生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色反應(yīng)機(jī)理探究

陳科云

摘要：論文旨在做好生物組織有機(jī)化合物的顯色反應(yīng)原理，通過(guò)分析生物組織中糖類(lèi)、脂類(lèi)和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定顯色反應(yīng)的機(jī)理，探討了可溶性還原糖鑒定的反應(yīng)原理，明確了蛋白質(zhì)鑒定反應(yīng)原理，在雙縮脲試劑鑒定過(guò)程，實(shí)現(xiàn)肽鍵試劑的有效鑒定。在生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色反應(yīng)過(guò)程，還存在負(fù)反應(yīng)，尤其是蛋白質(zhì)鑒定過(guò)程，發(fā)生了蛋白質(zhì)變性現(xiàn)象。在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程，結(jié)合還原糖以及蛋白質(zhì)的有效鑒定，現(xiàn)配現(xiàn)用斐林試劑，做好生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)的有效檢測(cè)，也要合理掌握滴加夜的滴加量和滴加濃度，避免出現(xiàn)過(guò)量和過(guò)快的滴加過(guò)程，同時(shí)也要避免出現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。

關(guān)鍵詞：生物組織；糖類(lèi)；脂肪；蛋白質(zhì)；顯色反應(yīng)；檢測(cè)

G633.91

生物課程的教材改革越來(lái)越注重內(nèi)容的創(chuàng)新，同時(shí)也要做好關(guān)鍵知識(shí)點(diǎn)的有效教學(xué)，對(duì)于生物組織中有機(jī)化合物的反應(yīng)原理而言，更要分析三大有機(jī)化合物的顯色反應(yīng)過(guò)程，盡可能的確定糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)中的不同顯色反應(yīng)機(jī)理，總結(jié)注意事項(xiàng)，綜合提升生物知識(shí)儲(chǔ)備能力。對(duì)于生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色反應(yīng)機(jī)理究竟如何始終是生物老師教學(xué)高度重視的一個(gè)問(wèn)題+[1]。因此論文對(duì)生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)阿金側(cè)鑒定的顯色反應(yīng)機(jī)理進(jìn)行研究有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

一、生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色反應(yīng)

糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)作為生物組織中的三大有機(jī)化合物，糖類(lèi)中的淀粉一旦遇到碘，將會(huì)呈現(xiàn)出藍(lán)色，就可溶性還原糖而言，一旦和斐林試劑發(fā)生反應(yīng)，有磚紅色沉淀，同時(shí)脂肪和蘇丹III反應(yīng)，出現(xiàn)橘黃色的反應(yīng)，和蘇丹IV反應(yīng)，出現(xiàn)紅色。蛋白質(zhì)一旦和雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)，將會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)，這種顯色反應(yīng)作用下，生物質(zhì)中糖類(lèi)可以進(jìn)行有效的判定，同時(shí)也可以鑒定蛋白質(zhì)和脂肪。

關(guān)于顯色反應(yīng)原理的探究，始終是生物界高度重視的一個(gè)焦點(diǎn)，在有機(jī)化合物的處理過(guò)程，結(jié)合多種有機(jī)化合物的反應(yīng)原理，借助于多種試劑實(shí)現(xiàn)有效的顯色反應(yīng)處理，實(shí)現(xiàn)化合物的鑒定。關(guān)于染色劑的吸附顯色過(guò)程，主要是做好還原性糖和蛋白質(zhì)的有效鑒定過(guò)程，分析和試劑發(fā)生的作用，并結(jié)合顯色現(xiàn)象，進(jìn)而做好鑒定[2]。

基于可溶性還原糖鑒定的過(guò)程，確定類(lèi)似反應(yīng)原理，確定可溶性還原糖的結(jié)構(gòu)，主要是可溶性還原糖存在醛基糖結(jié)構(gòu)，同時(shí)也存在堿性果糖溶液和麥芽糖，葡萄糖和果糖作為同分異構(gòu)體，而葡萄糖中一般有醛基，但是果糖具有酮基并沒(méi)有醛基，溶液稀釋的過(guò)程，出現(xiàn)了互變異構(gòu)。

稀堿溶液用果糖稀釋的過(guò)程，出現(xiàn)了還原性的反應(yīng)，同時(shí)還原性糖常伴有醛基反應(yīng)，在和斐林試劑反應(yīng)的時(shí)候，氫氧化銅和可溶性還原糖出現(xiàn)了氧化還原反應(yīng)，而藍(lán)色氫氧化銅也伴有磚紅色氧化亞銅，這一反應(yīng)的進(jìn)行，還原糖存在。

脂肪鑒定的過(guò)程，蘇丹III一旦融入脂肪，溶解度比較大，脂肪生物組織得到有效的處理，同時(shí)對(duì)于酒精中的蘇丹III而言，和脂肪發(fā)生反應(yīng)，脂肪呈現(xiàn)出橘黃色。關(guān)于蛋白質(zhì)的鑒定過(guò)程，主要是確定雙縮脲的試劑成分，確定氫氧化鈉溶液以及質(zhì)量濃度，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)硫酸銅溶液的分析，在堿性溶液作用下，往往和銅離子發(fā)生反應(yīng)，并伴有紫紅色絡(luò)合物沉淀。

