Ki67指數(shù)預(yù)測Luminal型HER2-乳腺癌新輔助化療療效的臨床價(jià)值

桑蝶　王佳玉　徐兵河　張頻　李青　袁芃　馬飛　蔡銳剛　羅揚(yáng)　樊英　陳閃閃　李俏

中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院內(nèi)科，北京　100021

Ki67指數(shù)預(yù)測Luminal型HER2-乳腺癌新輔助化療療效的臨床價(jià)值

桑蝶王佳玉徐兵河#張頻李青袁芃馬飛蔡銳剛羅揚(yáng)樊英陳閃閃李俏

中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院內(nèi)科，北京100021

目的探索Ki67指數(shù)預(yù)測Luminal型HER2-乳腺癌新輔助化療（neoadjuvant chemotherapy，NCT）療效中的價(jià)值。方法采用免疫組織化學(xué)法檢測159例NCT治療的乳腺癌患者乳腺組織標(biāo)本中Ki67、ER、PR及HER-2表達(dá)狀況，用χ2檢驗(yàn)分析Ki67與病理學(xué)完全緩解（pathological complete response，pCR）之間的關(guān)系。結(jié)果將本組病例分成兩組，Ki67指數(shù)＜30％（85例）為低表達(dá)組和Ki67指數(shù)≥30％為高表達(dá)組（74例），Ki67高表達(dá)組pCR率明顯高于低表達(dá)組（21.6％vs 2.4％，P=0）。依據(jù)敏感度與特異度之和最大化原則計(jì)算Ki67預(yù)測pCR的最佳界值為37％，ROC曲線下面積為0.832，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.039，P＜0.01。結(jié)論在Luminal型HER2-乳腺癌中，Ki67高表達(dá)患者對化療更敏感，Ki67預(yù)測pCR的界值為37％，可作為臨床醫(yī)師選擇治療策略的參考依據(jù)。

Luminal型HER2-乳腺癌；Ki67；新輔助化療；療效；ROC曲線

Oncol Prog，2016，14（3）

Ki67是增殖細(xì)胞核抗原，為判斷腫瘤惡性程度的指標(biāo)［1］。Luminal型HER2-乳腺癌定義為ER（+）和（或）PR（+），HER2（-），且Ki67陽性表達(dá)的分子亞型，包括Luminal A型和HER2（-）Luminal B型。Luminal型HER2-乳腺癌總體預(yù)后較好，但其中部分患者單獨(dú)行輔助內(nèi)分泌治療預(yù)后仍較差，這些患者也可能從NCT中獲益。NCT為局部晚期乳腺癌標(biāo)準(zhǔn)治療手段之一，NCT達(dá)pCR的患者，無病生存期（DFS）明顯延長［2］。也有研究證實(shí)［3］，獲得pCR患者總生存率（OS）高于未獲得pCR患者。故臨床上用pCR作為判斷患者預(yù)后的替代指標(biāo)。本研究旨在探討Ki67指數(shù)在預(yù)測NCT療效中的價(jià)值，報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

收集自2012年1月至2014年9月在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院治療的159例乳腺癌NCT患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)《AJCC癌癥分期手冊》第7版標(biāo)準(zhǔn)，臨床分期為Ⅱ期或Ⅲ期；免疫組化ER （+）和（或）PR（+），HER2（-），且Ki67陽性表達(dá)的分子亞型。患者中位年齡為48歲（23～71歲），其中有155例浸潤性導(dǎo)管癌，2例浸潤性小葉癌，2例黏液腺癌；身體狀態(tài)ECOG評分為0分者157例（98.2％），1分者2例（1.8％）。

1.2化療方法

159例患者均采用蒽環(huán)類聯(lián)合紫杉類方案治療（表柔比星/吡柔比星+多西他賽/紫杉醇），表柔比星75 mg/m2或吡柔比星50 mg/m2，d1、d2靜脈滴注，紫杉醇175 mg/m2或多西他賽75 mg/m2，d3靜脈滴注，21 d為1個周期，共經(jīng)2～6個周期化療（中位數(shù)4個周期），之后手術(shù)。

1.3主要評價(jià)指標(biāo)

