自噬在糖尿病腎臟疾病發(fā)病和治療中的意義

李新玉 吳永貴

·綜述·

自噬在糖尿病腎臟疾病發(fā)病和治療中的意義

李新玉 吳永貴

糖尿病腎臟疾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，也是導(dǎo)致終末期腎病的主要原因[1]。DKD與糖尿病患者的病死率密切相關(guān)，能夠直接阻止DKD進(jìn)展的治療措施至關(guān)重要。DKD的臨床癥狀包括尿蛋白排泄增加、腎小球濾過率受損、腎臟功能進(jìn)行性下降，最終導(dǎo)致終末期腎衰竭。高糖環(huán)境介導(dǎo)下細(xì)胞內(nèi)代謝狀態(tài)的改變，包括晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end products,AGEs)堆積、蛋白激酶C激活以及氧化應(yīng)激是DKD的主要發(fā)病機(jī)制[2]。目前，DKD的治療主要集中于患者血糖和血壓的控制，尤其是通過抑制腎素-血管緊張素系統(tǒng)來減少甚至逆轉(zhuǎn)蛋白尿的進(jìn)展。臨床研究表明,一些DKD患者的蛋白尿癥狀是可以逆轉(zhuǎn)或部分逆轉(zhuǎn)的[3]，然而這些治療對一些難治性蛋白尿如腎病綜合征患者是沒有效的。因此，我們需要擴(kuò)展對DKD發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識以尋找新的治療措施。

自噬是進(jìn)化上高度保守的維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)的代謝過程，即細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和受損細(xì)胞器通過溶酶體途徑降解[4]。近年來，自噬作為細(xì)胞生物學(xué)功能上的重要通路而獲得廣泛關(guān)注，在衰老、免疫、炎癥、腫瘤及神經(jīng)退行性疾病等生理和病理過程中均發(fā)揮著重要作用[5]。自噬在腎臟中的作用也受到眾多研究者的關(guān)注，在腎臟的衰老和病變(如急性和慢性腎損傷，腎小球和小管間質(zhì)疾病，遺傳性腎臟疾病等)過程中發(fā)揮重要的保護(hù)作用[6]。同時，也有眾多研究表明DKD的發(fā)病機(jī)制與自噬活動的受損有一定聯(lián)系，自噬在DKD中受到抑制，使得腎臟更易受到糖尿病帶來的損傷[7]。本文總結(jié)了現(xiàn)有實驗研究發(fā)現(xiàn)的自噬在DKD中的作用，并進(jìn)一步深入探討自噬途徑作為治療DKD的新策略的潛在可能。

一、自噬

“自噬”一詞來源于希臘語“自我消化”，其在細(xì)胞內(nèi)主要有兩種功能：一是在營養(yǎng)缺乏的條件下循環(huán)利用細(xì)胞內(nèi)的能量物質(zhì)；二是在不同的應(yīng)激環(huán)境下移除有害的蛋白質(zhì)產(chǎn)物和受損的細(xì)胞器[8]。在過去十幾年間，關(guān)于細(xì)胞自噬機(jī)制的基礎(chǔ)研究已經(jīng)為其在人類健康和疾病中的重要作用提供了證據(jù)[9]。

