藍莓花青素的提取及分離研究進展

徐　青，　周元敬，　黃　筑，　聶　飛，　高貴龍

（1．貴州科學(xué)院 貴州省生物研究所，貴州 貴陽 550009；2.貴州科學(xué)院 貴州省分析測試研究院，貴州 貴陽550002）

藍莓花青素的提取及分離研究進展

徐青1，周元敬2，黃筑1，聶飛1，高貴龍1

（1．貴州科學(xué)院 貴州省生物研究所，貴州 貴陽 550009；2.貴州科學(xué)院 貴州省分析測試研究院，貴州 貴陽550002）

藍莓花青素是藍莓的主要活性成分，具有多種生物活性，在食品、醫(yī)藥、化妝品、保健品等方面有著廣闊的應(yīng)用前景。近年來，有關(guān)藍莓花青素的提取分離已獲得深入廣泛的研究。作者總結(jié)了目前藍莓花青素提取和分離的技術(shù)方法，展望了其發(fā)展的趨勢，旨在為藍莓花青素的進一步開發(fā)利用和工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。

藍莓花青素；提?。环蛛x

藍莓（Blueberry）屬多年生灌木小漿果，主要可分為高叢（V.corymbosum）、半高叢（V.angustifolium X V.corymbosum）、矮叢（V.angustifolium）和兔眼（V.ashei）四大種類，共有約450個品種，含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，被世界糧農(nóng)組織推薦為繼蘋果和柑桔之后的“世界第三代水果”。藍莓中的花青素是其主要的生物活性物質(zhì)，具有防止腦神經(jīng)老化、保護視力、強心、抗癌、軟化血管、增強人體免疫機能等多種生理活性功能［1-8］。

花青素（Anthocyanidins）又稱花色素，是一種非常重要的植物水溶性色素，屬黃酮類化合物，多以糖苷的形式存在，故也稱花色苷（Anthocyanins）［9］。研究證明花青素是當今人類發(fā)現(xiàn)最有效的天然抗氧化生物活性劑，被稱為“口服的皮膚化妝品”，其抗氧化性能比維生素E高出50倍，比維生素C高出200倍，且對人體的生物有效性是100%［10］。藍莓中的花青素不僅含量高，而且種類豐富，所以對藍莓中花青素的提取分離已成為目前國內(nèi)外研究的熱點。作者綜述了藍莓花青素提取分離的技術(shù)方法，展望了其發(fā)展趨勢，旨在為藍莓花青素的進一步開發(fā)利用和工業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù)。

1　藍莓花青素的提取方法

花青素的提取是其投入生產(chǎn)和使用的前提，由于其活性較高，在提取過程中易氧化變質(zhì)，所以對花青素的提取具有較高的技術(shù)要求，相關(guān)的研究報道很多，除了常規(guī)的溶劑提取外，近年來一些新的提取技術(shù)也得到了較快發(fā)展，如微波輔助提?。?1］、加壓溶劑萃取 （pressurized solvent extraction，PSE）［12］、超高壓 輔 助 提?。╡xtraction assisted by high hydrostatic pressure）［13］、高壓脈沖電場輔助提取（extraction assisted by pulsed electric field，PEF）［14］、亞臨界水提取技術(shù)（subcritical water extraction，SWE）［15］、超臨界流體萃取（supercritical fluid extract，SFE）［16］等。而針對藍莓果實的特殊結(jié)構(gòu)和組成成分，目前藍莓花青素的提取技術(shù)方法主要有溶劑提取、酶提取、微波輔助提取、超聲輔助提取和聯(lián)合提取技術(shù)等。

