珠海生產(chǎn)太子參質(zhì)量的初步評(píng)價(jià)

莫鎮(zhèn)濤， 葉仕超， 申承廷

(遵義醫(yī)學(xué)院 珠海校區(qū)， 廣東 珠海 519041)

珠海生產(chǎn)太子參質(zhì)量的初步評(píng)價(jià)

莫鎮(zhèn)濤， 葉仕超， 申承廷

(遵義醫(yī)學(xué)院 珠海校區(qū)， 廣東 珠海 519041)

為初步評(píng)價(jià)太子參在珠海生產(chǎn)的可能性，測(cè)定了珠海生產(chǎn)太子參的總灰分含量、水溶性浸出物和環(huán)肽B含量。結(jié)果表明：珠海太子參藥材薄層色譜鑒別與標(biāo)準(zhǔn)藥材一致，水分含量為8.4%、總灰分為2.3%、水溶性浸出物為45.6%，符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；太子參中環(huán)肽B的含量為0.0167%，且與其他產(chǎn)地太子參藥材差異不大。結(jié)論：珠海生產(chǎn)太子參符合《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版的相關(guān)要求，太子參在珠海種植具有一定的發(fā)展空間。

太子參； 質(zhì)量評(píng)價(jià)； 薄層色譜； 水溶性浸出物； 珠海

太子參也叫孩兒參，為石竹科植物孩兒參的干燥塊根[1],具有益氣健脾、生津潤(rùn)肺的療效，與人參比較，其補(bǔ)氣力度平和，具有扶正但不戀邪的優(yōu)點(diǎn)，特別適合氣陰兩虛體質(zhì)的人使用。南方地區(qū)氣候濕熱時(shí)間較長(zhǎng)，容易耗傷氣陰，太子參的需要量大，市售價(jià)格較高，10 g價(jià)格在3元以上。因此推廣太子參種植能帶來(lái)較大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益。太子參喜愛(ài)溫和、濕潤(rùn)、涼爽的氣候，生長(zhǎng)于疏松肥沃、腐殖質(zhì)豐富的砂壤田土，或略帶傾斜的向北山坡旱地[2]。珠海屬于亞熱帶季風(fēng)海洋性氣候，具有冬無(wú)嚴(yán)寒，夏無(wú)酷熱，溫暖濕潤(rùn)的氣候特點(diǎn),具有較為適宜太子參生長(zhǎng)的條件。珠海市丘陵面積占市陸地面積的58.68%，具有較多腐殖質(zhì)豐富的旱坡地，目前未見(jiàn)珠海種植太子參的報(bào)道。因此，筆者將貴州太子參種苗引種到珠海栽種，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版中太子參相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，初步評(píng)價(jià)太子參在珠海生產(chǎn)的可能性。

1 材料與方法

1.1 材料

儀器：LC-20AD型高效液相色譜儀(日本島津)，Multivapor P-6型平行蒸發(fā)儀(瑞士步琦有限公司BUCHI)，SRJX型馬弗爐(上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司)，TS-2000A型搖床(海門市其林貝爾儀器制造有限公司)，JOYN-6240A型超聲波清洗器(上海喬躍電子有限公司)，420型三用水箱(常州澳華儀器有限公司)，Sartorius BSA124S電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)，XMTD-8222型烘箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。

試藥：太子參種源來(lái)自貴州，取常規(guī)方法種植于珠海的太子參備用。太子參藥材分別來(lái)自貴州、江蘇和福建，生產(chǎn)企業(yè)和批號(hào)分別是：藥圣堂制藥有限公司，批號(hào)140301；蘇州市天靈中藥飲片有限公司，批號(hào)130325；康美藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)140503301；太子參對(duì)照藥材來(lái)自中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)121004。甲醇(分析純)購(gòu)于天津市富宇精細(xì)化工有限公司，正丁醇(分析純)購(gòu)于汕頭市光華化工廠，冰醋酸(分析純)購(gòu)于天津市大茂化學(xué)試劑廠，乙腈(HPLC級(jí))購(gòu)于美國(guó)天地有限公司(TEDIA)，純凈水購(gòu)于華潤(rùn)怡寶飲料(中國(guó))有限公司，水合茚三酮(分析純)購(gòu)于天津市永大化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心，95%乙醇(分析純)購(gòu)于天津市大茂化學(xué)試劑廠。

1.2 薄層色譜(TLC)鑒別

分別取珠海、江蘇、貴州、福建組太子參藥材適量于烘箱60℃烘3 h，取出后打粉，過(guò)二號(hào)篩。分別用電子天平稱取藥材粉末1 g，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版附錄VIB的TLC法進(jìn)行鑒別。

1.3 水分、總灰分及水溶性浸出物測(cè)定

1.3.1 水分 取各組樣品粉末2 g，每種樣品制兩份，精密稱定，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版附錄IX H第一法(烘干法)進(jìn)行測(cè)定。

1.3.2 總灰分 稱取各樣品粉末2 g，每種樣品制2份，精密稱定，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版附錄IX K中的總灰分測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定。

