磷酸化應激誘導蛋白1和雌激素受體-α蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及相關性分析

曹鐘黃岡市中心醫(yī)院病理科，湖北黃岡438000

磷酸化應激誘導蛋白1和雌激素受體-α蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及相關性分析

曹鐘
黃岡市中心醫(yī)院病理科，湖北黃岡438000

目的觀察分析磷酸化應激誘導蛋白1（STIP1）與雌激素受體-α（ER-α）蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達情況，分析二者與甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生、發(fā)展的相關性。方法選取甲狀腺乳頭狀癌患者81例，共收集石蠟包埋乳頭狀癌組織81例，癌旁正常甲狀腺組織15例，轉移癌甲狀腺組織25例，單純橋本氏甲狀腺炎（CLT）組織23例，分別為甲狀腺乳頭狀癌組、對照組、淋巴結轉移癌組、CLT組，觀察各組STIP1與ER-α蛋白表達情況及相關性。結果甲狀腺乳頭狀癌組及淋巴結轉移癌組STIP1與ER-α蛋白表達陽性率均高于CLT組及對照組，組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；甲狀腺乳頭狀癌組中STIP1與ER-α蛋白表達呈正相關，比較差異具有統(tǒng)計學意義（r=0.614，P=0.009）。結論STIP1與ER-α蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中高表達，可能參與了甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生、發(fā)展與轉移過程，二者表達呈正相關性，表明二者可能在甲狀腺癌的發(fā)展中起到一定的協(xié)同作用，參與促進甲狀腺乳頭狀癌的淋巴結轉移。

甲狀腺乳頭狀癌；磷酸化應激誘導蛋白1；雌激素受體-α蛋白；橋本氏甲狀腺炎

Oncol Prog，2016，14（5）

甲狀腺乳頭狀癌約占甲狀腺惡性腫瘤的80%以上［1］，是頭頸部腫瘤常見的惡性病變。該病發(fā)病年齡較低，目前發(fā)病率呈上升趨勢［2］，研究表明橋本氏甲狀腺炎（chronic lymphocytic thyroiditis，CLT）患者合并甲狀腺癌的比例較高［3］，為甲狀腺癌發(fā)生的重要因素。據(jù)相關研究表明，隨著分子生物學技術的發(fā)展，腫瘤發(fā)生發(fā)展的機制研究亦逐漸深入，其中磷酸化應激誘導蛋白（stress induced phosphoprotein1，STIP1）與雌激素受體α（estrogen receptor α，ER-α）蛋白與腫瘤浸潤、轉移有著一定關系［4］。本文觀察分析了STIP1與ER-α蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達情況，分析二者與甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生、發(fā)展的相關性，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2014年1月至2015年6月于黃岡市中心醫(yī)院收治的甲狀腺乳頭狀癌患者81例，從患者石蠟包埋組織中收集乳頭狀癌組織81例，癌旁正常甲狀腺組織15例，淋巴結轉移癌甲狀腺組織25例，單純CLT組織23例，分為甲狀腺乳頭狀癌組、對照組、淋巴結轉移癌組、CLT組。納入標準：①通過手術后石蠟病理檢查診斷為甲狀腺乳頭狀癌。②具有確切、完整的臨床病理診斷資料。③手術前均未接受過放療及化療。④為初次手術患者。⑤無合并其他腫瘤疾病。⑥對本研究均知情，且簽署知情同意書。所有患者術前均未予放化療，直接接受手術治療，經(jīng)兩名以上病理科醫(yī)師閱片確診，且排除合并其他系統(tǒng)惡性腫瘤。其中，甲狀腺乳頭狀癌組，男性17例，女性64例，年齡在23～68歲，平均年齡（41.8±5.7）歲；對照組男性2例，女性13例，年齡在29～67歲，平均年齡（41.7±6.2）歲；淋巴結轉移癌組男性7例，女性18例，年齡在24～65歲，平均年齡（41.9±5.4）歲；CLT組男性5例，女性18例，年齡在25～69歲，平均年齡（41.5±6.3）歲。四組性別、年齡、病情等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2材料與方法

STIP1抗體試劑選擇Abcam公司提供的鼠抗人STIP1多克隆抗體；ER-α抗體選擇中杉金橋生物技術公司提供的兔抗人ER-α多克隆抗體。石蠟組織4 μm切片，80℃烤片后，采用免疫組織化學染色法對組織中STIP1及ER-α蛋白表達進行檢測，STIP1采用直腸癌陽性病例作為陽性對照，ER-α采用乳腺癌陽性病例作為陽性對照，PBS緩沖液代替一抗為陰性對照。

