加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺增生組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)水平的影響

李 峰，鄭 仿，閆家文，趙書(shū)曉，黃 新，馬林楓，鄭 藝，鐘新蘭，趙軍輝，伍松合

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加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺增生組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)水平的影響

李 峰，鄭 仿，閆家文，趙書(shū)曉，黃 新，馬林楓，鄭 藝，鐘新蘭，趙軍輝，伍松合

【摘要】目的通過(guò)加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺增生組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)表達(dá)水平影響的研究，探討加味桂枝茯苓顆粒對(duì)良性前列腺增生癥(BPH)的作用機(jī)制。方法2013年1月—2015年6月，選取90只雄性SD大鼠，采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分成正常組(A組，25只)和模型組(65只)，A組隨機(jī)取20只，模型組在驗(yàn)證造模成功后隨機(jī)取60只，模型組采用隨機(jī)數(shù)字表進(jìn)一步分為對(duì)照組(B組，20只)、加味桂枝茯苓顆粒組(C組，20只)、非那雄胺片組(D組，20只)。A組大鼠正常飼養(yǎng)，模型組造模，之后B組大鼠0.9%氯化鈉溶液灌胃，C組大鼠加味桂枝茯苓顆粒溶液灌胃，D組大鼠非那雄胺片溶液灌胃。于末次灌胃治療結(jié)束24 h后進(jìn)行前列腺組織標(biāo)本采集。記錄各組大鼠前列腺體積、前列腺增生指數(shù)，采用免疫組化SP法檢測(cè)VEGF、bFGF表達(dá)水平。結(jié)果B組前列腺體積、前列腺增生指數(shù)大于A組(P<0.05)；C組、D組前列腺體積、前列腺增生指數(shù)小于B組(P<0.05)。B組、C組、D組VEGF、bFGF表達(dá)水平高于A組(P<0.05)；C組、D組VEGF、bFGF表達(dá)水平低于B組(P<0.05)。結(jié)論加味桂枝茯苓顆粒通過(guò)降低大鼠前列腺增生腺體組織中VEGF、bFGF表達(dá)水平，進(jìn)而縮小前列腺體積，降低前列腺增生指數(shù)，從而達(dá)到治療BPH的效果。

良性前列腺增生癥(benign prostatic hyperplasia，BPH)是引起老年男性排尿障礙的常見(jiàn)泌尿系疾病之一，發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)而增高，50歲發(fā)病率為30%～50%，到80歲可達(dá)90%[1]。隨著工業(yè)社會(huì)的發(fā)展與人口老齡化的到來(lái)，BPH已成為現(xiàn)代社會(huì)困擾老年男性的常見(jiàn)疾病，其發(fā)病率呈逐年增高的趨勢(shì)，給家庭及社會(huì)帶來(lái)了巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[2]。因此，對(duì)于BPH治療方法的研究與突破就顯得尤為迫切。

桂枝茯苓丸組方為桂枝、茯苓、牡丹(去心)、桃仁(去皮尖，熬)、芍藥各等分，原方功效為活血化瘀、緩消癥塊，治婦人宿有癥病，但其不獨(dú)用于婦女，亦可用于男子[3]。本研究組在大量的前期臨床研究中發(fā)現(xiàn)，BPH患者多以血瘀為主要病理變化[4]，濕熱蘊(yùn)結(jié)為主要兼證，桂枝茯苓丸可明顯改善BPH患者因濕熱蘊(yùn)結(jié)、瘀阻下焦所引起的下尿路癥狀(lower urinary tract symptoms，LUTS)，部分患者在經(jīng)過(guò)以桂枝茯苓顆粒辯證加味的治療后，增生的前列腺明顯縮小，以LUTS為主的臨床癥狀顯著減輕[5]。本研究通過(guò)復(fù)制SD大鼠BPH動(dòng)物模型，觀察加味桂枝茯苓顆粒對(duì)前列腺腺體大小變化和相關(guān)病理改變的影響，對(duì)其藥理作用及可能作用機(jī)制進(jìn)行探討；并進(jìn)行細(xì)胞因子〔血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)〕表達(dá)水平的免疫組化研究，試圖從免疫學(xué)角度進(jìn)一步探討B(tài)PH可能的病理機(jī)制以及加味桂枝茯苓顆粒在其中的可能作用機(jī)制。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)雄性SD大鼠90只，體質(zhì)量(220±25)g，購(gòu)于廣西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，動(dòng)物編號(hào)為：SCXK(桂)2009-0002。