1.3.3 水溶性浸出物 取各樣品粉末4 g，每種樣品制2份，精密稱定，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版附錄IX K中的冷浸法進(jìn)行測(cè)定。

1.4 環(huán)肽B含量的測(cè)定

1.4.1 供試品溶液的制備 分別稱取各組樣品粉末(過(guò)4號(hào)篩)2 g，精密稱定，用移液管精密加入甲醇50 mL，稱定重量，超聲處理(功率240 W，頻率40 KHz)45 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾紙濾過(guò)，用移液管精密量取續(xù)濾液25 mL，置平行蒸發(fā)儀中，濃縮至干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

1.4.2 標(biāo)準(zhǔn)品貯備液的制備 精密稱定太子參環(huán)肽B標(biāo)準(zhǔn)品8.8 mg，用甲醇定容至10 mL量瓶中作為標(biāo)準(zhǔn)品貯備液。

1.4.3 色譜條件[3]色譜柱為GL sciences Inc的Inertsil ods-sp(4.6 mm×150 mm，5 μm)，以水為流動(dòng)相A，乙腈為流動(dòng)相B；梯度洗脫條件：0～10 min，A相90%～75%，B相10%～25%；10～30 min，A相75%～60%，B相25%～40%；30～35 min，A相60%～55%，B相40%～45%；流速0.9 mL/min，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)203 nm，進(jìn)樣量20 μL。

1.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別用移液管精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品貯備液0.1 mL、0.4 mL、0.8 mL、1.6 mL和3.2 mL置10 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，分別過(guò)0.22 μm微孔濾膜，精密吸取20 μL，按上述色譜條件作HPLC分析。在標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制結(jié)果中，以標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積積分值(y)與相應(yīng)的濃度(x)進(jìn)行線性回歸。

1.4.5 方法學(xué)考察

1) 精密度試驗(yàn)：用移液管精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品貯備液0.4 mL置10 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，過(guò)0.22 μm微孔濾膜，按上述色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次20 μL，記錄峰面積。

2) 穩(wěn)定性試驗(yàn)：取珠海組太子參樣品溶液，分別于0、2 h、4 h、8 h、16 h及24 h進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)樣20 μL，記錄峰面積。

3) 重復(fù)性試驗(yàn)：取珠海組太子參樣品粉末5份，按1.4的方法進(jìn)行樣品制備，進(jìn)樣20 μL，記錄峰面積。

加樣回收率試驗(yàn)：分別量取1 mL已知含量的珠海組太子參樣品溶液5份，加入相同含量的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，混勻，過(guò)0.22 μm微孔濾膜，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積。

1.4.6 樣品測(cè)定 吸取各供試品溶液，進(jìn)樣20 μL，記錄峰面積，根據(jù)相應(yīng)線性關(guān)系計(jì)算各樣品中環(huán)肽B的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 薄層色譜(TLC)鑒別

從圖1看出，種植于珠海的太子參和其他省份的樣品，與對(duì)照藥材在相應(yīng)的位置上顯現(xiàn)出相同斑點(diǎn)，表明珠海的太子參薄層色譜鑒別與標(biāo)準(zhǔn)藥材一致。

圖1 不同產(chǎn)地太子參的薄層色譜

2.2 水分、總灰分和水溶性浸出物含量

根據(jù)《中國(guó)藥典》2010年版相關(guān)規(guī)定，太子參藥材水分不得超過(guò)14%，水溶性浸出物不得少于25.0%，總灰分不得超過(guò)4.0%。表1的測(cè)定結(jié)果表明：珠海及其他各省供試藥材均能滿足藥典對(duì)太子參水分規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)、太子參總灰分標(biāo)準(zhǔn)和水溶性浸出物標(biāo)準(zhǔn)。其中，珠海種植的太子參的水溶性浸出物最高，達(dá)45.6%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)藥典規(guī)定的25%。

表1 不同產(chǎn)地太子參藥材的水分、總灰分和水溶性浸出物含量

Table 1 Contents of moisture, total ash and water soluble extracts in P.heterophylla from different producing areas %

注：A為太子參環(huán)肽B標(biāo)準(zhǔn)品，B為珠海產(chǎn)太子參，1 為太子參環(huán)肽B峰。

Note: A, heterophyllin B standards; B,P.heterophyllafrom Zhuhai; 1, Heterophyllin B peak ofP.heterophylla.

