真核翻譯起始因子3h和PTEN在胃腺癌組織中的表達及其臨床意義

劉愛東 劉 揚 馬 征

(華北理工大學附屬醫(yī)院病理科,河北 唐山 063000)

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真核翻譯起始因子3h和PTEN在胃腺癌組織中的表達及其臨床意義

劉愛東 劉 揚1馬 征1

(華北理工大學附屬醫(yī)院病理科,河北 唐山 063000)

目的 檢測胃腺癌組織中真核翻譯起始因子(EIF)3h和PTEN的表達及其臨床意義。方法 選擇95例胃腺癌作為觀察組，70例正常胃黏膜組織作為對照組，采用免疫組化法檢測兩組中EIF3h和PTEN的表達。結果 觀察組中EIF3h表達的陽性率明顯高于對照組，觀察組中PTEN表達的陽性率明顯低于對照組，觀察組中EIF3h和PTEN表達的陽性率與腫瘤的浸潤深度、淋巴結轉移、脈管浸潤、癌結節(jié)和Ki67增殖指數(shù)均密切相關，且EIF3h和PTEN的表達負相關，生存分析顯示EIF3h和PTEN的表達與預后相關。結論 胃腺癌組織中EIF3h高表達、PTEN低表達時，對腫瘤的進展有促進作用，兩者具有協(xié)同負向作用，術后聯(lián)合檢測EIF3h和PTEN的表達對判斷胃腺癌的預后有一定價值。

胃腺癌；真核翻譯起始因子3h；PTEN

近年研究顯示腫瘤在發(fā)生發(fā)展過程中出現(xiàn)明顯的基因和蛋白的異常表達〔1〕。真核翻譯起始因子(EIF)3h是一個含有10～13不同亞基的大翻譯起始復合物，可以使Met復合物穩(wěn)定地結合到40S核糖體亞基上，引起細胞的異型增生，同時能誘導腫瘤進展〔2〕。PTEN是較為經(jīng)典的抑癌基因，具有雙特異性磷酸酶的活性，可以廣泛作用于細胞信號通路中的信號分子，抑制腫瘤的發(fā)展〔3〕。本文探討胃腺癌組織中EIF3h和PTEN的表達及臨床意義。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2006年1～12月行胃腺癌根治手術后留取的蠟塊組織及患者的臨床資料作為觀察組，納入均符合WHO關于胃腺癌的診斷標準。觀察組95例，男54例，女41例，年齡42～79〔平均(60.6±5.9)〕歲，高分化39例，中分化35例，低分化21例，患者手術前均未進行放、化療。同時選取距腫瘤邊緣>3 cm切端為正常的胃黏膜組織70例作為對照組，男39例，女31例，年齡43～76〔平均(59.5±5.8)〕歲。

1.2 免疫組化檢測EIF3h和PTEN蛋白的表達 EIF3h蛋白的濃縮液購自Cell Signaling生物公司，按不同比例進行預實驗，選擇最佳配比濃度用于正式實驗。PTEN的工作液購自北京中杉金橋生物技術有限公司。EIF3h和PTEN的檢測應用免疫組化技術SP法，DAB染色，嚴格實驗步驟，并均由同一技師操作，嚴格質控。

1.3 EIF3h和PTEN蛋白檢測結果的判定方法 EIF3h和PTEN均以細胞質中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細胞，每張切片選擇10個400倍的高倍視野，取其平均值作為樣本最終的陽性表達率，以陽性細胞≥5%定為陽性，以陽性細胞<5%定為陰性。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗、線性相關分析和生存分析。

2 結 果

2.1 觀察組與對照組EIF3h和PTEN蛋白表達陽性率比較 觀察組EIF3h表達的陽性率明顯高于對照組(66.32% vs 12.86%，χ2=46.830 2，P<0.000 1)，PTEN表達的陽性率明顯低于對照組(42.11% vs 95.71%,χ2=50.812 4，P<0.000 1)。見圖1。

圖1 EIF3h、PTEN在胃腺癌及正常胃黏膜組織中的表達(DAB，×200)

2.2 觀察組不同臨床特征患者EIF3h和PTEN蛋白表達陽性率的比較 觀察組中EIF3h和PTEN表達的陽性率均與腫瘤的浸潤深度、淋巴結轉移、脈管浸潤、癌結節(jié)和Ki67增殖指數(shù)(圖2)密切相關(P<0.05)，見表1。

2.3 觀察組中EIF3h和PTEN表達的相關性 觀察組中EIF3h和PTEN的表達呈負相關(r=-0.53，P=0.019 2)。

2.4 觀察組中EIF3h和PTEN表達的生存分析 本組患者隨訪時間為7～60個月，平均24.9個月。經(jīng)檢驗，胃腺癌組織中EIF3h和PTEN的表達均與患者預后相關(P<0.05)，即EIF3h高表達、PTEN低表達患者的預后差。見圖3，圖4。