1.1.2實(shí)驗(yàn)藥物加味桂枝茯苓顆粒：采用配方顆粒，由江蘇江陰天江藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，原方為桂枝10 g、茯苓15 g、牡丹皮10 g、赤芍10 g、桃仁10 g，然后加入大黃6 g、王不留行15 g、澤瀉15 g組成；此處標(biāo)注制劑單位為飲片劑量，其中配方顆粒1 g/袋，相當(dāng)于中藥飲片劑量6 g。非那雄胺片：批號(hào)1010072，由Merck Sharp & Dohme Limited生產(chǎn)，由杭州默沙東制藥有限公司分裝，規(guī)格5 mg/片×10片/盒。制成粉狀物，溶于60 ℃蒸餾水，制成濃度為0.5 mg/ml飽和溶液，冰箱存儲(chǔ)。丙酸睪丸酮注射液：批號(hào)1104161，由天津金耀氨基酸有限公司生產(chǎn)，規(guī)格25 mg·ml-1·支-1×10支/盒，使用時(shí)溶于橄欖油中。橄欖油：西班牙生產(chǎn)，規(guī)格500 ml/瓶(作為丙酸睪丸酮的溶媒)。

1.1.3實(shí)驗(yàn)試劑兔抗鼠VEGF單克隆抗體、兔抗鼠bFGF單克隆抗體、鏈霉菌素抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶(S-P)超敏試劑盒、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒、磷酸鹽緩沖液(PBS)從北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司采購(gòu)。

本研究創(chuàng)新點(diǎn)：

良性前列腺增生癥(BPH)是引起中老年男性排尿障礙的最常見(jiàn)的一種良性疾病，BPH主要表現(xiàn)為組織學(xué)上的前列腺間質(zhì)和腺體成分的增生。加味桂枝茯苓顆粒是根據(jù)廣西中醫(yī)藥大學(xué)唐乾利教授的經(jīng)驗(yàn)用方桂枝茯苓丸加減而成，為中成藥制劑，患者服用簡(jiǎn)單，依從性較好，并且患者大多數(shù)為高齡男性，中成藥不良反應(yīng)小，為廣大患者所接受。本課題將中醫(yī)治療女性疾病的理論應(yīng)用于男性前列腺增生疾病的治療，以加味桂枝茯苓顆粒為被試因素，大鼠前列腺組織為受試對(duì)象，西藥非那雄胺為陽(yáng)性參照，綜合應(yīng)用分子生物學(xué)、生物化學(xué)等現(xiàn)代研究技術(shù)，在前期研究和臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)表達(dá)水平的影響，以期明確加味桂枝茯苓顆粒對(duì)前列腺新生血管產(chǎn)生和基質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)干預(yù)的分子生物學(xué)機(jī)制，為中醫(yī)治療BPH提供理論依據(jù)，亦為中醫(yī)外科學(xué)的“活血祛瘀、以通為用”法則提供理論依據(jù)，為傳統(tǒng)中醫(yī)藥在該病的基礎(chǔ)研究提供新的思路。

1.1.4實(shí)驗(yàn)儀器ACS-3A型電子計(jì)重稱(上海友聲衡器有限公司)，BH-2光學(xué)顯微鏡(OLYMPUS)，PHIAS-1000高清晰度彩色病理分析系統(tǒng)，Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件，恒溫箱(德國(guó)萊卡儀器公司)，全自動(dòng)免疫組化染色儀(澳大利亞HESTION)。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1分組2013年1月—2015年6月，將90只雄性SD大鼠在廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心適應(yīng)性飼養(yǎng)(正常飼養(yǎng)，即將SD大鼠置于清潔鼠籠中，每日予以鼠糧及飲用水，無(wú)特殊藥物添加及人工干預(yù))1周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分成正常組(A組，25只)和模型組(65只)，A組隨機(jī)取20只，模型組在驗(yàn)證造模成功后隨機(jī)取60只，模型組采用隨機(jī)數(shù)字表法進(jìn)一步分為對(duì)照組(B組，20只)、加味桂枝茯苓顆粒組(C組，20只)、非那雄胺片組(D組，20只)。