圖2 太子參的HPLC圖譜

Fig.2 HPLC spectrogram ofP.heterophylla

2.3 不同產(chǎn)地太子參中環(huán)肽B的含量

2.3.1 樣品的分離度及方法學(xué)考察 從圖2看出，樣品的分離度良好，太子參環(huán)肽B的保留時(shí)間約為27.5 min。以標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積積分值(y)與相應(yīng)的濃度(x)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為y=75877x+59316(r=0.999 3)，進(jìn)樣濃度在8.8～281.6 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。精密度試驗(yàn)RSD=0.72%，儀器的精密度良好。穩(wěn)定性試驗(yàn)RSD=1.87%，樣品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定。重復(fù)性試驗(yàn)RSD=1.42%，說(shuō)明試驗(yàn)方法重復(fù)性良好。加樣回收率均值為98.79%，RSD=1.01%(表2)。

2.3.2 環(huán)肽B的含量 根據(jù)相應(yīng)線性關(guān)系計(jì)算各樣品中環(huán)肽B的含量(表3)，珠海組太子參中環(huán)肽B含量約為0.0167%，略低于其他產(chǎn)地太子參的含量。

表2 珠海生產(chǎn)太子參中環(huán)肽B的加樣回收率

注：環(huán)肽B的平均回收率為RSD=1.01%。

Note:The average recovery of cyclic peptide B is 1.01%.

表3 不同產(chǎn)地太子參中環(huán)肽B的含量

Table 3 Heterophyllin B content in P.heterophylla from different producing areas %

3 結(jié)論與討論

薄層色譜鑒別結(jié)果顯示，珠海生產(chǎn)及其他各產(chǎn)地的太子參與標(biāo)準(zhǔn)藥材斑點(diǎn)一致，說(shuō)明珠海生產(chǎn)及其他各產(chǎn)地太子參均含有與標(biāo)準(zhǔn)藥材一致的物質(zhì)，根據(jù)斑點(diǎn)顯色的大小、清晰程度，初步表明其所含成分相差不大。中藥材的水分含量多少直接影響藥材的質(zhì)量[4]，中藥材含水量過(guò)高，會(huì)出現(xiàn)蟲(chóng)害、霉變、潮解等變質(zhì)問(wèn)題，所以中藥材水分的測(cè)定也成為判斷藥材質(zhì)量合格的標(biāo)準(zhǔn)之一，根據(jù)不同產(chǎn)地太子參藥材水分的測(cè)定結(jié)果，珠海自種太子參藥材(水分為8.4%)及其他各產(chǎn)地太子參藥材水分含量均符合《藥典》2010年版規(guī)定。中藥材的總灰分反映藥材的雜質(zhì)含量[5]，所以總灰分的測(cè)定也成為藥材質(zhì)量合格的重要因素之一。測(cè)定結(jié)果表明，珠海生產(chǎn)太子參藥材(總灰分為2.3%)及各產(chǎn)地太子參藥材的總灰分均符合《藥典》2010年版要求。太子參水提物含有多糖和多種人體必需氨基酸等成分[6,7]?，F(xiàn)代藥理研究表明，太子參多糖具有抗應(yīng)激、抗疲勞、降血糖、降血脂、抗氧化等作用[8-10]。因此，太子參水溶性浸出物也是反映太子參品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。珠海生產(chǎn)太子參藥材的水溶性浸出物經(jīng)檢查為45.6%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于《藥典》2010年版水溶性浸出物不得少于25%的規(guī)定，其他產(chǎn)地太子參藥材也符合標(biāo)準(zhǔn)。珠海組太子參藥材與其他產(chǎn)地藥材水分、總灰分、水溶性浸出物含量雖存在一定差異，但差異不大。珠海太子參的環(huán)肽B含量為0.0167%，略低于《藥典》2010年版0.02%的規(guī)定。但是由于環(huán)肽B與太子參質(zhì)量的相關(guān)性還有待肯定，在《藥典》2010年版的第一增補(bǔ)本中取消了太子參環(huán)肽B作為其藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)。

Preliminary Evaluation of Quality ofPseudostellariaheterophyllaGrown in Zhuhai

MO Zhentao, YE Shichao, SHEN Chengting

(ZhuhaiCampusofZunyiMedicalCollege,Zhuhai,Guangdong519041,China)

To evaluate the possibility of producingP.heterophyllain Zhuhai, total ash content, water-soluble extracts and heterophyllin B content ofP.heterophyllawere determined. Results: The component ofP.heterophyllagrown in Zhuhai was in accordance with standard medicinal materials in TLC identification. Contents of moisture, total ash and water soluble extracts were respectively 8.4%, 2.3% and 45.6%,which met the standards requirements. Content of heterophyllin B was 0.0167%, which was of little difference withP.heterophyllain other producing areas. Conclusion: The quality ofP.heterophyllacan meet the standard requirements of Chinese Phannacopoeia 2010.P.heterophyllaplanted in Zhuhai has certain development space.

Pseudostellariaheterophylla； quality evaluation； TLC； water soluble extracts； Zhuhai

2015-06-09； 2015-12-27修回

貴州省聯(lián)合基金重點(diǎn)項(xiàng)目[黔科合J字LKZ(2013)04]；遵義醫(yī)學(xué)院博士啟動(dòng)基金(F-590)

莫鎮(zhèn)濤(1983-)，男，副教授，博士，從事中藥新藥開(kāi)發(fā)研究。E-mail：mozhentao1@163.com

1001-3601(2016)01-0036-0137-03

S567

A