1.1溶劑提取

溶劑提取法是藍莓花青素的常規(guī)提取方法，也是報道最多的方法之一，可對藍莓鮮果、凍干果、藍莓粉或藍莓果皮通過浸泡后再萃?。?7-35］。

由于花青素是水溶性的黃酮類化合物，提取溶劑可選擇醇、丙酮、水等強極性溶劑或者它們的混合溶劑。為了防止提取過程中非酰基化的花青素降解，常在提取溶劑中加入一定濃度的酸。Barnes等［17］研究發(fā)現(xiàn)，乙醇、丙酮、甲醇是提取藍莓花青素最有效的溶劑，三氟乙酸和鹽酸是最適宜的酸化劑，但在濃縮過程中這些酸會導(dǎo)致?；幕ㄇ嗨厮猓?6］。Lee等［18］用蒸餾水中加檸檬酸、SO2和加熱相結(jié)合的方法對藍莓果和藍莓果皮中花色苷進行了提取，在80℃、50μg/g的SO2和1%檸檬酸條件下，藍莓果可以得到 102.2 mg/100g的花色苷，在 50℃、100μg/g的SO2和1%檸檬酸條件下，藍莓果皮可以得到504.5mg/100 g的花色苷。為了提高花青素的收率，可在采摘和提取過程中降低多酚氧化酶的活性。Moyer等［19］在鮮果采摘后即采取冷凍措施，并利用液氮來完成果實破碎過程，用丙酮提取，得到的花青素含量高于其他方法。

國內(nèi)對藍莓花青素的溶劑提取方法進行了大量的研究，主要針對2個方面的技術(shù)：1）提取液的選取和配比；2）提取過程的參數(shù)優(yōu)化。在提取液的選取和配比方面，典型的研究如李穎暢等［20］從幾種提取劑（蒸餾水、酸溶液、乙醇-酸溶液等）中篩選出乙醇為藍莓果花色苷較好的提取溶劑，用60%的乙醇（pH 3）按1 g∶15 mL的料液比，40℃提取2 h，提取2次得到花青素的含量約為358 mg/100 g鮮果。石光等［26］以人工栽培藍莓果為原料，從不同的溶劑體系中，篩選出80%的甲醇（pH 2）為最佳提取劑，按1 g∶15mL的料液比，40℃提取1 h，提取2次得到藍莓花青素的提取率為78.2%。

對藍莓花青素溶劑提取方法的提取過程參數(shù)優(yōu)化方面的研究較多，如丁九斤等［27］研究了越橘花色苷的醋酸溶液提取工藝，發(fā)現(xiàn)越橘花色苷提取工藝為醋酸濃度20%按 1∶10（g∶mL）的料液比，在40℃提取60 min，提取2次可得到92.8%的提取率。姜艷霞等［31］運用正交實驗法以95%乙醇-鹽酸（pH 3.0）為溶劑提取長白山區(qū)野生越橘中花色苷，得出1 g∶5 mL的料液比，在60℃下提取30 min，提取3次，得到的花色苷純度可達到8.64%。孟憲軍等［34］采用酸性乙醇為提取劑，采用響應(yīng)面分析優(yōu)化各因素及其相互作用的最佳組合，得出最佳提取參數(shù)為：60.65%乙醇，pH 3.0，料液比1 g∶20.65 mL，提取時間122.53min，提取溫度50℃，提取2次，得到藍莓凍果花色苷含量約為327.35 mg/100 g。馬養(yǎng)民和逯文靜［35］采用單因素試驗和正交實驗研究藍莓果中花青素的乙醇提取最佳工藝條件為：60%的乙醇溶液（pH 1.0）按1 g∶15 mL的料液比，在50℃提取2 h得到花青素的提取量為2.18 g/L。

在藍莓花青素的溶劑提取中，由于藍莓品種、產(chǎn)地、采收季節(jié)、提取部位等的不同，采用的提取參數(shù)也各異，但總體上綜合上述實驗數(shù)據(jù)可得：1）由于鹽酸的酸性較強，所以酸化劑通常選用乙酸或檸檬酸，溶劑則以乙醇為主；2）萃取體系的酸度一般為pH 2～4，酸性太強會破壞花色苷結(jié)構(gòu)，酸性太弱花色苷本身又不穩(wěn)定；3）溶劑使用量通常保持在1 g∶10～20mL的料液比，萃取時間1～2 h為宜，萃取兩次較好，萃取次數(shù)太多，萃取液雜質(zhì)較多。

雖說溶劑提取法有利（方法原理簡單，對設(shè)備要求較低）有弊（有機溶劑具有一定的毒副作用，存在安全隱患，提取率低），但是科研工作者，特別是國內(nèi)科研工作者對該方法還是情有獨鐘，他們也盡力采取措施規(guī)避不利的因素，并盡量利用一些現(xiàn)代化的分析優(yōu)化方法來提高提取率。