表1 觀察組不同臨床特征患者EIF3h和PTEN蛋白表達陽性率的比較〔n(%)〕

圖2 Ki67在胃腺癌中陽性表達(DAB，×200)

圖3 EIF3h蛋白表達與胃腺癌預后的關系

圖4 PTEN蛋白表達與胃腺癌預后的關系

3 討 論

胃腺癌病變發(fā)生和進展時細胞異常增生，同時存在復制被錯誤修復并表達到下一代細胞，引發(fā)腫瘤的傳代基因和細胞異常表達，此時參與增殖、翻譯和拮抗癌的相關基因均發(fā)生明顯變化。翻譯起始階段40S核糖體在發(fā)揮功能時需要相關因子的協(xié)助，尤其是其與mRNA結合時更加必要〔4〕。有研究認為EIF3是一個含有10～13不同亞基的大翻譯起始復合物，其亞基EIF3h對復合物的功能起到關鍵性作用，因此這些亞基稱為核心亞基〔5〕。近年學者也發(fā)現(xiàn)EIF3h可以使Met復合物穩(wěn)定地結合到40S核糖體亞基上，并有助于保存這個復合物在60S核糖體亞單位之上。當外源性刺激或有絲分裂信號刺激細胞時，mTOR結合EIF3h復合物，并且使S6K1磷酸化〔6〕。此種作用可以引起細胞的異型增生，同時能誘導腫瘤進展。有研究認為真核細胞的細胞質分子伴侶TCP-1結合到新合成的EIF3h時需正確折疊，最后的兩個亞基表達特定的基因〔7〕。在腫瘤進展過程中，此種作用可以使細胞微環(huán)境發(fā)生變化，有效的促進細胞信號的轉導、細胞增殖和整個翻譯過程〔8〕。PTEN是一種腫瘤抑制基因，其所編碼的蛋白質是一種磷酸酶。研究顯示PTEN可以引發(fā)細胞內(nèi)第二信使磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸(PIP3)出現(xiàn)去磷酸化，不僅抑制細胞的增殖，還可以抑制腫瘤的轉化〔9〕。但是關于PTEN在腫瘤中的作用可能更趨于多向性，如其可能與P53的作用有關〔10〕，也可能與NEDD4-1基因和作用相關〔11〕。

本實驗結果提示兩種蛋白異常表達可以誘發(fā)正常細胞癌變，并引發(fā)腫瘤細胞出現(xiàn)異常增殖。EIF3h引發(fā)腫瘤細胞增殖、生長的功能與其調(diào)節(jié)翻譯有關。也有研究認為EIF3h可以快速地誘導NIH-SH3細胞出現(xiàn)惡性表型〔12〕。也有學者認為EIF3h的高表達可以抑制MYC依賴的凋亡抑制過程，進而直接引起細胞的失控性增生〔13〕。而PTEN在作用過程中也可以對MYC有一定影響〔14〕。PTEN的表達一旦丟失，可以引起明顯的細胞增殖作用，可以無限制地引起以Ki67陽性細胞為主細胞的增殖作用，此時腫瘤細胞失控性增生、分化障礙，進而癌變、浸潤和轉移。本研究提示EIF3h、PTEN兩種蛋白異常表達參與胃腺癌的進展。此時腫瘤向周圍浸潤生長能力提高，脈管浸潤的能力增強，周圍形成癌結節(jié)的能力增高，并破壞神經(jīng)。腫瘤細胞中EIF3h高表達、PTEN低表達意味著腫瘤呈高轉移和高風險狀態(tài)，細胞間的黏附作用減弱，遷移及活動能力均增強，易于種植于其他部位形成轉移灶〔15,16〕。由于以上因素均為臨床判斷生物學行為的重要指標，因此EIF3h高表達、PTEN低表達提示不良的預后，而生存分析直接證實了此觀點。因此聯(lián)合檢測EIF3h和PTEN的表達可以作為判定胃腺癌預后的指標。

總之，胃腺癌組織中EIF3h高表達、PTEN低表達時對腫瘤的進展有促進作用，術后檢測EIF3h和PTEN的表達對判斷胃腺癌的預后有一定價值。

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〔2015-03-17修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

1 唐山職業(yè)技術學院醫(yī)學校區(qū)

劉愛東(1975-)，男，醫(yī)學碩士，副主任醫(yī)師，副教授，主要從事腫瘤分子病理學研究。

R735.1

A

1005-9202(2016)19-4815-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.065