1.2.2建立模型

1.2.2.1去勢(shì)A組大鼠正常飼養(yǎng)。模型組大鼠采用吳符火等[6]的方法造模，去勢(shì)〔參照原衛(wèi)生部《新藥(西藥)臨床研究指導(dǎo)原則匯編》[7]〕，給予鹽酸氯胺酮注射液100 mg/kg腹腔麻醉，暴露陰囊；常規(guī)皮膚消毒，逐層切開(kāi)大鼠陰囊，摘除雙側(cè)睪丸，殘端用1號(hào)無(wú)菌絲線結(jié)扎，止血徹底后，將陰囊全層縫合。

1.2.2.2注射激素觀察7 d，模型組大鼠頸部皮下注射溶于橄欖油的丙酸睪丸酮(丙酸睪丸酮注射液與橄欖油的比例為4∶1，濃度為5 mg/ml)，5 mg/kg，連續(xù)給藥21 d，給藥期間每7 d稱重并調(diào)整藥物注射劑量。

1.2.2.3造模樣品檢驗(yàn)A組和模型組隨機(jī)選擇2只大鼠，以離斷頸椎法處死，將其置于解剖臺(tái)，采集大鼠前列腺組織，采用ACS-3A型電子計(jì)重稱稱量大鼠體質(zhì)量、前列腺濕重，以容積法測(cè)量大鼠前列腺體積，計(jì)算大鼠前列腺增生指數(shù)(前列腺增生指數(shù)=前列腺濕重/體質(zhì)量×100%)，然后保存于甲醛溶液中固定，HE染色，利用PHIAS-1000高清晰度彩色病理分析系統(tǒng)行病理學(xué)檢查，確定模型組大鼠前列腺存在細(xì)胞數(shù)量增多、體積增大的現(xiàn)象，證明造模成功。

1.2.3藥物治療A組大鼠正常飼養(yǎng)；B組大鼠0.9%氯化鈉溶液灌胃，2 ml/d；C組大鼠參考管家齊等[8]的方法，加味桂枝茯苓顆粒溶液灌胃，2 ml/d；D組大鼠參照蔡冰等[9]的方法，非那雄胺片溶液灌胃，2 ml/d。除A組外其余各組均連續(xù)灌胃治療30 d，每周測(cè)量1次體質(zhì)量，以便準(zhǔn)確調(diào)整藥物劑量。

1.2.4前列腺組織標(biāo)本采集于末次灌胃治療結(jié)束24 h后進(jìn)行前列腺組織標(biāo)本采集。各組大鼠稱重并記錄，然后以離斷頸椎法處死大鼠，將前列腺組織整體摘除。標(biāo)記并測(cè)量各項(xiàng)指標(biāo)，然后置入裝有甲醛溶液的密閉容器存儲(chǔ)，全自動(dòng)免疫組化染色儀進(jìn)行后續(xù)免疫組化檢測(cè)。

1.2.5觀察指標(biāo)及方法

1.2.5.1大鼠前列腺體積、前列腺增生指數(shù)采用ACS-3A型電子計(jì)重稱稱量大鼠體質(zhì)量、前列腺濕重，以容積法測(cè)量大鼠前列腺體積，計(jì)算大鼠前列腺增生指數(shù)。