1.2酶提取

由于花青素大部分存在于藍莓果皮中，通過簡單的溶劑萃取是難以最大限度地將其提取出來的［37］。酶水解可以較溫和地將植物組織分解，加速有效成分的釋放，從而提高天然植物成分的提取率。向道麗［38］首次報道用纖維素酶提取越桔果渣花色苷，并與傳統(tǒng)乙醇提取的方法進行比較，得出酶法提取工藝比乙醇浸提越桔果渣花色苷色價提高了30%。石文娟等［39］通過L16（44）正交試驗優(yōu)化纖維素酶提取長白山野生篤斯越桔中花青素的工藝條件，得出加酶量2%，按1 g∶50 mL的料液比，在pH 1.5，溫度60℃下酶解1 h，花青素提取率為6.105%。李穎暢等［40］比較了纖維素酶、果膠酶及二者的復(fù)合對藍莓果中花色苷的提取效果，發(fā)現(xiàn)纖維素酶的提取效果較好。在酶用量5 mg/g，料液比1 g∶8 mL，pH 5.0，提取1 h，酶解溫度45℃，提取兩次的優(yōu)化條件下，藍莓果中花色苷含量約為350 mg/100 g鮮果。馬永強等［41］比較了纖維素酶、果膠酶以及復(fù)合果汁酶對藍莓果漿的酶解效果，確定果汁酶具有最佳的提高花色苷溶出率的能力。在酶添加量0.2 g/L，酶解溫度60℃，酶解時間1 h的優(yōu)化條件下，酶解得到的藍莓果清汁中花色苷質(zhì)量濃度達到410 mg/L，花色苷的提取率達到14.1%，較未經(jīng)酶處理藍莓果清汁中花色苷的提取率提高了2.17倍。王谷媛等［42］用RAPIDASE RINTENSE果膠酶來提高藍莓果的出汁率，并用70%的乙醇浸提，得到藍莓花青素的得率為4.8%。

酶提取藍莓花色苷法因其具有條件溫和、酶用量少、提取率高等優(yōu)點，一經(jīng)提出就受到廣大研究者的青睞。但由于生物酶的專一性較強，現(xiàn)有針對藍莓花青素的酶種數(shù)量較少，而且價格較貴，使得提取成本較高，況且酶提取法的技術(shù)要求較高，而目前相關(guān)的研究還比較少，所以酶法提取藍莓花青素在工業(yè)化生產(chǎn)中的應(yīng)用受到很大限制。就現(xiàn)有的研究來看，用于藍莓花青素提取的酶，效果較好的是纖維素酶，較優(yōu)的工藝參數(shù)為：提取料液比1 g∶8～10mL，pH 4～5，酶解溫度45～55℃，酶解時間1～2 h。

1.3微波輔助提取法

微波輔助提取是利用微波輻射，使植物細胞內(nèi)的極性物質(zhì)吸收大量微波能，進而產(chǎn)生大量熱量，使細胞內(nèi)的溫度迅速上升，液態(tài)水汽化時產(chǎn)生的壓力會沖破細胞膜和細胞壁，表面出現(xiàn)微小的孔洞；進一步加熱，會使細胞內(nèi)部和細胞壁水分減少，導(dǎo)致細胞收縮，表面出現(xiàn)裂紋?？锥春土鸭y的出現(xiàn)使胞外溶劑容易進入細胞內(nèi)，溶解并釋放出胞內(nèi)產(chǎn)物，從而有利于提取過程的進行。

呂春茂等［43］運用微波輔助提取法對越橘果實花色苷進行提取，以含鹽酸1%的乙醇溶液為提取劑，結(jié)合單因素試驗和響應(yīng)面法，得出越橘果實花色苷的最佳提取工藝條件為微波功率500W、提取時間7 min、乙醇體積分數(shù)55%、溫度51℃。在最優(yōu)工藝條件下，越橘果實花色苷的提取量為1.47 mg/g。Zheng等［44］研究了微波輔助提取藍莓粉花青素的特征和最佳參數(shù)，發(fā)現(xiàn)料液比對花青素的動力學(xué)提取是最重要的，其次是乙醇體積分數(shù)、提取溫度，影響最小的是提取時間。在提取時間為7 min，提取溫度為47℃，乙醇體積分數(shù)為55.5%，料液比為1 g∶34 mL的條件下，得到73.73%的花色苷。朱文赫等［45］以長白山篤斯越橘為原料，分別采用酸性乙醇法、超聲提取法及微波提取法提取花色苷，通過結(jié)果比較分析，得到以微波提取工藝結(jié)果最佳，在微波提取功率為100 W，提取時間為60 s，料液比為1 g∶5mL的微波提取條件下，花色苷的產(chǎn)量達到了0.402 mg/g（濕重），較酸性乙醇法（0.298 mg/g）及微波提取法（0.316 mg/g）得到的產(chǎn)量顯著提高。

