維生素D受體和稽留流產(chǎn)的免疫相關(guān)性

蘇貞文+姜艷華+黃紅麗+楊恒

【摘要】 目的 探討維生素D受體和稽留流產(chǎn)的免疫相關(guān)性。方法 選取65例因稽留流產(chǎn)住院的孕婦作為觀察組， 選取65例非正常分娩流產(chǎn)的孕婦作為對(duì)照組， 比較兩組患者血清維生素D受體水平、細(xì)胞因子水平及細(xì)胞免疫等之間的差異， 分析維生素D受體的免疫相關(guān)性。結(jié)果 觀察組患者維生素D受體含量、細(xì)胞免疫CD8+水平明顯低于對(duì)照組， 細(xì)胞免疫CD4+、CD4+/CD8+水平均高于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組干擾素-γ（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）水平分別為（52.22±2.85）ng/L、（62.34±3.96）pg/ml、（65.34±4.86）ng/L、（22.52± 1.67）ng/L， 對(duì)照組分別為（29.23±1.93）ng/L、（33.24±2.73）pg/ml、（115.42±3.63）ng/L、（39.34±1.43）ng/L；觀察組細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α水平高于對(duì)照組， IL-4、IL-10水平低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。維生素D受體水平與細(xì)胞免疫（CD4+、CD4+/CD8+）、細(xì)胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）， 與細(xì)胞免疫（CD8+）、細(xì)胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論 維生素D受體缺乏容易出現(xiàn)稽留流產(chǎn)， Th1/Th2細(xì)胞向Th1偏移， 且維生素D受體含量與Th1、Th2細(xì)胞因子存在良好的相關(guān)性。

【關(guān)鍵詞】 維生素D受體；稽留流產(chǎn)；細(xì)胞因子；胚胎

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.04.017

【Abstract】 Objective To explore the immuno-correlation of vitamin D receptor and missed abortion. Methods A total of 65 hospitalization maternal women due to missed abortion were selected as observation group， and 65 maternal women with abnormal birth abortion were selected as control group. Comparison were made on serum vitamin D receptor level， cytokine levels and immune cells difference， so as to analyze the immuno-correlation of vitamin D receptor. Results The observation group had obviously lower vitamin D receptor volume， cellular immune CD8+ level than those of the control group， higher cellular immune CD4+， CD4+/CD8+ level than those of the control group， and their difference had statistical significance （P<0.05）. The observation group had interferon-γ （IFN-γ）， tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-4 （IL-4）， and interleukin-10 （IL-10） levels respectively as （52.22±2.85） ng/L， （62.34±3.96） pg/ml， （65.34±4.86） ng/L and （22.52±1.67） ng/L， which were respectively （29.23±1.93） ng/L， （33.24±2.73） pg/ml， （115.42±3.63） ng/L and （39.34±1.43） ng/L in the control group. The observation group had higher cytokines IFN-γ and TNF-α level than the control group， and lower IL-4 and IL-10 level than the control group. Their differences had statistical significance （P<0.05）. Vitamin D3 receptor level was negatively related to cellular immune （CD4+ and CD4+/CD8+）， cytokines Th1 （IFN-γ and TNF-α） level （P<0.05）， and positively related to cellular immune （CD8+）， cytokines Th2 （IL-4 and IL-10）. Conclusion Lacking of vitamin D receptor is easily prone to missed abortion， shift of Th1/Th2 cells to Th1， and the content of vitamin D receptor and Th1， Th2 cytokines have a good correlation.