自噬的形成過程起始于雙層膜結(jié)構(gòu)的小囊泡即吞噬泡的形成。吞噬泡延長，吞噬一部分細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)，延長并融合封閉，形成自噬體。自噬體接著與溶酶體融合，形成自噬溶酶體，其內(nèi)包含的物質(zhì)被降解并循環(huán)利用。自噬體的形成包括四個關(guān)鍵步驟：起始，成核，延長，關(guān)閉[8]。每一個過程都受自噬相關(guān)基因(autophagy related gene,Atg)的精細(xì)調(diào)控。自噬體起始于Unc-51樣蛋白激酶復(fù)合體1(Unc-51-like kinase,Ulk1)的激活。自噬泡的成核依賴磷脂酰肌醇-3激酶3族(phosphatidylinasitol 3-kinase,PI3K)復(fù)合體，包含人空泡分選蛋白34(human vacuolar protein sorting 34,hVps34),Beclin1和Atg14[10]。自噬體的延長包含了兩個泛素樣連接系統(tǒng)：Atg12和微管相關(guān)蛋白輕鏈3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)。細(xì)胞質(zhì)中的LC3-Ⅰ通過兩個連續(xù)性泛素化反應(yīng)，與磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine,PE)結(jié)合，形成了位于自噬體膜表面的LC3-Ⅱ。因此，LC3-Ⅱ的形成象征著自噬體形成，是細(xì)胞和動物實驗中發(fā)生自噬的生物化學(xué)標(biāo)志[8]。隨后自噬體與溶酶體結(jié)合形成自噬溶酶體，其內(nèi)物質(zhì)被溶酶體酶降解。泛素樣結(jié)合蛋白p62/Sequestosome 1(SQSTM1)通過LC3介導(dǎo)定位在自噬體上，由自噬溶酶體系統(tǒng)降解。所以，在自噬缺陷細(xì)胞中可以觀察到p62的聚集[11]。

二、糖尿病環(huán)境下足細(xì)胞自噬

足細(xì)胞，即腎小球上皮細(xì)胞，主要作用是維持腎小球濾過屏障的穩(wěn)定。足細(xì)胞足突功能失調(diào)及足細(xì)胞的死亡是DKD產(chǎn)生大量蛋白尿的原因[12]。自噬在維持足細(xì)胞功能的過程中發(fā)揮著重要的作用。足細(xì)胞是具有高度特異性的終末分化且不能增殖的細(xì)胞，即使在無應(yīng)激的正常環(huán)境下，自噬水平也十分活躍，這表明足細(xì)胞需要一個相當(dāng)高的基礎(chǔ)水平的自噬活動以維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)[5]。

有研究表明足細(xì)胞自噬與DKD的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。Fang等[13]在鏈脲霉素(streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)的糖尿病小鼠和體外高糖培養(yǎng)環(huán)境下的足細(xì)胞中均觀察到自噬活動受損現(xiàn)象，自噬受損進(jìn)一步造成足細(xì)胞的損傷。使用自噬抑制劑抑制足細(xì)胞的基礎(chǔ)自噬水平之后，足細(xì)胞膜蛋白的表達(dá)減少，濾過功能下降，加重了蛋白的漏出。Tagawa等[14]的研究表明，與對照組相比，足細(xì)胞特異性敲除自噬基因Atg5的2型糖尿病小鼠產(chǎn)生了大量蛋白尿，小管間質(zhì)受損更嚴(yán)重，足細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能被破壞，從而更加準(zhǔn)確地說明了自噬在DKD中的保護(hù)作用。因此，高糖環(huán)境破壞了足細(xì)胞的保護(hù)性自噬活動，導(dǎo)致足細(xì)胞的功能紊亂，加重腎功能損傷。(圖1)

注:糖尿病環(huán)境抑制了足細(xì)胞的基礎(chǔ)水平自噬和近端小管細(xì)胞的應(yīng)激誘導(dǎo)自噬,導(dǎo)致大量蛋白尿和近端小管細(xì)胞損傷圖1 糖尿病環(huán)境下足細(xì)胞和近端小管細(xì)胞的自噬示意圖

三、糖尿病環(huán)境下近端小管細(xì)胞自噬

在糖尿病患者中，蛋白尿介導(dǎo)的近端小管損傷，會加速腎臟功能的下降，是腎功能預(yù)后不良的重要因素[15]。自噬在近端小管與在足細(xì)胞中的生理功能有很大差別。正常環(huán)境下，近端小管細(xì)胞的基礎(chǔ)自噬水平很低，但處在應(yīng)激狀態(tài)下時，其自噬水平明顯提高。實驗證明在缺血再灌注損傷以及抗腫瘤藥物等造成的急性腎功能損傷中，近端小管的自噬水平增加，表明自噬功能的激活具有保護(hù)腎臟的作用[16]。而在包括DKD在內(nèi)的許多蛋白尿性腎病中，流入近端腎小管腔內(nèi)的尿蛋白增加，造成了腎毒性物質(zhì)應(yīng)激環(huán)境，從而激活近端小管細(xì)胞的自噬活動以增加尿蛋白的重吸收。所以無論急性或慢性腎毒性物質(zhì)應(yīng)激時，近端小管細(xì)胞自噬的增加都具有腎臟保護(hù)功能。