1.2.5.2VEGF、bFGF表達(dá)水平采用免疫組化SP法檢測(cè)VEGF、bFGF表達(dá)水平。前列腺組織石蠟切片經(jīng)3缸二甲苯脫蠟45 min(每缸15 min)；100%、90%、75%梯度乙醇水化共30 min；3%過(guò)氧化氫(H2O2)中12 min；蒸餾水中5 min；磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗3次，5 min/次；滴加1∶4的胰酶液，37 ℃恒溫箱內(nèi)孵育15 min；PBS沖洗3次，5 min/次；滴加50 μl 1∶10的羊血清，37 ℃恒溫箱內(nèi)孵育15 min；傾去羊血清，勿洗，滴加兔抗鼠bFGF單克隆抗體50 μl，4 ℃冰箱孵育過(guò)夜，PBS沖洗3次，5 min/次；滴加兔抗鼠VEGF單克隆抗體50 μl，37 ℃恒溫箱孵育30 min，PBS沖洗3次，5 min/次；滴加S-P 50 μl，37 ℃恒溫箱孵育30 min，PBS沖洗3次，5 min/次；滴加新鮮配置的DAB溶液，BH-2光學(xué)顯微鏡下控制顯色；背景染色出現(xiàn)前終止染色，自來(lái)水沖洗，蘇木素復(fù)染20 s，自來(lái)水充分洗滌；0.5%鹽酸乙醇分化至切片變?yōu)榧t色，投入自來(lái)水終止；0.25%氣水返藍(lán)，投入自來(lái)水終止；75%、90%、100%梯度乙醇脫水，20 min；經(jīng)3缸二甲苯透明，共30 min；中性樹(shù)膠封固。采用PBS對(duì)抗體進(jìn)行稀釋?zhuān)渲蠽EGF、bFGF的抗體滴度均為1∶100；生物素標(biāo)記的二抗及辣根過(guò)氧化酶標(biāo)記的鏈霉卵白素滴度為1∶100。VEGF陽(yáng)性表達(dá)為細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色改變，主要位于血管內(nèi)皮細(xì)胞及血管周?chē)|(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)中[9]。bFGF陽(yáng)性表達(dá)為細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色改變，主要表達(dá)于前列腺間質(zhì)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)中[10]。在相同光強(qiáng)度的光鏡下，每張切片選取5個(gè)含有陽(yáng)性染色顆粒數(shù)目多的區(qū)域，10×40視野拍照截圖，采用Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件計(jì)算出陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞的積分光密度(integrated optical density，IOD)，取平均值作為VEGF、bFGF表達(dá)水平。用已知標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性片做陽(yáng)性對(duì)照，用PBS代替兔抗鼠bFGF單克隆抗體作陽(yáng)性對(duì)照。

2結(jié)果

2.1大鼠前列腺體積、前列腺增生指數(shù)比較4組大鼠前列腺體積、前列腺增生指數(shù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。B組前列腺體積、前列腺增生指數(shù)大于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組、D組前列腺體積、前列腺增生指數(shù)小于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表1)。

2.2VEGF、bFGF表達(dá)水平比較4組VEGF、bFGF表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。B組、C組、D組VEGF、bFGF表達(dá)水平高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組、D組VEGF、bFGF表達(dá)水平低于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表2)。

Table 1Comparison of prostate volume and prostate hyperplasia index among each group

組別只數(shù)前列腺體積(ml)前列腺增生指數(shù)(mg/g)A組200.75±0.162.15±0.19B組201.40±0.19a3.47±0.27aC組200.86±0.18b2.29±0.25bD組200.82±0.15b2.26±0.22bF值61.13140.41P值<0.001<0.001

注：A組為正常組，B組為對(duì)照組，C組為加味桂枝茯苓顆粒組，D組為非那雄胺組；與A組比較，aP<0.05；與B組比較，bP<0.05

Table 2Comparison of the levels of VEGF and bFGF in the prostate tissue of rats among each group

組別只數(shù)VEGFbFGFA組201162746±2579362379126±51625B組203728454±363375a5236782±73315aC組202416866±344389ab2896576±64928abD組202356173±256429ab2863582±63269abF值229.588109.83P值<0.001<0.001

注：與A組比較，aP<0.05；與B組比較，bP<0.05；VEGF=血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，bFGF=堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子

