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    球孢白僵菌BB-T02生物學(xué)特性及對(duì)兩種檢疫性粉蚧的侵染活性

    2022-04-22 04:29:14姚錦愛(ài)余德億侯翔宇
    關(guān)鍵詞:球孢孢量產(chǎn)孢

    黃 鵬,姚錦愛(ài),余德億,侯翔宇

    (福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/福建省作物有害生物監(jiān)測(cè)與治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/福建省作物有害生物綠色防控工程研究中心,福州 350013)

    南洋臀紋粉蚧Planococcus lilacinus和石蒜綿粉蚧Phenacoccus solani是兩種世界性花果害蟲(chóng),南洋臀紋粉蚧可為害可可、番荔枝、紅毛榴蓮、番石榴、柑橘、美洲木棉、羊蹄甲、變?nèi)~木、桅子花和杜鵑等35個(gè)科100余種水果、林木和觀賞植物[1,2],在2007年被我國(guó)列入進(jìn)境植物檢疫性有害生物[3];石蒜綿粉蚧可為害石蒜科、景天科、仙人掌科、爵床科、番杏科、大戟科、馬齒莧科、菊科、豆科和茄科等40科101屬131種觀賞植物和經(jīng)濟(jì)作物[4,5],在2014年被國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局列為進(jìn)口多肉植物重點(diǎn)關(guān)注的有害生物[6]。雖然這兩種檢疫性粉蚧目前在國(guó)內(nèi)尚未有廣泛分布的報(bào)道,但本研究前期調(diào)查發(fā)現(xiàn)它們分別已在福建省內(nèi)的番荔枝果園和多肉植物種植基地發(fā)生為害嚴(yán)重,世代重疊明顯,若蟲(chóng)和成蟲(chóng)常群集刺吸為害果實(shí)、葉片、幼芽和嫩莖等部分,引起落花、落葉、落果和長(zhǎng)勢(shì)衰弱,同時(shí)還分泌蜜露誘發(fā)煤煙病,直接或間接影響番荔枝和多肉植物的品質(zhì)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值,急需防控。

    南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧體表覆蓋大量蠟質(zhì),不易防治,目前生產(chǎn)上采用的防控措施還偏重于使用化學(xué)農(nóng)藥,但長(zhǎng)期使用化學(xué)農(nóng)藥,易造成“3R”、環(huán)境污染和生物多樣性下降等負(fù)面問(wèn)題,與我國(guó)種植業(yè)的綠色引領(lǐng)導(dǎo)向沖突不斷,需尋找更加環(huán)保的措施協(xié)同控害。生物防治是一種安全、有效、持久的控害方法,其中挖掘、利用蟲(chóng)生真菌已是害蟲(chóng)生防的重要發(fā)展方向和研究熱點(diǎn)之一[7,8]。目前,全世界已記載的蟲(chóng)生真菌約1000多種[9],但僅金龜子綠僵菌Metarhizium anisopliae中的F061和FM-03等菌株被挖掘用于防控這2種檢疫性粉蚧[10,11],可供選擇的菌株資源仍相對(duì)較少,因此有必要再尋找一些高效的蟲(chóng)生真菌菌株以減輕它們的為害。球孢白僵菌Beauveriabassiana是目前世界上研究和應(yīng)用最多的蟲(chóng)生真菌之一,對(duì)人、畜、作物、害蟲(chóng)天敵及自然環(huán)境相對(duì)安全,已被廣泛用于害蟲(chóng)生物防治[12,13];其中菌株BB-T02已被證實(shí)對(duì)薊馬的致死效果達(dá)87%以上[14]。本研究以南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧的雌成蟲(chóng)(體型最大、體表蠟質(zhì)最厚、取食和為害能力最強(qiáng))為供試蟲(chóng)源,在菌株生物學(xué)特性的基礎(chǔ)上,測(cè)定菌株BB-T02對(duì)兩種檢疫性粉蚧的致病力和胞外酶活性,明確該菌株對(duì)兩種檢疫性粉蚧的生防潛力,為利用蟲(chóng)生真菌防控檢疫性粉蚧提供技術(shù)支持。

