斜脈暗羅葉正丁醇提取物抗腫瘤活性研究

熊躍?周軍

[摘要] 目的 研究斜脈暗羅葉正丁醇提取物與抗癌活性及免疫功能的影響。 方法 制備S180荷瘤小鼠動物模型，40只小鼠采用隨機數字表法分成正常對照組、模型組、斜脈暗羅葉低劑量組、斜脈暗羅葉中劑量組、斜脈暗羅葉高劑量組。隔日給予各組同體積的溶劑對照液以及不同劑量的斜脈暗羅葉正丁醇提取物，20天后處死各組小鼠。觀察S180荷瘤小鼠胸腺重量及指數、脾重量及指數、腫瘤抑制率的影響。 結果 斜脈暗羅葉正丁醇提取物與模型組比較，胸腺重量及指數、脾重量及指數明顯增加，腫瘤生長減緩，腫瘤重量下降。 結論 （1）斜脈暗羅葉正丁醇提取物能明顯抑制S180荷瘤小鼠腫瘤的生長；（2）其作用可能是通過增強荷瘤小鼠自身免疫功能有關。

[關鍵詞] 斜脈暗羅葉；正丁醇提取物；抗腫瘤；免疫功能

[中圖分類號] R284；R730.5 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2017）09-36-03

Antineoplastic activity of n-butanol extract from polyalthia plagioneura

XIONG Yue1 ZHOU Jun2

1.Pharmaceutical Preparations，Nanchang Hospital of Traditional Chinese and Western Medicine，Nanchang 330003，China；2.Pharmaceutical Preparations，Jiangxi Provincial Chest Hospital，Nanchang 330006，China

[Abstract] Objective To study the antineoplastic activity of n-butanol extract from polyalthia plagioneura and its effects on the immune function. Methods Animal model of S180 tumor-bearing mice was prepared.According to the random number table method，40 mice were randomly assigned into normal control group，model group，low dose polyalthia plagioneura group，middle dose polyalthia plagioneura group and high dose polyalthia plagioneura group.Equal volume of solvent control solution and different doses of n-butanol extract from polyalthia plagioneura leaves were given to all these groups every other day.The mice were killed after 20 days.The changes of thymus gland weight and index，spleen weight and index，tumor inhibition rate in S180 tumor bearing mice were observed. Results Compared with the model groups，thymus gland weight and index and spleen weight and index in groups of n-butanol extract from polyalthia plagioneura leaves were significantly increased，and the tumor growth and tumor weight were decreased. Conclusion （1）N-butanol extract from polyalthia plagioneura leaves can significantly inhibit the growth of S180 tumor of tumor-bearing mice.（2）It may function through boosting the immune function of tumor bearing mice.

[Key words] Polyalthia plagioneura Leaves；N-Butanol extract；Anti-tumor；Immune function

惡性腫瘤是嚴重危害人類健康的主要疾病之一。根據我國衛(wèi)生部的統(tǒng)計，20世紀90年代起隨著生活環(huán)境的惡化以及人們不良的生活方式導致我國腫瘤發(fā)病率呈顯著上升趨勢[1-5]。劉杰等[6]對江西省腫瘤登記地區(qū)老年惡性腫瘤發(fā)病情況進行調查分析。結果顯示2010年江西省地區(qū)腫瘤登記中老年惡性腫瘤患者粗發(fā)病率為813.25/10萬，中標率770.42/10萬。腫瘤的高發(fā)導致患者生活及生存質量受到嚴重影響。然而目前療效卓著的抗腫瘤藥物十分稀少，因此，研究和尋找有效的抗腫瘤藥物是世界醫(yī)學面臨的重要課題。斜脈暗羅葉系番荔枝科暗羅屬植物，在民間常用于治療氣滯腹痛、

痛經、梅核氣等疾病。Yuan Yuan等[7-9]分別證實暗羅屬植物根、莖、葉、枝的提取物對人肺腺癌細胞、肝癌細胞、胃癌細胞和人白血病細胞4種癌細胞均有較強的抑制作用。本研究建立S180荷瘤小鼠模型，并探討斜脈暗羅對S180荷瘤小鼠腫瘤活性的影響?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 藥品與動物