微波法具有對植物細胞破壁能力強、提取效率高、操作簡便等特點，在實際生產(chǎn)過程中又具有安全、節(jié)能的優(yōu)點，所以將微波技術(shù)應(yīng)用于藍莓花青素的浸取過程中，可在一定條件下提高產(chǎn)物收率，降低生產(chǎn)成本，在工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用越來越廣泛。

1.4超聲波輔助提取法

超聲波提取法是采用超聲波輔助溶劑進行提取，通過超聲波產(chǎn)生高速、強烈的空化效應(yīng)和攪拌作用破壞植物藥材的細胞，使溶劑滲透到藥材細胞中，可縮短提取時間，提高提取率。近年來，超聲波提取法的應(yīng)用越來越廣泛，已經(jīng)成為美國環(huán)保局提取植物中有效成分的基本方法之一，已在天然植物研究中得到高度重視。

在藍莓花青素的提取方面，超聲波輔助提取法也得到了一定的應(yīng)用［46-51］。如郝文博等［46］利用響應(yīng)面分析法對藍莓花青素的提取工藝進行了優(yōu)化。在單因素試驗基礎(chǔ)上選取試驗因素與水平，根據(jù)中心組合（Box-Behnken）試驗設(shè)計原理，采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法對各個因素的顯著性和交互作用進行分析。結(jié)果表明，藍莓花青素提取的最佳工藝條件為超聲功率640 W、超聲時間15 min、料液比1 g∶30mL、乙醇體積分數(shù)63%。采用最佳工藝參數(shù)提取藍莓中花青素，平均得率為6.51%，與響應(yīng)面分析法優(yōu)化花青素得率預(yù)測值6.52%接近。孟憲軍等［48］利用響應(yīng)面法對超聲波提取藍莓花色苷的工藝進行優(yōu)化，得出在52.28%乙醇中，39.27℃提取37.17 min，提取2次得到藍莓凍果花色苷含量約為335.95mg/100 g。

超聲波和微波法提取法在思路上基本是一致的，都是借助外界較強的能量來破碎植物細胞，使細胞內(nèi)的汁液迅速釋放從而提高提取效率，只是兩種方法破碎植物細胞的方式不同而已。它們都具有提取時間短、提取效率高、適用范圍廣、節(jié)能環(huán)保等優(yōu)點，但同時又都有各自的缺點使其應(yīng)用受到一定的限制。微波法在提取過程中如操作不當易造成局部過熱而使藍莓花青素氧化降解，而且微波法對提取容器的要求較高，一般的金屬容器不能滿足微波的要求。超聲波提取法受超聲波衰減因素的制約，超聲有效作用區(qū)域不均一，在容器壁附件會形成超聲空白區(qū)，且超聲輸出功率較大，一般設(shè)備難以滿足。

1.5聯(lián)合提取技術(shù)

由以上結(jié)果可知，傳統(tǒng)的醇水提取法在藍莓花青素的提取中應(yīng)用普遍，但仍有提高潛力，而酶法、超聲波提取、微波輔助提取等方法目前在生產(chǎn)中應(yīng)用還不廣泛，但隨著這些技術(shù)的成熟，多種提取方法的聯(lián)合使用已成為一種發(fā)展趨勢。趙爾豐等［52］以藍莓果渣為原料，采用單因素試驗法對提取工藝條件進行優(yōu)化，確定了酶-超聲波輔助提取藍莓果渣中花青素的最佳工藝條件為：先用5mg/g的纖維素酶，按1 g∶10 mL的料液比，在200 W超聲波中50℃振蕩培養(yǎng)提取20min，然后補充加入乙醇，使得體系中乙醇體積分數(shù)為40%，再在超聲波下強化提取10min，可得到4.12%的提取率。

