淺析進口飼料中沙門氏菌的分離與鑒定

汪霖

【摘要】動物性飼料很容易滋生繁殖細菌，從而引起飼料的腐敗。在飼料的腐敗過程中，不僅飼料的營養(yǎng)價值會降低，腐敗引起的蛋白質(zhì)分解往往會導致沙門氏菌的增長。本文將利用常規(guī)分離培養(yǎng)鑒定技術來檢測進口飼料中沙門氏菌污染情況。

對飼料廠的飼料279份進行沙門氏菌的分離鑒定。共分離出沙門氏菌13株，分離率4.66%。其中配合飼料102份，分離2株，陽性率1.96%；濃縮飼料79份，分離5株，陽性率6.33%；魚粉33份，分離6株，陽性率18.18%；乳清粉65份，分離0株，陽性率0%。最后對24株沙門氏菌進行鑒定。

【關鍵詞】進口飼料；沙門氏菌；分離鑒定

沙門氏菌：沙門氏菌屬是一種寄生于人類和動物腸道內(nèi)，可以引起禽傷寒、豬霍亂、鼠傷寒沙門氏菌病、豬副傷寒、馬流產(chǎn)沙門氏菌等疾病。它是一種需氧或兼性厭氧菌，適合的生長溫度是35～37℃，但不耐熱，55℃的溫度下1h即可以被殺死。在外界的生活力很強，在糞便、土壤、食品中可以存活2個月，更久的能存活2年之久。它對人的致病原理是這樣的，當沙門氏菌進入人體后，經(jīng)淋巴系統(tǒng)進入血液，就會造成過性菌血癥。隨后沙門氏菌裂解釋放出大量的毒素，人就會出現(xiàn)中毒癥狀。同時會引起不同的病理癥狀，比如腸熱癥，即傷寒和副傷寒，繼而可發(fā)展成慢性帶菌者；食物中毒，引起腸胃炎，癥狀如下：惡心、嘔吐、腹瀉、肚痛等；還可以引起慢性腸炎、敗血癥等疾病，危害極大。沙門氏菌的傳播途徑很廣，食品在加工、運輸、出售、烹飪、儲存過程中被其感染的可能性很大。尤其是動物飼料中沙門氏菌的感染情況對全球的肉類加工廠都是很大的隱患。如何減少病菌的感染，成為重中之重。

研究方法：沙門氏菌的檢測方法有很多，有傳統(tǒng)的檢測法、以抗體為基礎的檢測法、以核酸為基礎的方法。每個方法各有各的特點，本文主要以傳統(tǒng)的檢測法來分離鑒定飼料中的沙門氏菌。

1、實驗材料

1.1樣品。配合飼料102份，濃縮飼料，79份魚粉33份，乳清粉65份，每份樣品均100g；1.2培養(yǎng)基。緩沖蛋白胨水前增菌培養(yǎng)基，氯化鎂孔雀綠，亞西酸鹽胱氨酸增菌液，瓊脂，酚紅煌綠瓊脂。1.3生化試機。三糖鐵培養(yǎng)基，微量管，賴氨酸脫羧酶微量管，尿素微量管，V-P和靛基質(zhì)

2、實驗方法

2、1前增菌 無菌稱取25g進口飼料樣品放入盛有225mL緩沖蛋白陳水的無菌試劑瓶中，攪拌均勻。在36攝氏度的環(huán)境下培養(yǎng)18小時。使那些“致傷”的細菌復蘇及使所有微生物生長。2、2增菌 取前增菌液體0.1ml轉種在15ml氯化鎂孔雀綠肉湯內(nèi)，在42攝氏度的環(huán)境下培養(yǎng)24小時。再取15ml轉種在150ml亞酸鹽胱氨酸增菌液中，36攝氏度培養(yǎng)24小時。2、3分離 用接種環(huán)取增菌液1環(huán)，分別劃線接種在酚紅煌綠瓊平板、膽硫乳瓊脂平板和科瑪嘉顯色培養(yǎng)基平板上。36攝氏度下培養(yǎng)24小時。然后對平板上肉眼可見的特征性菌落進行確認，并對該菌落分離物進行一系列生化和血清學檢測，再觀察各個平板上的菌落生長情況，做出鑒定。2、4生化試驗 將純化后的培養(yǎng)物穿刺接種在三糖鐵培養(yǎng)基斜面上。典型的沙門氏菌培養(yǎng)物，斜面呈現(xiàn)紅色，底部是黃色。當分離到乳糖陽性沙門氏菌，呈現(xiàn)黃色。并將培養(yǎng)物接種在L-賴氨酸脫羧、ONP、尿素微量鑒定管及V-P、靛基質(zhì)培養(yǎng)基中，2、5血清學試驗 取載玻片一片，在酒精燈上燒干冷卻后，在玻璃片上滴一滴沙門氏菌血清，再用接種環(huán)挑取單個菌落，與血清研磨成懸液。最后得出如下結果，如表1：

沙門氏菌試驗鑒定標準

2、6血清學鑒定

A-F多價血清菌體實驗結果分類如下：陰性反應：混合物試驗不凝集，在鹽水對照中也不凝集。

結果與分析：共分離出沙門氏菌13株，分離率4.66%。其中配合飼料102份，分離2株，陽性率1.96%；濃縮飼料79份，分離5株，陽性率6.33%；魚粉33份，分離6株，陽性率18.18%；乳清粉65份，分離0株，陽性率0%。如表2

進口飼料中沙門氏菌檢測結果

根據(jù)以上檢測見過來判斷，動物性飼料很容易受沙門氏菌的污染。其中尤其以魚粉受污染的情況最嚴重，濃縮飼料其次。分析原因是因為魚粉中富含鈣、磷等礦物質(zhì)，而這些物質(zhì)恰好也是沙門氏菌的賴以生存的食物來源。而國家明確規(guī)定飼料中不得檢出沙門氏菌，而因沙門氏菌感染飼料導致禽畜大量死亡的事件已經(jīng)報道很多，給畜牧業(yè)及國家經(jīng)濟帶來了巨大的損失，因此要嚴格把控飼料的安全性。

結論

隨著對外貿(mào)易的不斷發(fā)展，動物性飼料的進口數(shù)量日益增加，出入境檢疫部門嚴格把關，加強進口動物飼料的沙門氏菌監(jiān)測，對防治國外沙門氏菌感染的傳入，保護國內(nèi)的人畜健康有著十分重要的意義。相關政府部門也應嚴格立法、執(zhí)法，保證良好的飼料生產(chǎn)環(huán)境、運輸環(huán)境。凡是發(fā)現(xiàn)不合規(guī)的飼料加工廠，應立即采取相應的措施，第一要禁止被污染的飼料被不法分子以低價在市場上流通；第二要強制企業(yè)工廠改造生產(chǎn)環(huán)境；第三要立法重罰不良企業(yè)。而相關企業(yè)要以持續(xù)發(fā)展為戰(zhàn)略，不能貪圖一時利益，保證飼料的安全。而購買飼料的群眾，要掌握現(xiàn)代知識，學會鑒別好的飼料，要勇敢的對不良企業(yè)說不。而對于肉類的直接消費者，更要明白沙門氏菌的危害性。要正確處理以動物為源頭的食物。第一要徹底煮熟肉類視頻，第二生和熟的食物要分開處理，第三要保持廚房的干凈整潔。

參考文獻

[1]張艷紅，吳延功，杜元釗，等.沙門氏菌快速檢測方法研究進展[J].動物醫(yī)學進展，2001，22（2）：39-41