    1 材料與方法

    1.1 供試菌株與蟲(chóng)源

    供試球孢白僵菌BB-T02從受感染的馬尾松毛蟲(chóng)Dendrolimus punctatus幼蟲(chóng)上分離獲得,已保藏于中國(guó)微生物菌種管理委員會(huì)普通微生物中心(保藏號(hào):CGMCC No.14130)[14],活化采用察氏培養(yǎng)基(NaNO33 g、KH2PO41 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、FeSO40.01 g、蔗糖 30 g、瓊脂粉 20 g和蒸餾水 1000 mL);取斜面保存的菌株BB-T02接種到培養(yǎng)基平板(d=9.0 cm,下同)上,置于溫度(25±1)℃的HGZ-150型光照培養(yǎng)箱內(nèi)活化培養(yǎng)10 d備用。供試南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧分別采集于福建省漳州市詔安縣金星鄉(xiāng)的番荔枝果園和龍海市九湖鎮(zhèn)的多肉種植基地,在室溫 25~28 ℃、相對(duì)濕度 50%~60%、光周期12L:12D條件下分別用番荔枝果實(shí)和多肉植物“紅心蓮”飼養(yǎng),取次代蛻皮3 d的雌成蟲(chóng)備用。

    1.2 球孢白僵菌BB-T02生物學(xué)特性觀察

    1.2.1 溫度對(duì)菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響 參考徐金柱等[15]的方法挑取菌株BB-T02的單孢接種于察氏培養(yǎng)基平板中央,然后分別置于24、28和32 ℃等3個(gè)溫度的培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng),每個(gè)處理3次重復(fù);培養(yǎng)10 d后,用十字交叉法測(cè)定菌落直徑;再往每個(gè)處理培養(yǎng)皿中加入10 mL含0.05%吐溫-80的無(wú)菌水,用滅菌玻片刮下分生孢子配制成孢懸液,經(jīng)3層紗布過(guò)濾后,用紐鮑爾血球計(jì)數(shù)板在E200型生物顯微鏡(尼康儀器(上海)有限公司)下觀察、測(cè)定每個(gè)處理的產(chǎn)孢量。

    1.2.2 光照對(duì)菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響 挑取菌株BB-T02的單孢接種于察氏培養(yǎng)基平板中央,然后分別置于光周期16L:8D、12L:12D和8L:16D等3種光周期及溫度(28±1)℃光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每個(gè)處理3次重復(fù);培養(yǎng)10 d后,采用1.2.1的方法測(cè)定菌落直徑和產(chǎn)孢量。

    1.2.3 碳源對(duì)菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響 參考黃鵬等[16]的方法,在察氏培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,分別以葡萄糖、蔗糖和麥芽糖等3種材料作為供試碳源,制成3種試驗(yàn)培養(yǎng)基,每個(gè)處理3次重復(fù);挑取菌株BB-T02的單孢接種于察氏培養(yǎng)基平板中央,再置于溫度(28±1)℃、光周期8L:16D的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10 d,采用1.2.1的方法測(cè)定菌落直徑和產(chǎn)孢量。

    1.2.4 氮源對(duì)菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響 在察氏培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,以1.2.3篩選的材料作為碳源,再分別以硝酸鈉、蛋白胨和牛肉膏等3種材料作為供試氮源,制成3種試驗(yàn)培養(yǎng)基,每個(gè)處理3次重復(fù);挑取菌株BB-T02的單孢接種于察氏培養(yǎng)基平板中央,再置于溫度(28±1)℃、光周期8L:16D的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10 d,采用1.2.1的方法測(cè)定菌落直徑和產(chǎn)孢量。