乳腺穿刺活檢標(biāo)本由病理科用全自動免疫組化機(jī)進(jìn)行檢測，標(biāo)本經(jīng)石蠟包埋并制作成4 μm的切片。ER、PR定義：腫瘤細(xì)胞核染色強(qiáng)著色細(xì)胞百分比≥1％時(shí)判讀為陽性，腫瘤細(xì)胞核染色＜1％時(shí)為陰性。HER2免疫組化（IHC）及熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）檢查判讀標(biāo)準(zhǔn)［4］：IHC檢測HER-2結(jié)果+++為陽性，0～1+為陰性，++進(jìn)行FISH檢測，F(xiàn)ISH基因拷貝數(shù)擴(kuò)增＞2.2被認(rèn)定為陽性。Ki67判讀［5］：陽性細(xì)胞指細(xì)胞核染色為淡黃至棕黃色，于400倍光鏡下檢查，隨機(jī)選擇10個視野，每個視野計(jì)數(shù)500個細(xì)胞，計(jì)算Ki67陽性細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的比例。本研究定義Ki67指數(shù)＜30％為低表達(dá)，Ki67指數(shù)≥30％為高表達(dá)。pCR定義：術(shù)后乳腺組織中未發(fā)現(xiàn)浸潤性癌細(xì)胞，或僅殘存原位癌成分，且腋窩轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)病變完全消失。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。根據(jù)Ki67表達(dá)情況繪制ROC曲線并得到相應(yīng)參數(shù)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1Ki67的表達(dá)與NCT療效分析

159例患者，Ki67低表達(dá)組85例，Ki67高表達(dá)組74例，其中Ki67高表達(dá)組獲得pCR的比例為21.6％ （16/74），明顯高于Ki67低表達(dá)組的2.4％（2/85），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=14.631，P＜0.01）。（表1）

表1　兩組的NCT療效比較

2.2Ki67對pCR的預(yù)測效率

本研究根據(jù)159例患者的Ki67表達(dá)指數(shù)，繪制預(yù)測pCR的ROC曲線圖，由敏感度與特異度之和最大化原則計(jì)算Ki67預(yù)測pCR的最佳界值為37％，敏感度70.6％，特異度79.6％，ROC曲線下面積為0.832，面積的標(biāo)準(zhǔn)誤為0.039，面積的95％可信區(qū)間為（0.756，0.908），Ki67預(yù)測pCR有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。表明Ki67表達(dá)越高，獲得pCR的可能性越大。（圖1）

圖1　Ki67預(yù)測pCR的ROC曲線

3　討論

分子分型指導(dǎo)下的腫瘤個體化治療到精準(zhǔn)治療是臨床努力的方向［6］，通常Luminal型為乳腺癌的主要分子亞型，本研究收集最近3年的乳腺癌患者臨床資料顯示，Luminal型HER2-型占所有患者的49.7％（159/320），故探討此亞型具有重要的臨床意義。既往研究報(bào)道［7-8］Luminal型乳腺癌NCT治療后pCR率為6％～12％，明顯低于三陰性及HER2過表達(dá)型乳腺癌，在本研究中，159例患者給予蒽環(huán)類聯(lián)合紫杉類的治療方案，pCR率為11.3％（18/ 159），與文獻(xiàn)報(bào)道一致。

有文獻(xiàn)報(bào)道［9-10］Ki67與乳腺癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為判斷乳腺癌惡性程度的指標(biāo)，Ki67增殖指數(shù)越高，對化療敏感性更強(qiáng)，但預(yù)后也較差。本研究中，以Ki67 30％為界值，分成高表達(dá)組和低表達(dá)組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩組患者NCT的pCR率截然不同，分別為21.6％和2.4％，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示在Ki67高表達(dá)組患者中，pCR率更高，對化療更敏感。這與張?jiān)坪玫龋?1］的研究結(jié)果一致。故可以得出結(jié)論，Luminal型HER2-乳腺癌Ki67≥30％，pCR率明顯高于Ki67＜30％患者，而NCT獲得pCR患者能夠顯著改善無病生存期［2］。

本研究依據(jù)敏感度與特異度之和最大化原則，結(jié)果Ki67預(yù)測pCR的界值為37％，ROC曲線下面積為0.832，敏感度70.6％，特異度79.6％，P＜0.01。這是一項(xiàng)較為科學(xué)、合理的檢測指標(biāo)和研究方法，回顧國內(nèi)外文獻(xiàn)極少采用繪制ROC曲線方法去尋找Ki67的界值，本研究提示可以根據(jù)Ki67指數(shù)預(yù)測NCT療效，從而選擇更能從化療中獲益的患者。

綜上所述，Luminal型HER2-乳腺癌預(yù)測pCR 的Ki67界值為37％，Ki67表達(dá)水平越高，NCT獲得pCR的可能性更大，因此Ki67可以作為預(yù)測療效的指標(biāo)，為臨床醫(yī)師選擇治療策略提供參考依據(jù)。

［1］Yerushalmi R，Woods R，Ravdin PM，et al.Ki67 in breast cancer：prognostic and predictive potential［J］.Lancet Oncol，2010，11（2）：174-183.