研究表明近端小管細(xì)胞的自噬活動在高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠模型和Wistar肥胖大鼠模型中均被明顯被抑制，導(dǎo)致p62蛋白和受損的線粒體在近端小管細(xì)胞大量堆積，加重了腎組織損傷[17-18]。同時近端小管的自噬不足也在2型糖尿病患者腎活檢標(biāo)本中得到進(jìn)一步證實[17]。所以糖尿病介導(dǎo)的自噬損傷可能是造成近端小管細(xì)胞受損的原因，因此恢復(fù)其自噬功能可能成為治療DKD大量蛋白尿患者的新方向。(圖1)

四、DKD中自噬營養(yǎng)相關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制

1.mTORC1通路 哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體(mammalian target of rapamycin complex,mTORC)由mTORC1和mTORC2組成，是高度保守的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶復(fù)合體，具有調(diào)控細(xì)胞生長，增殖，分化等多種功能。在細(xì)胞內(nèi)氨基酸含量和胰島素水平充足的情況下，mTORC1通過直接磷酸化，抑制Ulk1復(fù)合體的活動，負(fù)向調(diào)控自噬[19]。

實驗研究證實mTORC1通路在人類和動物模型的1型和2型糖尿病中均被激活[20]。Inoki等[21]通過足細(xì)胞特異性敲除mTORC1上游的負(fù)向調(diào)節(jié)子Tsc1，在非糖尿病小鼠足細(xì)胞中激活mTORC1，觀察到了腎小球基底膜增厚，足細(xì)胞丟失以及蛋白尿等一系列與DKD相似的癥狀。與之相反，足細(xì)胞特異性敲除mTORC1的重要結(jié)構(gòu)Raptor，在基因水平上減少mTORC1的表達(dá)則會減輕DKD的癥狀。這表明mTORC1通路激活對自噬的抑制在DKD的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要的作用。

2.AMPK通路 腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)通過細(xì)胞內(nèi)AMP/ATP的比例來感應(yīng)細(xì)胞內(nèi)能量變化。與mTORC1通路相反，在營養(yǎng)缺乏的情況下，ATP濃度下降，細(xì)胞內(nèi)AMPK通路則被激活，正向調(diào)節(jié)自噬。AMPK通過兩條互相獨立的途徑激活自噬：①抑制mTORC1的活動；②直接調(diào)控Ulk1的磷酸化[22]。

Ding等[23]觀察到在STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病模型小鼠的腎小球和腎小管中，AMPK的磷酸化及激動均受抑制，給予AMPK激動劑之后，AMPK的抑制被轉(zhuǎn)變，蛋白尿減少，腎功能下降得到改善。這表明AMPK通路的抑制阻止了自噬并促進(jìn)了DKD的發(fā)展。因此，AMPK的激活可能是在DN自噬活動的修復(fù)中的重要靶點。

3.SIRT1通路 沉默信息調(diào)節(jié)因子1(silenti information regulator 1,Sirt1)是一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)依賴的脫乙?；福橇硪粭l正向調(diào)節(jié)自噬的營養(yǎng)相關(guān)信號通路。然而，目前對于Sirt1介導(dǎo)的自噬誘導(dǎo)通路的了解并不多。細(xì)胞能量缺乏時，Sirt1通路在NAD/NADH比例增加時被激活。Sirt1一方面在饑餓誘導(dǎo)的自噬激活下直接脫去一些Atg蛋白的乙?；鵞24]。另一方面，Sirt1還能催化叉頭蛋白O3a(Forkhead box O3a,FOXO3a)的脫乙酰基反應(yīng)，F(xiàn)OXO3a介導(dǎo)了Bnip3/BCL2基因轉(zhuǎn)錄水平的上調(diào)，從而激活了Beclin-1依賴的自噬啟動[25]。