    1.3 球孢白僵菌BB-T02侵染活性測(cè)定

    1.3.1 致病力測(cè)定 參考黃鵬等[10]的方法,在生物學(xué)特性觀察的基礎(chǔ)上,取單孢培養(yǎng)的菌株 BB-T02,先往培養(yǎng)皿中加入10 mL含0.05%吐溫-80的無(wú)菌水,再用滅菌玻片刮下分生孢子,后經(jīng)3層紗布過(guò)濾得孢子原液,充分混勻后,計(jì)算孢子濃度;用無(wú)菌水將孢子原液稀釋成 1×108、1×107、1×106、1×105和 1×104孢子/mL 5個(gè)處理濃度備用,以0.05%吐溫-80無(wú)菌水為對(duì)照,每個(gè)處理3次重復(fù)。針對(duì)南洋臀紋粉蚧,取直徑12 cm、高10 cm的塑料保鮮盒,每個(gè)保鮮盒中放1個(gè)生長(zhǎng)90 d的番荔枝果實(shí);在每個(gè)保鮮盒的蓋子上挖取直徑6 cm的透氣孔,并用膠水將1塊直徑8 cm 的防蟲(chóng)網(wǎng)(80目)粘在透氣孔上方;用毛筆分別挑取健康的南洋臀紋粉蚧雌成蟲(chóng)30頭,在各濃度處理菌液中浸泡10 s后挑到濾紙上,晾干2 min,再將南洋臀紋粉蚧挑到番荔枝果實(shí)上,蓋上保鮮蓋。針對(duì)石蒜綿粉蚧,取直徑9 cm的培養(yǎng)皿,依次鋪入相同直徑的花泥和濾紙各1片,花泥厚0.5 cm吸水6 mL,濾紙上再放1片多肉植物“紅心蓮”的葉片,葉柄用濕棉花包裹并緊貼濾紙;接著用軟毛筆分別挑取石蒜綿粉蚧雌成蟲(chóng) 30頭,在各濃度處理菌液中浸泡10 s后挑到濾紙上,晾干2 min,再將石蒜綿粉蚧挑到葉片上,蓋上培養(yǎng)皿。將保鮮盒和培養(yǎng)皿置于溫度(28±1)℃、相對(duì)濕度(90±5)%、光周期8L:16D的MGC-350HP-2型人工氣候箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)內(nèi),每天定時(shí)觀察并挑除死亡蟲(chóng)體,以蟲(chóng)體長(zhǎng)出菌絲確認(rèn)為有效侵染,觀察至所有處理中試蟲(chóng)的死亡數(shù)停止發(fā)生變化為止。統(tǒng)計(jì)2種檢疫性粉蚧的死亡率,計(jì)算菌株BB-T02致死中濃度LC50和不同濃度孢懸液下的致死中時(shí)LT50,并參考黃鵬等[14]的方法對(duì)死亡蟲(chóng)體上的致病菌再進(jìn)行分離純化和電子顯微形態(tài)鑒定。