3討論

BPH是引起中老年男性排尿障礙最為常見(jiàn)的一種良性疾病，主要表現(xiàn)為組織學(xué)上的前列腺間質(zhì)和腺體成分的增生、解剖學(xué)上的前列腺增大(benign prostatic enlargement，BPE)、LUTS為主的臨床癥狀以及尿動(dòng)力學(xué)上的膀胱出口梗阻癥狀[9]。目前認(rèn)為，BPH發(fā)生和發(fā)展的生物學(xué)基礎(chǔ)是間質(zhì)和腺體上皮這兩種前列腺組分的差異性生長(zhǎng)方式[11]。形態(tài)計(jì)量學(xué)研究表明，BPH是以基質(zhì)增生為主的疾病，在正常腺體中基質(zhì)與上皮增生的比例為2∶1，在BPH中這個(gè)比例則升高為5∶1；平滑肌細(xì)胞的明顯增殖是基質(zhì)細(xì)胞組分變化的主要特點(diǎn)[12]。由于其發(fā)病原因尚不完全清楚，主要以對(duì)癥治療為主，可分為以下4種：等待觀察治療、藥物治療、手術(shù)治療和微創(chuàng)治療[13]。但每種治療均有明顯的局限性：等待觀察治療常適用于癥狀較輕且無(wú)其他并發(fā)癥的患者；西藥治療雖然可以取得良好的治療效果，但是服藥時(shí)間長(zhǎng)，不良反應(yīng)大；手術(shù)治療目前在前列腺增生癥治療中仍起著不可替代的作用，特別是在重度前列腺增生患者中尤為重要，但是出血多、創(chuàng)傷大、術(shù)后恢復(fù)慢等缺點(diǎn)為廣大患者所不能接受；隨著微創(chuàng)技術(shù)在泌尿外科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用，微創(chuàng)治療特別是經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)(TURP)為目前國(guó)際公認(rèn)的治療BPH的金標(biāo)準(zhǔn)[14]，但是仍然存在著大量的BPH患者因心血管、腦血管等各種基礎(chǔ)疾病而存在手術(shù)禁忌證[15]。所以中醫(yī)中藥治療以其不良反應(yīng)小、患者依從性好而逐漸走進(jìn)人們的視野[15]。

桂枝茯苓丸出自《金匱要略》，是張仲景治療婦科癥瘕的名方[16]。加味桂枝茯苓顆粒在原方(桂枝茯苓丸)的基礎(chǔ)上加大黃、王不留行、澤瀉，用以活血通便、清熱利濕之效而寓“以通為用”的法則。方中桂枝辛甘而溫，入經(jīng)絡(luò)而宣通血脈，消瘀祛滯；桃仁苦甘而平，活血祛瘀，除癥瘕，增強(qiáng)桂枝化瘀消癥功效；茯苓淡滲利濕，通利小便；丹皮辛、苦寒，涼血而不留瘀，通經(jīng)絡(luò)，破積血；芍藥以調(diào)和氣血，行血中之滯；澤瀉利水通淋，通調(diào)水道。通過(guò)辯證加減，諸藥相配，相輔相成，補(bǔ)腎氣，除淤血，通調(diào)水道[17]?？紤]BPH與婦科癥瘕相似的病理機(jī)制，依據(jù)“異病同治”的理論以及現(xiàn)代的制藥方法[18]，本研究組采用加味桂枝茯苓顆粒來(lái)治療BPH。