Hasegawa等[26]使用Sirt1基因過表達(dá)和Sirt1基因敲除的小鼠模型證明DKD中Sirt1的缺失與足細(xì)胞和近端小管細(xì)胞損傷的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。因此，與AMPK通路的作用相似，Sirt1通路在腎臟中發(fā)揮著保護(hù)性作用，在DKD中，Sirt1通路被抑制，自噬水平下調(diào)，從而導(dǎo)致了相關(guān)的腎臟損傷。這些發(fā)現(xiàn)表明Sirt1通路也是一個可能的DKD治療靶點。

除了以上營養(yǎng)相關(guān)的自噬經(jīng)典途徑之外，高糖環(huán)境中的AGEs、過氧化物應(yīng)激，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，低氧等因素引起的自噬受損也在DKD的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要的作用[27]。

五、以自噬為靶向的DKD治療新策略

各項研究已經(jīng)證明自噬活動的受損是DKD的發(fā)病機(jī)制。因此，以調(diào)節(jié)自噬活動為靶向的物質(zhì)，可能成為治療DKD的潛在新策略。前文已經(jīng)提及自噬的調(diào)控與細(xì)胞營養(yǎng)相關(guān)信號通路如mTORC1、AMPK以及Sirt1通路有關(guān)，那么能夠調(diào)控這些信號通路的藥物就可能成為治療DKD的新方法。

1.雷帕霉素 作為腎臟疾病的免疫抑制劑而被廣泛應(yīng)用的雷帕霉素是經(jīng)典的mTORC1抑制劑，目前已有許多研究致力于探索其作為自噬激動劑在DKD中的作用。Xiao等[28]的研究發(fā)現(xiàn)，給予STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠腹腔注射雷帕霉素，能夠減輕小鼠腎臟重量及體質(zhì)量，減少尿白蛋白排泄，改善足細(xì)胞損傷，同時足細(xì)胞LC3表達(dá)增加，自噬體數(shù)目增多。表明雷帕霉素能夠激活自噬，減輕糖尿病小鼠腎臟損傷，延緩DKD進(jìn)展。然而，過量的mTORC1抑制也能造成腎小球足細(xì)胞的功能失調(diào)[29]。因此，雷帕霉素以及其他mTORC1抑制劑治療是一把雙刃劍，其對于所有的糖尿病患者是否安全有效需要更多的實驗研究進(jìn)一步證明。

2.白藜蘆醇和二甲雙胍 AMPK和Sirt1通路都是自噬的正向調(diào)節(jié)通路，AMPK和Sirt1通路的激動劑如：白藜蘆醇、二甲雙胍、阿卡的新等已經(jīng)應(yīng)用于DKD自噬激活的研究。

白藜蘆醇是在多種植物如葡萄、漿果、花生等中發(fā)現(xiàn)的自然多酚類復(fù)合物，眾多研究已經(jīng)表明其在糖尿病心血管并發(fā)癥和腎臟疾病中發(fā)揮潛在的保護(hù)作用[30]。白藜蘆醇通過AMPK和Sirt1通路激活自噬，同時也可作為活性氧類代謝產(chǎn)物的清除劑發(fā)揮抗氧化作用。Ma L等[31]給予STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠模型長達(dá)四個月的白藜蘆醇之后，明顯降低了其血清肌酐、尿白蛋白及糖化血紅蛋白水平。同時Sirt1基因、自噬相關(guān)蛋白和基因的表達(dá)均明顯增加。與此相反，給予體外低氧環(huán)境下培養(yǎng)的Sirt1基因敲除的近端小管細(xì)胞白藜蘆醇并不能誘發(fā)其自噬活動。從而更加準(zhǔn)確地說明了白藜蘆醇通過調(diào)控自噬活動發(fā)揮腎臟保護(hù)作用。目前，白藜蘆醇已經(jīng)被應(yīng)用于成人減肥治療安全性的臨床試驗研究[32]。