    1.3.2 胞外酶活性測(cè)定 參考Lu等[17]的方法制作蛋白酶、幾丁質(zhì)酶和脂肪酶3種胞外酶液,并測(cè)定它們的活性。胞外酶液制作:取1×108孢子/mL的菌株BB-T02孢子液1 mL分別加入到含99 mL蛋白酶誘導(dǎo)培養(yǎng)基(明膠10 g,K2HPO4、NaCl和MgSO4·7H2O各0.3 g,溶于1 L濃度為0.02 mol/L、pH 7的磷酸鹽緩沖液中)、幾丁質(zhì)酶誘導(dǎo)培養(yǎng)基(蛋白胨5 g,K2HPO4、KCl和MgSO47·H2O各0.5 g,ZnSO4·7H2O 1 g,膠狀幾丁質(zhì)10 g,溶于1 L蒸餾水中)或脂肪酶誘導(dǎo)培養(yǎng)基(葡萄糖2 g,蛋白胨5 g,MgSO4·7H2O 0.1 g,K2HPO41 g,橄欖油20 mL,溶于980 mL蒸餾水中)的三角瓶中,置于25 ℃、180 r/min的QYC-2102C型全溫培養(yǎng)搖床(上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司)上培養(yǎng)1~10 d;每天分別取2 mL的3種培養(yǎng)液用12000 r/min的KDC-140HR型高速冷凍離心機(jī)(安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司)離心30 min,取上清液用于測(cè)定酶活性;每處理3個(gè)三角瓶,即重復(fù)3次。蛋白酶活性測(cè)定:以酪蛋白為底物,測(cè)定蛋白酶活性;以失活的蛋白酶溶液作為空白對(duì)照,利用UV-1800PC型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海美譜達(dá)儀器有限公司)測(cè)定各組反應(yīng)混合液在680 nm處的吸光度值;根據(jù)L-酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算各組反應(yīng)混合液的蛋白酶活性,以每分鐘催化分解酪蛋白生成1 μmol酪氨酸的酶量為1個(gè)酶活單位。幾丁質(zhì)酶活性測(cè)定:以膠狀幾丁質(zhì)為底物,測(cè)定幾丁質(zhì)酶活性;以失活的幾丁質(zhì)酶溶液作為空白對(duì)照,測(cè)定各組反應(yīng)混合液在585 nm處的吸光度值,以每分鐘催化分解幾丁質(zhì)生成1 μmol N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為1個(gè)酶活單位;根據(jù)N-乙酰氨基葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算各組反應(yīng)混合液的幾丁質(zhì)酶活性。脂肪酶活性測(cè)定:以對(duì)硝基苯棕櫚酸酯為底物,測(cè)定脂肪酶活性;失活的脂肪酶溶液作為空白對(duì)照,測(cè)定各組反應(yīng)混合液在410 nm處的吸光度值;根據(jù)對(duì)硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算各組反應(yīng)混合液的脂肪酶活性,以每分鐘催化分解脂肪成1 μmol對(duì)硝基苯酚的酶量為1個(gè)酶活單位。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    利用DPS 7.05中的Tukey檢驗(yàn)法分別對(duì)球孢白僵菌BB-T02在不同溫度、光照、碳源和氮源下的菌落直徑和產(chǎn)孢量進(jìn)行多重比較;利用機(jī)率值分析法計(jì)算菌株BB-T02對(duì)2種檢疫性粉蚧的致死中濃度LC50和致死中時(shí)LT50,取實(shí)際累計(jì)死亡率達(dá)50%以上處理的計(jì)算數(shù)值作為有效結(jié)果。利用GraphPad Prism 7繪制菌株BB-T02胞外酶活性的變化趨勢(shì)圖及其他相關(guān)圖片。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 球孢白僵菌BB-T02生物學(xué)特性

    2.1.1 溫度對(duì)菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響 菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢受溫度影響較大。生長(zhǎng)速度以28℃最快,培養(yǎng)10 d后菌落直徑達(dá)4.52 cm,雖與24 ℃差異不顯著,但顯著大于32 ℃;產(chǎn)孢量仍以28 ℃最高,達(dá)2.67×108孢子/cm2,顯著高于其他兩個(gè)處理(圖1A)。

    圖1 菌株BB-T02在不同溫度(A)、光照(B)、炭源(C)和氮源(D)下培養(yǎng)10 d后的菌落直徑和產(chǎn)孢量Fig. 1 Colony diameter and sporulation of strain BB-T02 in different temperatures (A), photoperiods (B), carbon sources (C) and nitrogen sources (D) after ten days cultivation

    2.1.2 光照對(duì)菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響 菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢受光照的影響明顯不同。生長(zhǎng)速度依次為光周期16L:8D、12L:12D和8L:16D,培養(yǎng)10 d后菌落直徑分別在4.58~4.89 cm,但三者間的差異不顯著;產(chǎn)孢量以光周期8L:16D最高,達(dá)3.19×108孢子/cm2,顯著高于其他兩個(gè)處理(圖1B)。

    2.1.3 碳源對(duì)菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響 菌株BB-T02在不同碳源下的生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量差異明顯。生長(zhǎng)速度以麥芽糖最快,培養(yǎng)10 d后菌落直徑達(dá)5.27 cm,顯著大于其他兩個(gè)處理;產(chǎn)孢量仍以麥芽糖最高,達(dá)3.59×108孢子/cm2,雖與蔗糖差異不顯著,但顯著大于葡萄糖(圖1C)。

