川芎嗪和不同劑量冰片配伍對全腦缺血/再灌注大鼠腦區(qū)特異性保護(hù)作用研究

喻 斌，蔣寶平，阮 鳴

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省中藥藥效與安全性評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/部省共建中藥藥理實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210023；2.南京曉莊學(xué)院食品科學(xué)學(xué)院，江蘇 南京 211117)

◇研究簡報(bào)◇

川芎嗪和不同劑量冰片配伍對全腦缺血/再灌注大鼠腦區(qū)特異性保護(hù)作用研究

喻 斌1，蔣寶平1，阮 鳴2

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省中藥藥效與安全性評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/部省共建中藥藥理實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210023；2.南京曉莊學(xué)院食品科學(xué)學(xué)院，江蘇 南京 211117)

腦卒中是危害人類健康的重大疾病[1]。磷酸川芎嗪(tetramethylpyrazine phosphate，TMPP)的抗腦缺血作用證實(shí)與抗自由基、減少炎癥反應(yīng)有關(guān)[2]。我們在前期研究發(fā)現(xiàn)，冰片對不同腦區(qū)具有不同的腦靶效應(yīng)，即存在腦區(qū)特異性，這種特異性和冰片不同劑量密切相關(guān)[3]。已有研究證實(shí)冰片和川芎聯(lián)用在腦缺血的療效上優(yōu)于川芎單用[4]。但目前還未見冰片-TMPP配伍在不同腦區(qū)抗腦缺血作用的報(bào)道，也未見冰片劑量對這一作用的干預(yù)研究。

1 材料與方法

1.1 藥品和試劑 冰片(江蘇省中醫(yī)院)；TMPP(利民制藥廠)；尼莫地平(拜耳醫(yī)藥公司)，總蛋白、SOD和MDA試劑盒(南京建成生物工程研究所)；IL-1β、IL-6和TNF-α試劑盒(北京華英生物技術(shù)研究所)。

1.2 儀器 酶標(biāo)儀(BIOTEC，Synergy)，微循環(huán)記錄儀(美國BIOPAC，MP100公司)，組織分散器(寧波新芝生物科技公司，XHF-D)。

1.3 分組、造模、給藥和檢測方法 麻醉大鼠[♂，250～300 g，浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號SCXK(浙)2014-0001]，分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈。頸部正中切口，暴露第一頸椎橫突翼孔，電凝雙側(cè)椎動(dòng)脈。24 h后夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈20 min，然后再灌注。將造模成功的大鼠分為10組，每組6只：模型組、T組(給予13.3 mg·kg-1的TMPP)和TB Ⅰ～Ⅷ組(13.3 mg·kg-1的TMPP分別配伍0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28 g·kg-1冰片)，另制備假手術(shù)組6只。模型組和假手術(shù)組給予NS。連續(xù)灌胃給藥7 d后進(jìn)行皮層、海馬、下丘腦和紋狀體的微循環(huán)、IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD、MDA含量的檢測。

#P<0.05,##P<0.01vssham;*P<0.05,**P<0.01vsmodel group, the below were same

Tab 2 Protective effects of different doses of borneol combining with TMPP on hippocampus of global cerebral ischemia/reperfusion rats(±s,n=6)

Tab 3 Protective effects of different doses of borneol combining with TMPP on hypothalamus of global cerebral ischemia/reperfusion rats(±s,n=6)

Tab 4 Protective effects of different doses of borneol combining with TMPP on striatum of global cerebral ischemia/reperfusion rats(±s,n=6)

2 結(jié)果

TMPP單用可明顯增加皮層微循環(huán)、皮層和海馬SOD，降低皮層IL-1β、IL-6、TNF-α和海馬IL-1β，其他指標(biāo)未見明顯改善。合用冰片后，則能產(chǎn)生新的明顯改善，包括海馬區(qū)微循環(huán)、IL-6、TNF-α含量；下丘腦區(qū)IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD和MDA含量；紋狀體區(qū)微循環(huán)、IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD和MDA含量。提示TMPP與冰片合用效果優(yōu)于單用。結(jié)果見Tab 1～4。

3 討論

冰片的抗腦缺血作用已被國內(nèi)外學(xué)者證實(shí)[5]。腦病治療的區(qū)域特異性也已受廣泛關(guān)注。本次研究發(fā)現(xiàn)川芎和冰片配伍治療后，皮層、海馬、下丘腦和紋狀體組織的微循環(huán)、IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD和MDA的改善均優(yōu)于TMPP單用。此外，對各腦區(qū)、各指標(biāo)的冰片最佳劑量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其最佳劑量排序是0.08 g·kg-1>0.16 g·kg-1>0.32 g·kg-1>0.04 g·kg-1。以上分析提示，TMPP和冰片配伍可以對缺血腦組織產(chǎn)生腦區(qū)特異性改善，而且這一改善作用與冰片劑量密切相關(guān)，劑量過大或過小均不利于腦缺血的治療。

(致謝：本實(shí)驗(yàn)在南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省中藥藥效與安全性評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/部省共建中藥藥理實(shí)驗(yàn)室完成。)

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Protective effects of tetramethylpyrazine phosphate combining with different doses of borneol on region-specificity in global cerebral ischemia/reperfusion rats

YU Bin1, JIANG Bao-ping1, RUAN Ming2

(1.JiangsuKeyLaboratoryforPharmacologyandSafetyEvaluationofChineseMateriaMedica,NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210023,China; 2.SchoolofFoodTechnology,NanjingXiaozhuangUniversity,Nanjing211117,China)

TMPP; borneol; cerebral region-specificity; cerebral ischemia-reperfusion; microcirculation; dose

時(shí)間：2017-3-24 12:48

http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20170324.1248.054.html

2016-10-25,

2016-12-02

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81573713，81001651);江蘇省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No BK20151564，BK20150088)

喻 斌(1978-)，男，博士，副教授，研究方向：中藥藥理學(xué)，E-mail: nzyyubin@163.com; 阮 鳴(1979-)，女，博士，講師，研究方向：中藥物質(zhì)基礎(chǔ)，通訊作者，E-mail: 1047123374@qq.com

10.3969/j.issn.1001-1978.2017.04.027

A

1001-1978(2017)04-0589-03

R-332；R282.71；R289.1；R322.81；R743.310.22； R743.310.531關(guān)鍵詞：川芎嗪；冰片；腦區(qū)特異性；腦缺血/再灌注;微循環(huán);劑量