聯(lián)合提取技術(shù)是以溶劑提取為基礎(chǔ)，聯(lián)合酶法、微波或超聲波法為輔助手段，集成各種方法的優(yōu)點，同時可有效彌補各種方法的不足之處，其優(yōu)勢遠遠強于單一的提取技術(shù)。鑒于花青素主要存在于藍莓果皮中［37］，纖維素酶、果膠酶可以降解纖維素和果膠，破壞細胞壁，從而可使花青素得到充分釋放；藍莓色素在油脂中溶解度小，在甲醇和乙醇中溶解度大，甲醇有毒性，而乙醇既安全無毒又對藍莓花青素有很好的萃取效果；用檸檬酸代替鹽酸來調(diào)節(jié)提取液的pH值，可防止花青素的降解。我們前期的研究表明［53］，將藍莓鮮果在室溫下噴灑0.02%的纖維素酶和果膠酶形成的復(fù)合酶，避光保存2～3 h后，按料液比1∶10加入pH 3.0的檸檬酸和乙醇，攪拌2 h，萃取兩次，濾液減壓濃縮，得到的粗提物經(jīng)分離純化，最后所得藍莓花色苷的提取率達到20%以上，比目前文獻報道的提取率高8%左右，這種聯(lián)合提取藍莓花青素的技術(shù)預(yù)測將有很好的工業(yè)化生產(chǎn)前景。

2　藍莓花青素的分離

提取后的花青素溶液中，還含有很多淀粉、果膠、糖類等雜質(zhì)，產(chǎn)品色價低，穩(wěn)定性差，很難對其進行鑒定和長期儲存，所以需要進行分離純化。目前，花青素的純化多采用大孔樹脂法、液相萃取法、固相萃取法、柱層析、離子交換法和綜合技術(shù)法等。其中大孔樹脂吸附是近年來最常用的花青素提純方法之一，而新的純化方法例如高速逆流色譜、電泳法還處于起步發(fā)展階段。對于藍莓花青素的提取，報道的方法有大孔樹脂法、高速逆流色譜法和綜合技術(shù)法。

2.1大孔樹脂法

大孔樹脂法是利用吸附解吸原理對有效成分進行分離的一種方法，常用的填料除了大孔樹脂外，還有硅膠、聚酰胺、葡聚糖凝膠等。該方法分離過程易于控制，并且樹脂洗脫后可反復(fù)使用，節(jié)約成本，已在藍莓花青素的分離中得到廣泛應(yīng)用［54-63］。

AB-8型大孔吸附樹脂是苯乙烯型弱極性共聚體，最適宜水溶性、具有弱極性物質(zhì)的提取、分離、純化，在藍莓花色苷的純化方面得到了廣泛的研究［54-58］。如孟憲軍、李穎暢等利用AB-8大孔樹脂對藍莓果花色苷進行純化，經(jīng)過純化花色苷的色價達到54.10，產(chǎn)率為88.20%［54，56］。鄒陽等［57］對提取的藍莓花色苷粗制品進行AB-8大孔樹脂純化，色價高達175，是國際色素色價的40多倍。黃月鵬等［57］通過實驗發(fā)現(xiàn)當花色苷溶液的流速為10 mL/min，樣品量為樹脂量的1/3 BV時，AB-8樹脂對花色苷的吸附效果最好，當用流速為5 mL/min的40%乙醇洗脫時，洗脫效果最好，得到花色苷的純度為38.1%。