    2.1.4 氮源對(duì)菌株BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的影響 菌株BB-T02在不同氮源下的生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量明顯不同。生長(zhǎng)速度以牛肉膏和蛋白胨最快,培養(yǎng)10 d后菌落直徑分別達(dá)5.65 cm和5.60 cm,兩者差異不顯著,但均顯著顯著大于NaNO3;產(chǎn)孢量以蛋白胨最高,達(dá)4.22×108孢子/cm2,顯著高于其他兩個(gè)處理(圖1D)。

    2.2 球孢白僵菌BB-T02侵染活性

    2.2.1 致病力 菌株BB-T02能有效侵染南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧(圖2A,B),接菌10 d后的LC50分別為5.00×105孢子/mL和2.17×105孢子/mL(表1);兩種粉蚧雖然在1×104和1×105孢子/mL處理的死亡率均未達(dá) 50%,機(jī)率值分析法計(jì)算出的 LT50均相對(duì)偏大,超出試蟲(chóng)停止死亡的時(shí)間;但在其他 3個(gè)處理的死亡率均有明顯提高,LT50也均隨菌液濃度的升高而縮短,特別是1×108孢子/mL處理濃度的死亡率分別達(dá)85.39%和88.76%(圖2C),LT50分別為5.78 d和5.19 d(表2);對(duì)死亡蟲(chóng)體上的菌株再進(jìn)行分離純化和電子顯微形態(tài)鑒定,發(fā)現(xiàn)再分離菌株的形態(tài)特征與供試菌株[14]一致,確定致病菌株為BB-T02(圖2D)。

    圖2 菌株BB-T02對(duì)南洋臀紋粉蚧(A)和石蒜綿粉蚧(B)的侵染及兩種粉蚧受侵染10 d后的死亡率(C)和再分離菌株形態(tài)特征(D)Fig. 2 P. lilacinus(A) andP. solani(B) infected by strain BB-T02, the mortality of two mealybugs (C) and morphological characteristics of reisolated strain (D) after ten days infection

    表1 侵染10 d后菌株BB-T02對(duì)南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧的LC50Table 1 LC50of strain BB-T02 againstP. lilacinusandP. solaniafter ten days infection

    表2 侵染10 d后菌株BB-T02對(duì)南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧的LT50Table 4 LT50of strain BB-T02 againstP. lilacinusandP. solaniafter ten days infection

    2.2.2 胞外酶活性 菌株BB-T02的3種胞外酶中,蛋白酶的上升和下降幅度均較大,在第5 d到峰值22.68 U/mL,但在第10 d時(shí)仍維持在14.60 U/mL;幾丁質(zhì)酶和脂肪酶活性的變化趨勢(shì)相似,上升和下降幅度則相對(duì)較為平穩(wěn),均在第6 d分別達(dá)到峰值13.19 U/mL和9.77 U/mL,在第10 d時(shí)分別維持在8.76 U/mL和5.19 U/mL(圖3)。

    圖3 菌株BB-T02的胞外酶活性動(dòng)態(tài)Fig. 3 Activities dynamic of extracellular enzymes of strain BB-T02

    3 討論

    蟲(chóng)生真菌是農(nóng)作物害蟲(chóng)的一類重要致病菌[8];球孢白僵菌作為蟲(chóng)生真菌的主要種類之一,已被廣泛用于害蟲(chóng)生物防治[12,13]。菌株的生長(zhǎng)速度及產(chǎn)孢量等生物學(xué)特性是衡量蟲(chóng)生真菌優(yōu)良與否的重要指標(biāo),主要受溫度、光照、碳源和氮源等條件影響,因此明確蟲(chóng)生真菌生長(zhǎng)和產(chǎn)孢最適的條件,獲得菌株最快生長(zhǎng)和最高產(chǎn)孢量,對(duì)蟲(chóng)生真菌的生產(chǎn)和應(yīng)用意義重大[18,19]。球孢白僵菌不同菌株間的生物學(xué)特性存在差異,如錢晶晶等[20]發(fā)現(xiàn)球孢白僵菌 Bb01生長(zhǎng)和產(chǎn)孢最適的溫度為26 ℃;齊永霞等[21]發(fā)現(xiàn)球孢白僵菌Bb06生長(zhǎng)和產(chǎn)孢適宜的碳源為白砂糖、氮源為蛋白胨;劉曉曉等[22]發(fā)現(xiàn)球孢白僵菌B-2生長(zhǎng)和產(chǎn)孢最適的溫度也是26 ℃,但碳源為葡萄糖、氮源為酵母浸出液;而本研究發(fā)現(xiàn)球孢白僵菌 BB-T02生長(zhǎng)和產(chǎn)孢最適的溫度為28 ℃、光周期為8L:16D、碳源為麥芽糖、氮源為蛋白胨,這些差異可能是由于地理和寄主來(lái)源不同所致。