二甲雙胍是一種雙胍類衍生物，是目前2型糖尿病患者的一線口服用藥。作為AMPK通路的激動劑，除了降低血糖作用之外，目前已有許多研究表明二甲雙胍通過激活A(yù)MPK通路，在糖尿病腎病和其他慢性腎臟病中發(fā)揮保護(hù)腎功能的治療作用[33]。Allouch 等[34]的研究表明二甲雙胍通過增加體外高白蛋白培養(yǎng)環(huán)境下小鼠腎臟近端小管細(xì)胞的AMPK磷酸化激活其自噬活動，減少近端小管細(xì)胞的凋亡和向間質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，發(fā)揮其抗蛋白尿毒性。因此，二甲雙胍可能作為潛在的自噬激動劑，發(fā)揮腎臟保護(hù)作用，延緩DKD進(jìn)展，然而其確切作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究證實。

3.飲食限制 自噬在營養(yǎng)缺乏的環(huán)境下能夠被激活以適應(yīng)長期的饑餓環(huán)境。因此，過去十幾年間，許多研究者已經(jīng)發(fā)現(xiàn)飲食攝入控制介導(dǎo)的自噬激活具有延長哺乳動物壽命、抗衰老的功能[35]。Kitada等[18]的研究表明給予Wistar肥胖大鼠飲食限制24周之后，實驗組大鼠白蛋白排泄率明顯減少、肌酐清除率和 Sirt1 表達(dá)明顯增加，同時近端小管細(xì)胞的自噬活動增加，腎臟損傷得到改善。這表明飲食限制可以調(diào)控Sirt1通路，增加自噬活性，減輕糖尿病大鼠腎臟炎癥反應(yīng)，延緩病變進(jìn)展。因此，基于飲食限制的激活哺乳動物細(xì)胞自噬的療法，可能成為延緩DKD進(jìn)展的新的治療方式。

然而，目前有關(guān)自噬保護(hù)性作用的研究都是基于動物實驗，仍缺少證據(jù)表明這些發(fā)現(xiàn)可以應(yīng)用在人類臨床實驗之中。而且所有干預(yù)自噬活動的生物制劑均缺乏特異性，涵蓋了除調(diào)節(jié)自噬之外的一系列其他生物功能。除此之外，自噬的過度激活也能誘發(fā)細(xì)胞凋亡[36]，所以在自噬的調(diào)控過程中還存在著一個腎臟保護(hù)作用和誘發(fā)凋亡之間的關(guān)鍵界限?？傊壳霸贒KD中仍缺少以自噬為靶向，安全有效的干預(yù)治療措施。因此我們需要發(fā)現(xiàn)一種特異的、腎臟選擇性的自噬調(diào)控劑。目前，有研究發(fā)現(xiàn)了一種Tat-Beclin融合蛋白能夠通過其他信號通路無副作用地選擇性誘導(dǎo)自噬，從而提供了一種新的治療策略[37]。

六、小結(jié)

總之，自噬在移除聚集的蛋白質(zhì)和受損細(xì)胞器中發(fā)揮著重要的作用，提高了細(xì)胞的生存和維持組織的穩(wěn)態(tài)。自噬功能的失調(diào)參與了DKD的發(fā)病機(jī)制，以自噬為靶點的激活和修復(fù)自噬活動具有腎臟保護(hù)作用。因此自噬可能成為治療DKD的潛在新策略。將來的研究需要進(jìn)一步揭示自噬在DKD腎小球和小管損傷中更加精確的功能調(diào)控作用，增強(qiáng)我們對于自噬在腎臟功能中的理解以指導(dǎo)DKD的治療。

[1] Tuttle KR, Bakris GL, Bilous RW, et al. Diabetic kidney disease: a report from an ADA Consensus Conference[J]. Diabetes Care, 2014, 37(10): 2864-2883.