為了尋找到更好的純化條件，盡可能地提高花色苷的色價和回收率，各種各樣的樹脂填充料對花色苷的純化研究相繼得到報道。如董怡等［29］分別采用AB-8大孔樹脂、聚酰胺樹脂及AB-8大孔樹脂與聚酰胺樹脂聯(lián)用3種方法對篤斯越橘花青素提取液進行純化，純度分別為13.4%、37%、13.2%?？梢钥闯?，用聚酰胺樹脂純化后的花青素純度明顯高于用AB-8大孔樹脂及其聯(lián)合純化的花青素純度，純度提高了23%。趙彥杰［59］以高灌藍莓果為原料，研究了D101-A、D101-C等幾種樹脂對藍莓果色素的分離效果，發(fā)現(xiàn)D101-A樹脂的效果較好，用60%乙醇洗脫100 min得到的產(chǎn)品質(zhì)量較好，色價達42，產(chǎn)品收率為0.256%；且D101-A樹脂重復(fù)使用20次后吸附率僅降低1.24%。權(quán)靜等［60］研究了HPD-500、NKA-2等6種樹脂對藍莓粗提液的分離效果，發(fā)現(xiàn)NKA-2樹脂的效果最好，70%乙醇洗脫得到紫黑色粉末，色價達57.82。呂春茂等［61］優(yōu)化得到HPD-700型大孔樹脂對野生越橘花色苷的分離效果最佳，以60%乙醇洗脫可得到紫黑色粉末，色價為62.40，回收率為86.20%。趙慧芳等［62］對用0.5%HCl的50%乙醇溶液提取得到的藍莓色素粗提物進行大孔樹脂純化，得到HPD-100B或LS-305樹脂為最優(yōu)的樹脂，其中HPD-100B樹脂至少可重復(fù)利用7次，得到藍莓總花色苷含量14.77%，提取率為81.3%。鄭紅巖等［63］以藍莓果提取液為原料，發(fā)現(xiàn)經(jīng)XDA-7樹脂純化冷凍干燥所得產(chǎn)品為紫黑色粉末，花色苷純度由2.20%提高到24.54%，花色苷得率為70.2%，產(chǎn)品色價為121。

根據(jù)藍莓花色苷的特性，結(jié)合大孔樹脂的性質(zhì)，對不同品種的藍莓進行花色苷分離純化時，國內(nèi)一般選擇的是用大孔樹脂法，用得較好的是AB-8大孔樹脂、聚酰胺樹脂等，花色苷的純度可達到38.1%。

2.2高速逆流色譜法

高速逆流色譜法是一種無載體的液液分配色譜，在分離柱體內(nèi)不加入任何固態(tài)載體或支持體，因而完全排除了載體對分離過程的影響，在色譜過程中，樣品在一對互不混溶（或很少混溶）的溶劑相中分配、傳遞，各組分依據(jù)它在這兩相中的分配系數(shù)的差異實現(xiàn)分離。Du等［64］用一臺柱容量364 mL（PC.Inc，柱內(nèi)徑2.6mm）的高速逆流色譜儀分離了越橘（Vaccinium myrtillus）中的花色苷，所用溶劑系統(tǒng)是甲基叔丁基醚-正丁醇-乙腈-水-三氟乙酸，體積比為1∶4∶1∶5∶0.01，流速為1.5 mL/min。進樣500 mg越橘的花色苷粗提取物可分離得到130 mg飛燕草色素-3-O-β-d-葡萄糖-（2→1）-β-d-木糖苷和77 mg矢車菊色素-3-O-β-d-葡萄糖-（2→1）-β-d-木糖苷。

由于目前利用高速逆流色譜法分離藍莓花色苷的研究較少，報道的方法中用到的分離溶劑成份復(fù)雜且昂貴，因此該方法有待進一步研究開發(fā)。

2.3聯(lián)合分離技術(shù)

目前，聯(lián)合的分離技術(shù)也開始慢慢地應(yīng)用到藍莓花青素的分離純化中。如張亞紅［65］采用D101大孔樹脂和相對分子質(zhì)量6 000的超濾膜純化技術(shù)對野生藍莓花青素進行純化，花青素純度可達35%以上。

由于提取后的藍莓花青素溶液中，還含有大量的淀粉、果膠、糖類等雜質(zhì)，直接大孔樹脂層析，既浪費時間精力、又增加了生產(chǎn)成本，同時還會使花青素大量地流失。我們前期的研究表明［53，66］，將藍莓花青素粗提物溶解于適量的pH 3.5的檸檬酸溶液中，用乙酸乙酯萃取3次，非脂層加入到D101大孔樹脂柱中，先用超純水洗脫，再用乙醇-水體系洗脫，收集50%的乙醇洗脫液，減壓濃縮，冷凍干燥，得到的藍莓花青素采用2%鹽酸-乙醇降解法，利用紫外分光光度計測得花青素含量高達49%以上，比目前文獻報道的花青素純度高將近10%，而且利用化學(xué)修飾的方法可以有效增強藍莓花青素的抗氧化性能，將具有很好地工業(yè)化生產(chǎn)前景。