【Key words】 Vitamin D receptor； Missed abortion； Cytokines； Embryo

滯留于宮腔內(nèi)的死亡胚胎或胎兒沒(méi)有及時(shí)自然排出者被稱(chēng)為稽留流產(chǎn)。稽留流產(chǎn)是孕婦一種特殊流產(chǎn)類(lèi)型， 是孕期常見(jiàn)疾病， 已經(jīng)成為治療不孕不育的重要問(wèn)題[1]。不孕不育專(zhuān)家學(xué)者研究認(rèn)為， 除外在因素和自身染色體異常等因素外， 免疫因素也與產(chǎn)生稽留流產(chǎn)有很大的關(guān)系[2]。Th1、Th2 細(xì)胞亞型相互制約， 決定著機(jī)體細(xì)胞免疫與體液免疫間的平衡， 這種平衡一旦打破， 將發(fā)生疾病[3]。本研究是通過(guò)檢測(cè)不明原因稽留流產(chǎn)患者及正常早孕孕婦的蛻膜組織中維生素D受體、T淋巴細(xì)胞亞群及IFN-γ、IL-4， 探討維生素D受體與不明原因稽留流產(chǎn)免疫學(xué)相關(guān)性。為防治稽留流產(chǎn)的發(fā)生提供一條新思路。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2015年2月～2016年1月在本院因稽留流產(chǎn)住院的65例孕婦作為觀察組， 選取同期65例非正常分娩流產(chǎn)的孕婦作為對(duì)照組。觀察組孕婦年齡23～35歲， 平均年齡（25.34±3.54）歲， 孕次1～3次， 平均孕次（2.57±0.26）次；所有孕婦均檢查確診為稽留流產(chǎn)， 納入標(biāo)準(zhǔn)[4]：①家族成員中無(wú)遺傳病史， 染色體均正常；②檢查結(jié)果排除孕婦有生殖器畸形和其他病變；③有停經(jīng)史， 妊娠初期懷孕征象逐漸消退；④內(nèi)分泌檢查正常；⑤子宮停止增長(zhǎng)， 宮頸口閉合。對(duì)照組孕婦年齡24～37歲， 平均年齡（24.25±5.23）歲， 孕次2～4次， 平均孕次（3.12±1.43）次；所有孕婦為10～12周活胎要求非正常分娩人工流產(chǎn)， 納入標(biāo)準(zhǔn)：既往無(wú)遺傳、無(wú)死胎、無(wú)內(nèi)分泌異常癥狀、自身免疫性強(qiáng)， 胎兒有心管搏動(dòng)、超聲檢查發(fā)育正常。兩組孕婦年齡、孕次等一般資料比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 禁食12 h后采集15 ml靜脈血， 分別完成血清維生素D受體、細(xì)胞免疫水平和Th1/Th2 細(xì)胞因子含量等檢查， 在離心12 min的3500 r/min速度下， 使用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀， 德國(guó)原裝進(jìn)口試劑為本次實(shí)驗(yàn)主要使用試劑， 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作， 采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）檢測(cè)維生素D受體水平和測(cè)定Th1（IFN-γ、TNF-α）， Th2 （IL-4、IL-10）水平。采用流式細(xì)胞法測(cè)定細(xì)胞免疫指標(biāo)CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等水平。

1. 3 觀察指標(biāo) 觀察兩組孕婦維生素D受體含量、細(xì)胞免疫CD8+、CD4+、CD4+/CD8+水平及細(xì)胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平和細(xì)胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s） 表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)?；袅鳟a(chǎn)與血清維生素D受體的免疫相關(guān)性采用直線相關(guān)分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組患者血清維生素D受體及細(xì)胞免疫水平比較 觀察組患者維生素D受體含量、細(xì)胞免疫CD8+水平明顯低于對(duì)照組， 細(xì)胞免疫CD4+、CD4+/CD8+水平均高于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2. 2 兩組患者細(xì)胞因子Th1/Th2含量比較 觀察組IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10水平分別為（52.22±2.85）ng/L、（62.34±3.96）pg/ml、（65.34±4.86）ng/L、（22.52±1.67）ng/L， 對(duì)照組分別為（29.23±1.93）ng/L、（33.24±2.73）pg/ml、（115.42± 3.63）ng/L、（39.34±1.43）ng/L；觀察組細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α水平高于對(duì)照組， IL-4、IL-10水平低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2. 3 稽留流產(chǎn)與血清維生素D受體的免疫相關(guān)性 經(jīng)單因素回歸分析， 維生素D受體水平與細(xì)胞免疫（CD4+、CD4+/CD8+）、細(xì)胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）， 與細(xì)胞免疫（CD8+）、細(xì)胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平呈正相關(guān)（P<0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

滯留于宮腔內(nèi)的死亡胚胎或胎兒沒(méi)有及時(shí)自然排出者被稱(chēng)為稽留流產(chǎn)， 是孕婦一種特殊流產(chǎn)類(lèi)型， 是孕婦孕期常見(jiàn)疾病， 已經(jīng)成為治療不孕不育的典型問(wèn)題[5-7]。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)， 受孕過(guò)程中， 母體內(nèi)胚胎就像半異體移植物這是有父方異性抗體產(chǎn)生的， 免疫應(yīng)答功能識(shí)別胚胎并產(chǎn)生保護(hù)性， 直至胎兒分娩[8]。維持妊娠必須保持體液免疫和體內(nèi)細(xì)胞免疫功能的平衡[9]。平衡一旦破壞， 細(xì)胞免疫功能將失去作用， 會(huì)導(dǎo)致妊娠失敗， 造成流產(chǎn)[10]。研究表明， CD4+和CD8+分別是輔助性和抑制性T細(xì)胞， 能夠一個(gè)是增強(qiáng)細(xì)胞免疫反應(yīng)， 一個(gè)是抑制細(xì)胞免疫反應(yīng)[11]。本次研究， 主要是通過(guò)比較兩組患者的T細(xì)胞含量結(jié)果， 觀察組CD4+、CD4+/CD8+水平高于對(duì)照組， CD8+水平低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明稽留流產(chǎn)孕婦存在細(xì)胞免疫功能亢進(jìn)?；袅鳟a(chǎn)的發(fā)生同時(shí)也與CD4+輔助性T細(xì)胞有關(guān)， Th1和Th2亞群細(xì)胞包含于CD4+ 輔助性T細(xì)胞之內(nèi)， 細(xì)胞因子Th1又分為IFN-γ和TNF-α等細(xì)胞， 細(xì)胞因子Th2又分為IL-4和IL-10等細(xì)胞[12-14]。當(dāng)免疫功能出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)， 細(xì)胞方向偏移至Th1， 其分泌具有大量毒副作用， 阻礙早期引起稽留流產(chǎn)[15]。本研究結(jié)果顯示， 觀察組細(xì)胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平高于對(duì)照組， 細(xì)胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這說(shuō)明稽留流產(chǎn)孕婦體內(nèi)的Th1細(xì)胞功能增加， 進(jìn)而引發(fā)介導(dǎo)疾病的發(fā)生。觀察組維生素D受體含量低于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 說(shuō)明孕婦維生素D受體的缺乏會(huì)引發(fā)稽留流產(chǎn)。本文以維生素D受體為自變量進(jìn)行了單因素回歸分析， 結(jié)果顯示， 維生素D受體水平與細(xì)胞免疫（CD4+、CD4+/CD8+）、細(xì)胞因子Th1（IFN-γ、TNF-α）水平呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）， 與細(xì)胞免疫（CD8+）、細(xì)胞因子Th2（IL-4、IL-10）水平呈正相關(guān)（P<0.05）。