[2] Turkmen K. Inflammation, oxidative stress, apoptosis, and autophagy in diabetes mellitus and diabetic kidney disease: the Four Horsemen of the Apocalypse[J]. Int Urol Nephrol, 2016. DOI: 10.1007/s11255-016-1488-4.

[3] Yokoyama H, Araki S, Honjo J, et al. Association between remission of macroalbuminuria and preservation of renal function in patients with type 2 diabetes with overt proteinuria[J]. Diabetes Care, 2013, 36(10): 3227-3233.

[4] Boya P, Reggiori F, Codogno P. Emerging regulation and functions of autophagy[J]. Nat Cell Biol, 2013, 15(7): 713-720.

[5] Ding Y, Choi ME. Autophagy in diabetic nephropathy[J]. J Endocrinol, 2015, 224(1): R15-30.

[6] Wang Z, Choi ME. Autophagy in kidney health and disease[J]. Antioxid Redox Signal, 2014, 20(3): 519-537.

[7] Lenoir O, Tharaux PL, Huber TB. Autophagy in kidney disease and aging: lessons from rodent models[J]. Kidney Int, 2016. DOI: 10.1016/j.kint.2016.04.014.

[8] Mizushima N, Komatsu M. Autophagy: renovation of cells and tissues[J]. Cell, 2011, 147(4): 728-741.

[9] Choi AM, Ryter SW, Levine B. Autophagy in human health and disease[J]. N Engl J Med, 2013, 368(19): 1845-1846.

[10]Ravikumar B, Sarkar S, Davies JE, et al. Regulation of mammalian autophagy in physiology and pathophysiology[J]. Physiol Rev, 2010, 90(4): 1383-1435.

[11]Komatsu M, Waguri S, Koike M, et al. Homeostatic levels of p62 control cytoplasmic inclusion body formation in autophagy-deficient mice[J]. Cell, 2007, 131(6): 1149-1163.

[12]Brinkkoetter PT, Ising C, Benzing T. The role of the podocyte in albumin filtration[J]. Nat Rev Nephrol, 2013, 9(6): 328-336.

[13]Fang L, Zhou Y, Cao H, et al. Autophagy attenuates diabetic glomerular damage through protection of hyperglycemia-induced podocyte injury[J]. PLoS One, 2013, 8(4): e60546.

[14]Tagawa A, Yasuda M, Kume S, et al. Impaired Podocyte Autophagy Exacerbates Proteinuria in Diabetic Nephropathy[J]. Diabetes, 2016, 65(3): 755-767.

[15]Abbate M, Zoja C, Remuzzi G. How does proteinuria cause progressive renal damage?[J]. J Am Soc Nephrol, 2006, 17(11): 2974-2984.

[16]Kaushal GP, Shah SV. Autophagy in acute kidney injury[J]. Kidney Int, 2016, 89(4): 779-791.

[17]Yamahara K, Kume S, Koya D, et al. Obesity-mediated autophagy insufficiency exacerbates proteinuria-induced tubulointerstitial lesions[J]. J Am Soc Nephrol, 2013, 24(11): 1769-1781.

[18]Kitada M, Takeda A, Nagai T, et al. Dietary restriction ameliorates diabetic nephropathy through anti-inflammatory effects and regulation of the autophagy via restoration of Sirt1 in diabetic Wistar fatty (fa/fa) rats: a model of type 2 diabetes[J]. Exp Diabetes Res, 2011: 908185. doi: 10.1155/2011/908185.

[19]Hosokawa N, Hara T, Kaizuka T, et al. Nutrient-dependent mTORC1 association with the ULK1-Atg13-FIP200 complex required for autophagy[J]. Mol Biol Cell, 2009, 20(7): 1981-1991.