關(guān)于蛋白質(zhì)鑒定的一種反應(yīng)原理而言，主要是結(jié)合蛋白質(zhì)鑒定的試劑，并借助于雙縮脲實(shí)際確定蛋白質(zhì)顯色反應(yīng)，雙縮脲分子一旦發(fā)生縮合反應(yīng)，將會(huì)失去一分子氨，分子中和蛋白質(zhì)一樣存在肽鍵，同時(shí)堿性溶液作用下，出現(xiàn)了大量的化學(xué)反應(yīng)，并出現(xiàn)了紫色銅離子羅何物，基于肽鍵和物質(zhì)反應(yīng)過(guò)程，常伴有紫色銅離子絡(luò)合物，這一反應(yīng)過(guò)程中需要分析生物組織蛋白質(zhì)的存在。

二、 生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定可能存在的負(fù)反應(yīng)

基于生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定中的問(wèn)題分析，就要做好蘋(píng)果組織樣液的加熱過(guò)程，一旦加入斐林試劑之后，將會(huì)出現(xiàn)受熱現(xiàn)象，黑色沉淀逐步產(chǎn)生，斐林試劑也伴有黑色沉淀，主要是氫氧化銅逐步的分解了氧化銅，在磚紅色沉淀之后，也出現(xiàn)了變黑的現(xiàn)象，也即是氧化了氧化亞銅，進(jìn)而出現(xiàn)了氧化銅[3]。鑒定蛋白質(zhì)的時(shí)候，需要做好蛋清液的稀釋工作，逐步的滴加硫酸銅，乳白色沉淀逐步產(chǎn)生，在重金屬鹽出現(xiàn)變性之后，變小了實(shí)際的溶解度，同時(shí)實(shí)驗(yàn)也伴有蛋白質(zhì)的變性，這種蛋白質(zhì)變性不僅僅和溫度有關(guān)，同時(shí)也和堿性強(qiáng)度有著直接的關(guān)聯(lián)，一旦過(guò)強(qiáng)受熱和過(guò)強(qiáng)堿性，都會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性[4]。鑒定蛋白質(zhì)的時(shí)候，需要控制硫酸銅的滴加速度，一旦有過(guò)量和過(guò)快的滴加速度，藍(lán)色沉淀產(chǎn)生，硫酸銅和氫氧化鈉出現(xiàn)了藍(lán)色氫氧化銅沉淀。

三、生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的相關(guān)注意事項(xiàng)

還原糖和蛋白質(zhì)鑒定階段，就要避免出現(xiàn)負(fù)反應(yīng)，保證有著規(guī)范化的操作。關(guān)于斐林試劑的使用，需要本著現(xiàn)配現(xiàn)用的基本原則，在斐林試劑以及蘋(píng)果組織樣液混合之后，實(shí)現(xiàn)充分的加熱處理。

蛋清液的稀釋之后，可以使用蒸餾水，避免蛋清液的加熱，同時(shí)鑒定的過(guò)程，避免滴加硫酸銅，需要充分均勻氫氧化鈉溶液，在硫酸銅滴加之后，避免有過(guò)快的滴加速度，進(jìn)行邊滴加邊振蕩的過(guò)程。而硫酸銅溶液一旦為0.05g/mL時(shí)，就要滴加2滴左右，硫酸銅溶液的濃度為0.05g/mL事，就要滴加4滴左右。關(guān)于氫氧化鈉濃度而言，避免濃度的過(guò)大，確定氫氧化鈉的低濃度添加。

總而言之，生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定時(shí)，就要分析三大有機(jī)物的反應(yīng)過(guò)程，做好糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)鑒定的顯色原理分析，合理使用滴加夜，并結(jié)合不同化合物的基本反應(yīng)要求，避免出現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。鑒定蛋白質(zhì)的時(shí)候，需要做好蛋清液的稀釋工作，逐步的滴加硫酸銅，乳白色沉淀逐步產(chǎn)生。蛋白質(zhì)的鑒定過(guò)程，主要是確定雙縮脲的試劑成分，確定氫氧化鈉溶液以及質(zhì)量濃度，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)硫酸銅溶液的分析。對(duì)于斐林試劑的使用，需要本著現(xiàn)配現(xiàn)用的基本原則，在斐林試劑以及蘋(píng)果組織樣液混合之后，實(shí)現(xiàn)充分的加熱處理。

參考文獻(xiàn)：

[1]鄭琦琦，吳堅(jiān).基于NO2-顯色反應(yīng)的抗?jié)裥試婌F霧滴密度和大小的檢測(cè)體系[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2015，04（3）：107-112.

[2]潘斌.高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的顯色反應(yīng)釋疑[J].生物學(xué)教學(xué)，2015，40（11）：42-43.

[3]王子武，孫海榮.生物組織中幾種有機(jī)化合物的定量檢測(cè)[J].生物學(xué)教學(xué)，2016，41（5）：65-65，66.

[4]孫鵬飛，高獻(xiàn)禮，閆爽等.醬油二次沉淀蛋白質(zhì)的分離、鑒定及氨基酸分析[J].食品工業(yè)科技，2014，35（5）：87-90.