綜上所述， 維生素D受體缺乏容易稽留流產(chǎn)， Th1/Th2細(xì)胞向Th1偏移， 且維生素D受體含量與Th1、Th2細(xì)胞因子存在良好的相關(guān)性。

參考文獻(xiàn)

[1] 蘇貞文， 姚吉龍， 姜艷華. 維生素D3及其受體與稽留流產(chǎn)的免疫學(xué)相關(guān)性研究. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)， 2015， 12（32）：79-82.

[2] 蘇貞文， 姚吉龍， 姜艷華. 維生素D與稽留流產(chǎn)的免疫相關(guān)性研究. 中國(guó)臨床研究， 2015， 28（3）：280-282.

[3] 劉頌平， 溫堅(jiān). 1， 25-（OH）2維生素D3對(duì)稽留流產(chǎn)患者蛻膜產(chǎn)生的細(xì)胞因子的影響. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)， 2012， 9（29）：82-84.

[4] 李慶. 維生素D3對(duì)稽留流產(chǎn)患者血清CD4、CD8、IFN-γ和IL-4的影響. 西北藥學(xué)雜志， 2015， 12（6）：734-736.

[5] 程萍. 稽留流產(chǎn)的預(yù)防與營(yíng)養(yǎng)的關(guān)系. 中國(guó)社區(qū)醫(yī)師：醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)， 2013， 15（5）：154-155.

[6] 朱曉英. 淺談稽留流產(chǎn)的治療及稽留流產(chǎn)相關(guān)因素. 中外健康文摘， 2011， 08（7）：124-135.

[7] 杜晶， 張兆奉， 徐建華. 遺傳及相關(guān)因素與稽留流產(chǎn)關(guān)系的研究進(jìn)展. 生殖與避孕， 2013， 33（8）：552-556.

[8] 郭麗君， 陳叔平， 趙玉捷， 等. 抗生殖免疫抗體與稽留流產(chǎn)的相關(guān)性分析. 生殖醫(yī)學(xué)雜志， 2008， 17（3）：221-222.

[9] 王容， 凡偉. 稽留流產(chǎn)臨床相關(guān)因素的研究進(jìn)展. 中國(guó)婦幼保健， 2013， 28（8）：1366-1368.

[10] 王萍， 李芳， 甘露. 稽留流產(chǎn)相關(guān)因素分析. 中國(guó)婦幼健康研究， 2010， 21（5）：631-633.

[11] 陳冬鑾. 稽留流產(chǎn)相關(guān)因素分析. 吉林醫(yī)學(xué)， 2014， 35（11）： 2355-2356.

[12] 陸永清. 聯(lián)合檢測(cè)相關(guān)抗體在稽留流產(chǎn)診斷中的價(jià)值. 中國(guó)婦幼保健， 2011， 26（35）：5559-5561.

[13] 趙紅艷， 羅頌平. 反復(fù)自然流產(chǎn)與抗生殖免疫抗體的相關(guān)研究評(píng)析. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊， 2005， 23（2）：314-315.

[14] 李敏， 胡明英. 稽留流產(chǎn)與微量元素的相關(guān)性研究. 濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2014（6）：467-468.

[15] 林春曉， 程燕恒， 繆士霞. 稽留流產(chǎn)與微量元素鋅關(guān)系的探索研究. 廣東微量元素科學(xué)， 2013， 20（2）：16-18.