藥品：斜脈暗羅于2008年采自海南省昌江縣霸王嶺自然保護區(qū)；RP-MI1640培養(yǎng)基及小牛血清購自美國Gibco公司。

動物及瘤株：健康昆明種小鼠40只，體質量（20±2）g，雌雄各半。S180瘤細胞株從中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥研究所購進后傳代。40只小鼠采用隨機數字表法分成正常對照組、模型組、斜脈暗羅葉低劑量組、斜脈暗羅葉中劑量組、斜脈暗羅葉高劑量組。

1.2 方法

1.2.1 S180荷瘤小鼠模型建立[7] 小鼠體內腫瘤培養(yǎng)7d處死，抽吸濃稠腹水稀釋制成細胞懸液。注射0.2mL S180細胞懸液，建立S180荷瘤小鼠模型。

1.2.2 給藥 正常對照組不給予任何藥物干預，模型組第二天開始給予磷酸鹽緩沖液（PBS，pH7.4）灌胃0.1mL/10g；斜脈暗羅葉低劑量組第二天開始給予正丁醇提取物0.1mg/kg、斜脈暗羅葉中劑量組第二天開始給予正丁醇提取物0.2mg/kg、斜脈暗羅葉高劑量組第二天開始給予正丁醇提取物0.4mg/kg的斜脈暗羅葉正丁醇提取物灌胃，連續(xù)給藥20d。

1.3 評價指標

比較各組脾臟、胸腺質量及指數、腫瘤重量及抑瘤率。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS18.0進行數據分析，比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組小鼠胸腺水平比較

研究表明，模型組與溶劑對照組比較，模型組小鼠胸腺重量和胸腺指數顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。斜脈暗羅葉正丁醇提取物與模型組溶劑對照組比較，0.1、0.2、0.4mg/kg的斜脈暗羅葉正丁醇提取物均能顯著增加小鼠胸腺重量及指數。見表1。

2.2 各組小鼠脾臟水平比較

研究表明，模型組與溶劑對照組比較，模型組小鼠脾臟重量和脾指數顯著下降，差異具有顯著性意義（P<0.01）。斜脈暗羅葉正丁醇提取物與模型組溶劑對照組比較，0.1、0.2、0.4mg/kg的斜脈暗羅葉正丁醇提取物均能顯著增加小鼠脾臟重量及指數。見表2。

2.3 各組腫瘤活性比較

研究表明，斜脈暗羅葉正丁醇提取物與模型組溶劑對照組比較，0.1、0.2、0.4 mg/kg的斜脈暗羅葉正丁醇提取物均能顯著減少小鼠瘤體重量，抑制率隨濃度增加而增加。見表3。

3 討論

目前手術及放化療是臨床治療腫瘤的主要方法，療效顯著，但創(chuàng)傷性及毒副作用也較大。我國有豐富的藥用植物資源，藥用植物具有療效佳，毒副作用小的特點[10-11]。研究發(fā)現(xiàn)[12]，藥物植物與手術放化療的合理配合，具有增效減毒等效果。有研究表明[13]：暗羅屬植物對人肺腺癌細胞及人胃癌細胞細胞具有明顯活性。本文主要報道斜脈暗羅葉有效成分的提取以及對斜脈暗羅葉正丁醇提取物對S180荷瘤抗腫瘤作用的研究。