[20]Kume S, Koya D, Uzu T, et al. Role of nutrient-sensing signals in the pathogenesis of diabetic nephropathy[J]. Biomed Res Int, 2014: 315494. doi: 10.1155/2014/315494.

[21]Inoki K, Mori H, Wang J, et al. mTORC1 activation in podocytes is a critical step in the development of diabetic nephropathy in mice[J]. J Clin Invest, 2011, 121(6): 2181-2196.

[22]Kume S, Koya D. Autophagy: A Novel Therapeutic Target for Diabetic Nephropathy[J]. Diabetes Metab J, 2015, 39(6): 451-460.

[23]Ding DF, You N, Wu XM, et al. Resveratrol attenuates renal hypertrophy in early-stage diabetes by activating AMPK[J]. Am J Nephrol, 2010, 31(4): 363-374.

[24]Lee IH, Cao L, Mostoslavsky R, et al. A role for the NAD-dependent deacetylase Sirt1 in the regulation of autophagy[J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2008, 105(9): 3374-3379.

[25]Kume S, Uzu T, Horiike K, et al. Calorie restriction enhances cell adaptation to hypoxia through Sirt1-dependent mitochondrial autophagy in mouse aged kidney[J]. J Clin Invest, 2010, 120(4): 1043-1055.

[26]Hasegawa K, Wakino S, Simic P, et al. Renal tubular Sirt1 attenuates diabetic albuminuria by epigenetically suppressing Claudin-1 overexpression in podocytes[J]. Nat Med, 2013, 19(11): 1496-1504.

[27]Liu N, Shi Y, Zhuang S. Autophagy in Chronic Kidney Diseases[J]. Kidney Dis (Basel), 2016, 2(1): 37-45.

[28]Xiao T, Guan X, Nie L, et al. Rapamycin promotes podocyte autophagy and ameliorates renal injury in diabetic mice[J]. Mol Cell Biochem, 2014, 394(1-2): 145-154.

[29]Pallet N, Legendre C. Adverse events associated with mTOR inhibitors[J]. Expert Opin Drug Saf, 2013, 12(2): 177-186.

[30]Albertoni G, Schor N. Resveratrol plays important role in protective mechanisms in renal disease-mini-review[J]. J Bras Nefrol, 2015, 37(1): 106-114.

[31]Ma L, Fu R, Duan Z, et al. Sirt1 is essential for resveratrol enhancement of hypoxia-induced autophagy in the type 2 diabetic nephropathy rat[J]. Pathol Res Pract, 2016, 212(4): 310-318.

[32]Anton SD, Embry C, Marsiske M, et al. Safety and metabolic outcomes of resveratrol supplementation in older adults: results of a twelve-week, placebo-controlled pilot study[J]. Exp Gerontol, 2014, 57: 181-187.

[33]Ravindran S, Kuruvilla V, Wilbur K, et al. Nephroprotective Effects of Metformin in Diabetic Nephropathy[J]. J Cell Physiol, 2017, 232(4): 731-742.

[34]Allouch S, Munusamy S. Metformin Attenuates Albumin-induced Alterations in Renal Tubular Cells In Vitro[J]. J Cell Physiol, 2017. doi: 10.1002/jcp.25838.

[35]Kapahi P, Kaeberlein M, Hansen M. Dietary restriction and lifespan: Lessons from invertebrate models[J]. Ageing Res Rev, 2016. doi: 10.1016/j.arr.2016.12.005.

[36]De Rechter S, Decuypere JP, Ivanova E, et al. Autophagy in renal diseases[J]. Pediatr Nephrol, 2016, 31(5): 737-752.

[37]Shoji-Kawata S, Sumpter R, Leveno M, et al. Identification of a candidate therapeutic autophagy-inducing peptide[J]. Nature, 2013, 494(7436): 201-206.

10.3969/j.issn.1671-2390.2017.04.012

國家自然科學(xué)基金(No.81270813)

230022 合肥，安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院腎內(nèi)科

吳永貴，E-mail:wuyonggui@medmail.com.cn

2016-10-12

2017-01-05)