前列腺正常體積和生理功能依賴于對(duì)其產(chǎn)生影響的生長(zhǎng)促進(jìn)因子和生長(zhǎng)抑制因子的相對(duì)的、動(dòng)態(tài)的平衡[19]。BPH的發(fā)生有賴于新生血管的形成，而新生血管的形成與VEGF、bFGF及血管生成素密切相關(guān)[20]。近來(lái)有學(xué)者認(rèn)為，BPH中相關(guān)的因子如VEGF、bFGF、CD34可以被藥物非那雄胺所抑制，導(dǎo)致增生組織中血管密度下降，從而使增生的前列腺腺體和間質(zhì)萎縮，前列腺整體體積減小，因而B(niǎo)PH癥狀能夠相對(duì)減輕和緩解[21]。因此，研究VEGF、bFGF誘發(fā)血管新生和促進(jìn)間質(zhì)增長(zhǎng)的作用，對(duì)于揭示BPH病因、為臨床開(kāi)辟新的防治途徑有重要意義。本研究結(jié)果顯示，B組前列腺體積、前列腺增生指數(shù)大于A組，C、D組前列腺體積、前列腺增生指數(shù)小于B組，B、C、D組VEGF、bFGF表達(dá)水平高于A組，C、D組VEGF、bFGF表達(dá)水平低于B組；C、D組前列腺體積、前列腺增生指數(shù)、VEGF、bFGF表達(dá)水平無(wú)差異。提示加味桂枝茯苓顆粒、非那雄胺能夠使腺體和間質(zhì)均出現(xiàn)萎縮，明顯縮小前列腺體積、降低前列腺增生指數(shù)；加味桂枝茯苓顆粒在治療前列腺增生方面與非那雄胺有著相似的機(jī)制，其機(jī)制可能是通過(guò)抑制BPH組織中VEGF、bFGF的表達(dá)及分布，使新生血管增生被抑制，造成增生的間質(zhì)組織及腺上皮萎縮，抑制bFGF分泌可使BPH組織中成纖維細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞萎縮、減少，進(jìn)一步通過(guò)上皮-間質(zhì)相互作用機(jī)制和血供的減少造成腺上皮萎縮[22]。

當(dāng)然，本研究尚存在一定局限性，主要是檢測(cè)范圍相對(duì)較小，僅局限于VEGF、bFGF兩個(gè)因子，可進(jìn)一步檢測(cè)前列腺組織的抗凋亡基因bcl-2、促增殖基因c-myc等基因的調(diào)控，更全面地明確加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺新生血管產(chǎn)生和基質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響的分子生物學(xué)機(jī)制，此外，今后繼續(xù)密切關(guān)注學(xué)術(shù)動(dòng)態(tài)，選擇更有意義的切入點(diǎn)開(kāi)展深入研究。

綜上所述，加味桂枝茯苓顆粒通過(guò)降低大鼠前列腺增生腺體組織中VEGF、bFGF表達(dá)水平，進(jìn)而縮小前列腺體積，降低前列腺增生指數(shù)，從而達(dá)到治療BPH的效果。另外，加味桂枝茯苓顆粒及非那雄胺對(duì)大鼠BPH的治療效果無(wú)差異，其長(zhǎng)期治療效果及不良反應(yīng)有待長(zhǎng)期臨床觀察研究。

作者貢獻(xiàn)：李峰、鄭仿、趙書(shū)曉、黃新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與實(shí)施、資料收集整理、撰寫(xiě)論文、成文并對(duì)文章負(fù)責(zé)；閆家文、馬林楓、鄭藝、鐘新蘭、趙軍輝進(jìn)行實(shí)驗(yàn)實(shí)施、評(píng)估、資料收集；伍松合進(jìn)行質(zhì)量控制及審校。

本文無(wú)利益沖突。

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(本文編輯：崔麗紅)

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——絕經(jīng)后晚期乳腺癌個(gè)體化診治策略

一項(xiàng)研究對(duì)第三代芳香化酶抑制劑(AI)治療進(jìn)展后的晚期激素受體陽(yáng)性乳腺癌患者驅(qū)動(dòng)基因的突變情況進(jìn)行了探討分析。結(jié)果顯示，ESR1基因突變出現(xiàn)在AI治療耐藥后，將對(duì)臨床實(shí)踐決策產(chǎn)生影響。

一項(xiàng)納入10項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照研究的薈萃分析顯示，氟維司群二線治療絕經(jīng)后雌激素受體陽(yáng)性晚期乳腺癌，氟維司群500 mg較250 mg和AI的療效均更好，而與依維莫司聯(lián)合依西美坦療效相當(dāng)?shù)靖弊饔酶佟?/p>