我國目前暗羅屬植物約有17種，暗羅屬許多植物可供藥用。藥物研究發(fā)現(xiàn)[14]，暗羅枝、葉中的巰基吡啶類化合物有較強的細胞毒活性，具有抗瘧、抗霉菌的作用。本研究結果顯示，斜脈暗羅葉低、中、高劑量組小鼠胸腺、小脾臟重量和胸腺、小脾臟指數較模型組均有所增加，差異有統(tǒng)計學意義。研究結果還顯示，斜脈暗羅葉低、中、高劑量組小鼠瘤體重量顯著減少，且抑制率隨濃度增加而增加。提示斜脈暗羅葉正丁醇提取物能夠抑制S180荷瘤小鼠腫瘤的增殖，且0.4mg/kg高劑量組抑制S180荷瘤小鼠腫瘤的增殖的效果更顯著。提示斜脈暗羅葉正丁醇提取物能夠抑制小鼠肉瘤細胞S180的增殖，其作用機制可能是通過增強荷瘤小鼠體內自身免疫功能，從而起到對腫瘤細胞提高抵制力的作用。這可能是因為暗羅屬植物中含有烏索酸、鄰羥基苯甲酸等成分[15]。烏索酸具有抗致癌、抗促癌和抗血管生成等作用。另外烏索酸還具有明顯的抗氧功能，能夠起到強心作用。而鄰羥基苯甲酸是一種天然的消炎藥，具有殺菌、消炎等作用。

綜上，斜脈暗羅葉丁醇提取物能夠顯著提高S180荷瘤小鼠腫瘤活性。

[參考文獻]

[1] 梁淑英，何群愛，陳美銀.某地區(qū)小兒腫瘤的流行病學及環(huán)境因素的研究分析[J].中國病案，2016，17（11）：89-91.

[2] 唐飛，吳剛，王芬.2007～2014年銅陵市婦科惡性腫瘤流行病學分析[J].職業(yè)與健康，2016，32（5）：682-684.

[3] 張元，胡錦梁.2005～2015年四川省某三甲醫(yī)院惡性腫瘤住院患者流行病學特征分析[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2016，43（16）：2905-2908，2916.

[4] 陸崇，吳一平，劉濤，等.廣州某三甲醫(yī)院職工1995年～2014年惡性腫瘤流行病學特征[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2016，24（16）：2628-2630.

[5] 董穎.消化道惡性腫瘤流行病學特征與發(fā)病現(xiàn)狀分析[J].醫(yī)學綜述，2014，20（3）：429-431.

[6] 劉杰，朱麗萍，李艾，等.江西省腫瘤登記地區(qū)老年惡性腫瘤發(fā)病分析[J].中國老年學雜志，2014，34（7）：1921-1923.

[7] Yuan Yuan，Guo-jun Huang，Tian-shan Wang，et al.In vitro screening of five Hainan plants of Polyalthia（Annonaceae） against human cancer cell lines with MTT assay[J].Journal of Medicinal Plants Research，2011，5（5）：837-841.

[8] 呂子明，張慶建，陳若云，等.陵水暗羅枝、葉中的化學成分研究[J].中國中藥雜志，2011，36（8）：1024-1027.

[9] 梁蓓蓓，劉華鋼.天然藥物抗腫瘤作用的研究進展[J].中國腫瘤，2007，16（9）：705-708.

[10] 馮耀榮，陳紅淑.冬凌草甲素抗腫瘤活性研究進展[J].中國中醫(yī)藥科技，2016，23（1）：125-126.

[11] 沈京蓮，張紅巖，車玉琴，等.鋸葉棕提取物對GL261膠質瘤大鼠免疫系統(tǒng)的影響[J].中國醫(yī)師雜志，2016，18（1）：52-55.

[12] 于海濤，張 巍，于英君，等.中藥抗腫瘤作用機制的研究[J].中醫(yī)臨床研究，2010，8（2）：88-90.

[13] 李艷紅，李曉波，陸雪瑩，等.熊果酸對H22荷瘤小鼠抗腫瘤及免疫調節(jié)作用[J].實驗動物科學，2013，30（5）：1-5.

[14] 張園，王菁，劉冰晶，等.海南四種暗羅屬植物揮發(fā)油對三種癌細胞的體外增殖抑制作用[J].山東醫(yī)藥，2011，15（51）：62-64.

[15] 劉冰晶，陳光英，簡藍，等.斜脈暗羅莖化學成分研究（Ⅰ）[J].中草藥，2011，42（7）：1264-1266.

（收稿日期：2017-02-28）