1.3結果判定方法

ER-α蛋白定位在細胞質和（或）細胞核中，對細胞核陽性者進行統(tǒng)計，其顯色程度分為：污染色為陰性（－），淡黃色為弱陽性（+），棕黃色為中陽性（++），棕褐色為強陽性（+++）。STIP1定位在細胞質和（或）細胞核中，采用染色范圍×染色強度判定陽性情況，其中染色強度評分：無染色為0，弱染色為1，中染色為2，強染色為3；染色范圍腫瘤細胞＜25%為1，25%～49%為2，50%～75%為3，＞75%為4，染色范圍×染色強度＞4為STIP1陽性表達（+）。（+）以上所有的切片均由兩名資深的病理科醫(yī)師進行雙盲觀察。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料采用χ2檢驗，相關性分析以Spearman等級進行分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1四類組織的病理表現(xiàn)

甲狀腺乳腺癌組織鏡下可見明顯乳頭狀結構，部分患者存在濾泡性、乳頭濾泡混合性結構，核增大且不規(guī)則，粉塵狀染色質，核仁較小且靠近核膜，部分可見存在核內假包涵體，核伴有清晰的嗜酸性細胞質，部分可見鈣鹽沉積且為同心圓狀。CLT組織鏡下可見淋巴細胞密集浸潤區(qū)域具有活躍增生的甲狀腺上皮細胞在周邊密集存在，細胞核與單純甲狀腺癌組織鏡下病理表現(xiàn)類似，細胞存在高柱狀特征，淋巴結明顯強化，內部有散在低密度灶，淋巴結邊緣有不連續(xù)“蛋殼樣”鈣化，甲狀腺原發(fā)腫瘤內亦有相似鈣化。（圖1）

圖1　四類組織的典型病理表現(xiàn)

2.2四組的STIP1陽性表達情況比較

結果顯示，甲狀腺乳頭狀癌組及淋巴結轉移癌組STIP1陽性率高于CLT組及對照組（表1），組間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表1　四組STIPSTIP1 1陽性表達情況［n（%）］

2.3四組的ER-α蛋白陽性表達情況比較

結果顯示，甲狀腺乳頭狀癌組及淋巴結轉移癌組ER-α蛋白陽性率高于CLT組及對照組（表2），組間比較差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表2　四組ER-α蛋白陽性表達情況［n（%）］

2.4 STIP1與ER-α蛋白表達的相關性分析

應用Spearman等級相關分析對甲狀腺乳頭狀癌組中STIP1與ER-α蛋白表達的相關性進行分析，結果顯示：STIP1與ER-α蛋白表達呈正相關（r= 0.614，P=0.009）。

3　討論

甲狀腺癌是臨床常見的內分泌腫瘤，其發(fā)病率在全身惡性腫瘤中占0.2%～1%，據(jù)相關調查可知，甲狀腺癌多發(fā)于青壯年女性，女性患病是男性的3倍，其中乳頭狀癌的發(fā)病率約占60%以上，患者在發(fā)病初期無明顯癥狀，易發(fā)生淋巴結轉移，因此通常發(fā)生淋巴結轉移的患者例數(shù)較多，且隨年齡增長，發(fā)病惡性程度明顯增加［5］。目前對甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)病機制尚未明確。CLT是臨床常見的自身免疫性疾病，臨床發(fā)現(xiàn)甲狀腺乳頭狀癌患者合并有CLT的情況較多見，CLT組織學表現(xiàn)為濾泡上皮細胞嗜酸性變，胞質內線粒體數(shù)量增多，可能由于內分泌、癌基因突變和重排多種因素協(xié)調作用所致，因此與腫瘤發(fā)生具有密切關系，其炎性反應也可能從多方面對腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有影響作用［6］。