另一項(xiàng)納入全球范圍5項(xiàng)隨機(jī)研究，分別是二線內(nèi)分泌治療的CONFIRM、China CONFIRM、FINDERI和FINDER2研究以及一線內(nèi)分泌治療的FIRST研究。薈萃分析結(jié)果顯示，與其他治療手段相比，氟維司群500 mg能夠顯著提高晚期乳腺癌患者的臨床獲益率(CBR)達(dá)34%，OR=1.34。單獨(dú)分析其中二線治療的數(shù)據(jù)，也獲得了與總?cè)巳合嗤Y(jié)果，OR=1.35。

(摘自《中國(guó)醫(yī)學(xué)論壇報(bào)》)

【關(guān)鍵詞】前列腺增生；加味桂枝茯苓顆粒；非那雄胺；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A；成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2

李峰，鄭仿，閆家文，等.加味桂枝茯苓顆粒對(duì)大鼠前列腺增生組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)水平的影響[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2016，19(6)：693-697.[www.chinagp.net]

Li F,Zheng F,Yan JW,et al.Influence of flavored cassia twig tuckahoe particles on the expression of vascular endothelial growth factor and basic fibroblast growth factor[J].Chinese General Practice，2016，19(6)：693-697.

Influence of Flavored Cassia Twig Tuckahoe Particles on the Expression of Vascular Endothelial Growth Factor and Basic Fibroblast Growth FactorLIFeng,ZHENGFang,YANJia-wen,etal.DepartmentofUrologySurgery,theFirstAffiliatedHospitalofGuangxiUniversityofChineseMedicine,Nanning530001,China

【Abstract】ObjectiveTo explore the mechanism of flavored cassia twig tuckahoe particles in the treatment of benign prostatic hyperplasia (BPH) by researching the influence of flavored cassia twig tuckahoe particles on the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF).MethodsFrom January 2013 to June 2015,we selected 90 male SD rats.Using random number table method,we divided the rats into normal group (group A,n=25) and model group (n=65).After model building,we randomly selected 20 rats from group A and 60 rats from model group.The 60 rats selected from model group were further divided into three groups:control group (group B,n=20),flavored cassia twig tuckahoe particles group (group C,n=20) and finasteride group (group D,n=20) by randorn number table method.The rats of group A were normally fed;group B was given gavage with sodium chloride solution;group C was given gavage with flavored cassia twig tuckahoe particle solution;group D was given gavage with finasteride solution.Twenty-four hours after last gavage,prostate tissues were sampled,and we recorded the prostate volume and prostate hyperplasia index of each group;the expression levels of VEGF and bFGF were detected by immunohistochemical SP method.ResultsGroup B was higher than group A in prostate volume and prostate hyperplasia index (P<0.05);group C and group D were lower than group B in prostate volume and prostate hyperplasia index (P<0.05).Group B,group C and group D were higher than group A in the levels of VEGF and bFGF (P<0.05);group C and group D were lower than group B in the levels of VEGF and bFGF (P<0.05).ConclusionFlavored cassia twig tuckahoe particles can lessen prostate volume and prostate hyperplasia index by reducing the levels of VEGF and bFGF in the hyperplasia of prostate gland tissue of rats,thus achieving efficacy in BPH treatment.

【Key words】Prostatic hyperplasia;Flavored cassia twig tuckahoe particles;Finasteride;Vascular endothelial growth factor A;Fibroblast growth factor 2

(收稿日期：2015-06-02；修回日期：2015-12-15)

【中圖分類(lèi)號(hào)】R 697.3

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

doi：10.3969/j.issn.1007-9572.2016.06.014

通信作者：鄭仿，530001 廣西南寧市，廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科；E-mail：20611213@qq.com

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81160485)
作者單位：530001 廣西南寧市，廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科(李峰，鄭仿，趙書(shū)曉，黃新，馬林楓，鄭藝，鐘新蘭，伍松合)；廣西中醫(yī)藥大學(xué)外科學(xué)研究生(閆家文)；湖北民族學(xué)院附屬醫(yī)院 民大醫(yī)院耳鼻喉頭頸外科(趙軍輝)

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