3　展望

花青素作為一種天然水溶性食用色素，不僅色澤鮮艷、安全、無毒，而且還具有很好的營養(yǎng)和保健功效，在食品、化妝品、醫(yī)藥等方面已顯示出巨大的應(yīng)用潛力。藍莓作為花青素含量最豐富的資源之一，研究其提取分離和開發(fā)利用具有重要的意義。雖說目前在藍莓花青素的提取分離及應(yīng)用方面的研究已取得了很大的進展，但隨著人們生活水平的提高，對天然產(chǎn)品的需求量越來越大，天然的花青素在食品、化妝品、保健品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的應(yīng)用日益廣泛，探尋新的高效、快速、方便的提取分離方法，能夠適合大規(guī)模生產(chǎn)的提取分離技術(shù)顯得極為重要。國外市場花青素提取物高端產(chǎn)品的含量可以達到40%左右，可作為制藥原料，其提取技術(shù)一直為少數(shù)廠家所壟斷。然而我國高效、快速的提取分離綜合技術(shù)還處于初級研究階段，大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)也還有很長的路要走，這些都需要廣大學(xué)者進一步地努力。

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科技信息

歐盟批準大腸桿菌產(chǎn)蘇氨酸作為動物飼料添加劑

2016年7月27日，據(jù)歐盟網(wǎng)站消息，歐盟委員會發(fā)布 （EU）2016/1220實施條例，批準大腸桿菌產(chǎn)蘇氨酸（L-threonine）作為動物飼料添加劑。本次新批準的蘇氨酸屬于“營養(yǎng)添加劑”，功能分組上屬于“氨基酸，及其鹽與類似物”。

按照新規(guī)定，蘇氨酸可以作為預(yù)混添加劑的一種配料，飼料經(jīng)營業(yè)者應(yīng)該為使用者制定操作規(guī)程，以及相關(guān)措施告知操作者潛在的風(fēng)險。

蘇氨酸可用于動物的飲用水中。飼料及其預(yù)混物產(chǎn)品標簽應(yīng)該標注“如果用于動物飲用水，那么需避免蛋白過剩”。

88/485/EEC指令批準的蘇氨酸以及含蘇氨酸的預(yù)混物可以在2017年5月16日之前按照有關(guān)條例繼續(xù)在市場銷售，直至庫存耗完為止。

用于產(chǎn)肉動物的飼料產(chǎn)品可以按照有關(guān)條例在2017年8月16日之前繼續(xù)在市場銷售，直至庫存耗完為止。用于非產(chǎn)肉動物的飼料產(chǎn)品可以按照有關(guān)條例在2018年8月16日之前繼續(xù)在市場銷售，直至庫存耗完為止。

新條例自發(fā)布后第20日起生效。

［信息來源］食品伙伴網(wǎng).歐盟批準大腸桿菌產(chǎn)蘇氨酸作為動物飼料添加劑 ［EB/OL］.（2016-7-28）.http://news. foodmate.net/2016/07/389171.html

Extraction and Separation of Blueberry Anthocyanins

XU Qing1，ZHOU Yuanjing2，HUANG Zhu1，NIE Fei1，GAOGuilong1
（1.Institute of Biology，Guizhou Academy of Sciences，Guiyang 550009，China；2.Center for Physico-Chemical Test and Analysis，Guizhou Academy of Sciences，Guiyang 550002，China）

Blueberry anthocyanins are themajor active ingredients of blueberry w ith a variety of biological activities and w idely used in the fields of food，medicine，cosmetics，and so on.The deep investigation of their extraction，separation，and purification has been made in recent years and this article reviewed the advance.The research status of blueberry anthocyanins was summerized and prospected.Thiswork would provide reference for further application and industrial production of blueberry anthocyanins.

blueberry anthocyanins，extraction，separation

TS 202.3

A

1673—1689（2016）09—0897—10

2015-06-20

貴州省自然科學(xué)基金重點項目（黔科合JZ字［2015］2006號）；貴州省科技計劃項目（黔科農(nóng)G字［2013］4006號）；貴州科學(xué)院青年基金重點項目（黔科院J合字［2014］01號）。

徐 青（1980—），女，湖北隨州人，工學(xué)博士，副研究員，博士后，主要從事生物資源開發(fā)利用方面的研究。E-mail：xqhaoy@163.com

高貴龍（1958—），男，貴州安龍人，農(nóng)學(xué)碩士，研究員，碩士研究生導(dǎo)師，主要從事農(nóng)作物開發(fā)利用方面的研究。E-mail：gd8298123@126.com