    致病力是衡量蟲(chóng)生真菌生防潛力和應(yīng)用前景的重要指標(biāo)[14,16];本研究發(fā)現(xiàn)球孢白僵菌BB-T02對(duì)南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧雌成蟲(chóng)的侵染致死效果均隨菌液孢子濃度升高而上升,累計(jì)致死率、LC50和 LT50最終分別可達(dá)85.39%和88.76%、5.00×105孢子/mL和2.17×105孢子/mL及5.78 d和5.19 d,與黃鵬等[10,11]利用金龜子綠僵菌F061和FM-03侵染這2種檢疫性粉蚧的效果類似。而蟲(chóng)生真菌在侵染昆蟲(chóng)的過(guò)程中,蛋白酶、幾丁質(zhì)和脂肪酶等胞外酶對(duì)昆蟲(chóng)體壁(主要成分包括蛋白質(zhì)、幾丁質(zhì)和脂肪)的降解具有極其重要的作用,其活性值大小被認(rèn)為是決定菌株毒力的主要因素之一[23-25];本研究發(fā)現(xiàn)球孢白僵菌BB-T02的蛋白酶活性變化幅度較大,到達(dá)峰值的時(shí)間較短,推測(cè)這應(yīng)該是菌株BB-T02能夠有效突破2種檢疫性粉蚧體壁中實(shí)現(xiàn)侵染致死的主要原因;而幾丁質(zhì)酶和脂肪酶活性雖然到達(dá)峰值的時(shí)間稍長(zhǎng),但變化幅度相對(duì)較平穩(wěn),推測(cè)這可能是菌株BB-T02能夠持續(xù)突破和瓦解兩種檢疫性粉蚧體壁的另一個(gè)重要原因??梢?jiàn),球孢白僵菌BB-T02對(duì)南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧中體型最大、體表蠟質(zhì)最厚、取食和為害能力最強(qiáng)的雌成蟲(chóng)具有強(qiáng)的侵染活性,可以預(yù)見(jiàn)該菌株對(duì)兩種粉蚧的若蟲(chóng)和雄成蟲(chóng)也會(huì)具有高致病力,可用于這兩種粉蚧的生物防治;研究結(jié)果豐富了兩種檢疫性粉蚧的生防微生物資源,也推動(dòng)了球孢白僵菌等蟲(chóng)生真菌在粉蚧生防中的應(yīng)用。

    蟲(chóng)生真菌是生物農(nóng)藥的重要組成部分,只有在室內(nèi)和田間對(duì)目標(biāo)害蟲(chóng)均表現(xiàn)出良好侵染效果的菌株,才具有生防應(yīng)用價(jià)值。因此,本研究后續(xù)將進(jìn)一步細(xì)化研究球孢白僵菌BB-T02對(duì)南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧其他蟲(chóng)態(tài)的侵染效果及對(duì)它們生長(zhǎng)、生殖等生物學(xué)特性的影響,驗(yàn)證該菌株對(duì)兩種檢疫性粉蚧的田間防效,探討該菌株的室內(nèi)發(fā)酵方式及繼代培養(yǎng)、保存方法,以開(kāi)發(fā)出相應(yīng)的生防產(chǎn)品,并延緩菌種退化和生防效價(jià)降低的問(wèn)題,為利用蟲(chóng)生真菌防控這兩種檢疫性粉蚧及其他害蟲(chóng)提供技術(shù)支持。

    致謝:本研究采集的南洋臀紋粉蚧和石蒜綿粉蚧承蒙北京林業(yè)大學(xué)武三安教授幫助鑒定,在此深表感謝!

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