P=0.075), serum activities of GSH-Px, superoxide dismutase (SOD), serum antibody levels of viruses (classical swine fever virus, herpes virus and porcine reproductive and respiratory syndrome virus) and peripheral blood lymphocyte proliferation rate in peripheral blood showed linear decreases (P<0.05), and serum MDA showed a linear increase (P<0.05). Thus, ZEA at 0.5 mg/kg is sufficient to induce oxidative stress in gilts, and ZEA at 1.0 mg/kg can significantly reduce both the specific humoral and cellular immune function of weaning gilts.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(8):2843-2850]

    zearalenone; weaning gilts; growth performance; glutathione peroxidase; malondialdehyde; antibody level; lymphocyte proliferation rate

    10.3969/j.issn.1006-267x.2017.08.029

    2017-02-01

    國家自然科學(xué)基金(31572441);山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)項(xiàng)目(SDAIT-08-04)

    楊立杰(1992—),男,山東濰坊人,碩士研究生,動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)專業(yè)。E-mail: 724832205@qq.com

    *通信作者:姜淑貞,副教授,碩士生導(dǎo)師,E-mail: shuzhen305@163.com;楊在賓,教授,博士生導(dǎo)師,E-mail: yzb204@163.com

    S816;S828

    A

    1006-267X(2017)08-2843-08

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