［2］曹丹霞，何建蓉，沈坤煒，等.激素受體和HER2及Ki67預(yù)測乳腺癌新輔助化療療效價(jià)值的分析［J］.中華腫瘤防治雜志，2012，19（13）：1000-1003.

［3］Montagna E，Bagnardi V，Rotmensz N，et al.Pathological complete response after preoperative systemic therapy and outcome：relevance of clinical and biologic baseline features ［J］.Breast Cancer Res Treat，2010，124（3）：689-699.

［4］“乳腺癌HER-2檢測指南”編寫組.乳腺癌HER-2檢測指南［J］.中華病理學(xué)雜志，2006，35（10）：631-633.

［5］Bukholm IR，Bukholm G，Holm R，et al.Association betw een histology grade，expression of HsMCM2，and cyclin A in human invasive breast carcinomas［J］.J Clin Pathol，2003，56（5）：368-373.

［6］徐兵河，張萍.乳腺癌的分子分型與個體化治療［J］.中華腫瘤雜志，2010，32（9）：641-644.

［7］Kong X，Moran MS，Zhang N，et al.Meta-analysis confirms achieving pathological complete response after neoadjuvant chemotherapy predicts favourable prognosis for breast cancer patients［J］.Eur J Cancer，2011，47（14）：2084-2090.

［8］李小龍，成宏，趙晨暉，等.乳腺癌臨床病理指標(biāo)以及分子分型對TEC新輔助化療病理完全緩解的預(yù)測價(jià)值［J］.腫瘤防治研究，2013，40（6）：599-603.

［9］Li X，Liu M，Zhang Y，et al.ER，PR，HER-2，Ki67，topoisomerase IIα，and nm23-H1 Proteins expression as predictors of Pathological complete response to neoadjuvant chemotherapy for locally advanced breast cancer［J］.Medical Oncology，2011，28（1）：48-54.

［10］Ohno S，Chow LW，Sato N，et al.Randomized trial of preoperative docetaxel with or without capecitabine after 4 cycles of 5-fluorouracil-epirubicin-cyclophosphamide（FEC）in early-stage breast cancer：exploratory analyses identify Ki67 as a predictive biomarker for response to neoadjuvant chemotherapy［J］.Breast Cancer Res Treat，2013，142（1）：69-80.

［11］張?jiān)坪茫愄煳?，王開昕，等.Ki67表達(dá)在乳腺癌新輔助化療中的臨床意義［J］.實(shí)用醫(yī)院臨床雜志，2012，9（4）：60-62.

Ki67 predicts response to neoadjuvant chemotherapy in Luminal subtype（HER-2 negative）of breast cancer

SANG Die WANG Jia-yu XU Bing-he#ZHANG Pin LI Qing YUAN Peng MA Fei CAI Rui-gang LUO Yang FAN Ying CHEN Shan-shan LI Qiao
Department of Medical Oncology，Cancer Hospital，Chinese Academy of Medical Sciences，Beijing 100021，China

ObjectiveTo explore the value of Ki67 in predicting the response of neoadjuvant chemotherapy（neoadjuvant chemotherapy，NCT）in Luminal subtype（HER-2 negative）of breast cancer.MethodImmunohistochemistry （IHC）was used to examine the expression of Ki67，ER，PR and HER-2 in 159 cases of breast cancers patients treated with NCT.Square analysis was applied to analyze the correlation between Ki67 expression and Pathological Complete Response（pCR）.ResultPatients were divided into either lower expression group with the index of Ki67＜30％（85 cases），or higher expression group with the index of Ki67≥30％（74 cases）.The pCR of Ki67 in the higher expression group was markedly higher than that of the lower expression group（21.6％vs 2.4％，P＜0.01）.Based on the sum maximum principle of sensitivity and specificity，we calculated the optimal critical value of pCR as 37％，the area under curve of ROC was 0.832，the standard error was 0.039，P＜0.01.ConclusionIn the Luminal subtype（HER-2 negative）of breast cancer，patients with higher expression of Ki67 were more sensitive to NCT.The optimal cut-off value of Ki67 in predicting response is 37％，which might be a reference for clinical physicians in choosing treatment strategy.

Luminal subtype（HER-2 negative）of breast cancer；Ki67；neoadjuvant chemotherapy；response；ROC curve

R737.9

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.03.16

2015-09-05）

（corresponding author），郵箱：xubinghe@medmail.com.cn