STIP1是Hsp70與Hsp90的連接體分子，能夠直接與熱應激蛋白70（Hsp70）和熱應激蛋白90 （Hsp90）相結合起到保護細胞的作用。研究表明［7］，STIP1表達與生物細胞的癌變、凋亡有密切關系，并在生物信號傳導通路中參與較多。在卵巢癌組織中對STIP1表達的研究發(fā)現(xiàn)，STIP1與磷酸化細胞外調節(jié)蛋白激酶（ERK）能夠共同定位于卵巢組織中，通過激活ERK促進卵巢癌細胞增殖，ERK為多種生長因子的下游蛋白，具有調節(jié)細胞增殖、分化及凋亡的功能。ERK蛋白是一種存在于細胞外的信號調節(jié)激酶，與細胞的增殖和分化有密切關系，而重組的STIP1可以調節(jié)ERK的磷酸化水平，使其表達升高，參與DNA的合成。本研究結果顯示，甲狀腺乳頭狀癌患者癌變組織及淋巴結轉移癌組織中STIP1表達陽性率高于正常甲狀腺組織及CLT組織，據(jù)此結果推測，STIP1在乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展及轉移中起到一定作用，這種作用可能正因STIP1激活ERK通路導致的，從而促進了甲狀腺乳頭狀癌的轉變［8］。

雌激素受體（ER）為介導雌激素生物效能的特異性結合蛋白，主要包括ER-α和ER-β兩個亞型，由于甲狀腺癌及其乳頭狀癌發(fā)病率女性高于男性，對ER蛋白表達與甲狀腺癌的相關性分析一直是臨床研究的重點［9］。ER-α能夠與脂溶性雌激素相結合，從而在新生血管及腫瘤發(fā)展轉移中起到一定作用，其參與了調節(jié)細胞增殖與分化，ER-α蛋白活性能夠在不同信號通路中發(fā)揮作用，其中絲裂原活化蛋白與細胞外信號調節(jié)蛋白激酶交互作用，促進腫瘤的生長與轉移［10］。本研究結果顯示，甲狀腺乳頭狀癌組織及淋巴結轉移癌組織中ER-α蛋白表達陽性率高于正常甲狀腺組織及CLT組織，且淋巴結轉移癌組織高于甲狀腺乳頭狀癌，這也說明ER-α蛋白表達對腫瘤的生長和轉移有一定的影響。而STIP1與ER-α蛋白表達呈現(xiàn)正相關性，這說明二者可能在甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展、轉移中起到協(xié)同作用，通過相關信號通路對腫瘤細胞的增殖，使血管變化發(fā)揮重要作用，從而刺激腫瘤細胞增殖和轉移的發(fā)生。另外，CLT組織中STIP1和ER-α蛋白表達與正常甲狀腺組織表達陽性情況比較無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），且低于甲狀腺乳頭狀癌組織及淋巴結轉移癌組織表達陽性率，這可能表明二者未參與到CLT向甲狀腺癌轉化和影響的過程之中。

綜上所述，本研究通過觀察STIPI1與ER-α蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達情況及進行相關性分析得出，STIP1與ER-α蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中具有高表達的特性，可能參與了甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生、發(fā)展與轉移過程；STIPI1與ER-α蛋白表達呈正相關性，表明二者可能在甲狀腺癌的發(fā)展中起到一定的協(xié)同作用，參與促進甲狀腺乳頭狀癌的淋巴結轉移。

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Expression and correlation of stress induced phosphoprotein 1 and estrooggeenn receptor alpha in papillary thyroid carcinoma

CAO Zhong
Department of Pathology，Central Hospital of Huanggang，Huanggang 438000，Hubei，China

Abstracts：ObjectivectiveTo observe the expression of stress-induced phosphoprotein 1（STIPI1）and estrogen receptorα（ER-α）in papillary thyroid carcinoma（PTC），and analyze the correlation between the two proteins and the occurrence，development of PTC.Methodethod81 cases of PTC patients were included in this study，in which there were 81 cases of papillary carcinoma，15 cases with normal adjacent tissues，25 cases of lymphatic metastasis，and 23 cases of chronic lymphocytic thyroiditis（CLT），and then the subjects were stratified as PTC group，control group，metastasis group and CLT group accordingly，the expression and correlation of STIP1 and ER-α of each group were observed.ResultesultThe positive expression rates of STIP1 and ER-α in PTC and metastasis group were higher than those in CLT and control group（P＜0.05）；in PTC group，the expression of STIP1 was positively correlated with ER-α expression，with significant difference observed（r=0.614，P=0.009）.ConclusionusionSTIP1 and ER-α are highly expressed in papillary thyroid carcinoma，which may be involved in the occurrence，development and metastasis process，and there is a positive correlation between the protein expression，facilitating the of lymph node metastasis in papillary thyroid carcinoma.

rdspapillary thyroid carcinoma；STIP1；estrogen receptor alpha protein；chronic lymphocytic thyroiditis

R736. 1

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.05.13

2016-02-23）