邢 煥 孫春陽(yáng) 欒素軍 薩仁娜* 張宏福 丁美芳
(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100193;2.北京市飼料監(jiān)察所,北京 100012)
飼糧中使用抗生素添加劑能夠提高畜禽生產(chǎn)性能,增加養(yǎng)殖效益,但是由于藥物殘留及抗藥性等問(wèn)題,對(duì)人類和動(dòng)物健康造成的危害日益嚴(yán)重。研究安全有效的添加劑,是發(fā)展高效、低耗、污染少養(yǎng)殖業(yè)的必然趨勢(shì)。葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)是一種脫氫氧化酶,催化腸道內(nèi)葡萄糖分解產(chǎn)生過(guò)氧化氫和葡萄糖酸[1],反應(yīng)過(guò)程中消耗胃腸道內(nèi)的氧,為消化道內(nèi)有益厭氧微生物(如乳酸桿菌、雙歧桿菌等)提供生存環(huán)境,同時(shí)產(chǎn)生的過(guò)氧化氫能夠抑制大腸桿菌、沙門氏菌等有害微生物,從而調(diào)整腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)[2-6]。大量研究表明,葡萄糖氧化代謝產(chǎn)生的葡萄糖酸能夠降低腸道pH,偏酸的環(huán)境有利于腸道內(nèi)各種消化酶保持活性,易于養(yǎng)分的消化吸收[7-8],因此 GOD能夠起到類似于抗生素、益生菌和酸化劑的作用?!讹暳咸砑觿┢贩N目錄(2013)》將GOD列為飼用酶制劑允許在飼料中使用。硒是機(jī)體不可缺少的一種微量元素,是構(gòu)成谷胱甘肽氧化物酶(GSHPx)的主要成分,GSH-Px催化還原型谷胱甘肽(GSH)變?yōu)檠趸凸入赘孰?GSSG),且能夠催化過(guò)氧化氫(H2O2)分解為水(H2O),發(fā)揮抗氧化作用,進(jìn)而保護(hù)機(jī)體細(xì)胞及組織免受過(guò)氧化物的損傷[9],具有提高動(dòng)物機(jī)體免疫力、促進(jìn)生長(zhǎng)和改善肉品質(zhì)等作用[10]。酵母硒是在酵母發(fā)酵過(guò)程中通過(guò)富集高含量的無(wú)機(jī)硒而形成的一類有機(jī)硒,除具備硒元素特有的功能外,同時(shí)具有生物安全高、環(huán)保和易吸收等特點(diǎn)[11],作為飼料中一種優(yōu)質(zhì)的有機(jī)硒源,在國(guó)外尤其是發(fā)達(dá)國(guó)家,應(yīng)用已久[12]。研究表明,酵母硒可以改善畜禽生產(chǎn)性能[13],增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力[14-15],提高機(jī)體免疫能力[16-17]。由此可見,GOD和酵母硒均有促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體消化吸收,提高免疫功能的作用。在規(guī)?;B(yǎng)殖條件下,GOD和酵母硒聯(lián)合使用,是否影響肉雞生產(chǎn)性能及免疫器官的發(fā)育,是否影響血清相關(guān)指標(biāo),尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)在規(guī)?;怆u養(yǎng)殖場(chǎng)的配合飼料中使用GOD和酵母硒混合添加劑,測(cè)定生產(chǎn)性能及免疫器官發(fā)育,為標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖條件下混合添加劑的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。
混合添加劑在飼糧中的添加量為0.2%,其中有效成分為β-D-GOD(活性為30 U/g)、酵母硒(200 mg/kg,其中硒含量為2 000 mg/kg),其他為載體稻殼粉。
試驗(yàn)動(dòng)物選用1日齡愛拔益加(AA)肉雞,參照NRC(1994)肉雞營(yíng)養(yǎng)需要配制飼糧,基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。
本試驗(yàn)在北京市平谷區(qū)某規(guī)?;怆u養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行。選擇1日齡AA肉雞5 000只,隨機(jī)分為2個(gè)組,分別為對(duì)照(CT)組和試驗(yàn)(EM)組,每個(gè)組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)625只雞。養(yǎng)殖方式為網(wǎng)上平養(yǎng)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.2%的GOD和酵母硒混合添加劑。試驗(yàn)期為42 d,1~21 d為試驗(yàn)前期,22~42 d為試驗(yàn)后期。所有肉雞飼養(yǎng)管理?xiàng)l件一致,自由采食和飲水,24 h光照。1日齡雛雞溫度控制在34~35℃,之后每周下降2~3℃,至35日齡時(shí)雞舍內(nèi)溫度為21℃;相對(duì)濕度控制在55% ~65%。按照常規(guī)程序進(jìn)行免疫接種。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air-dry basis) %
1.4.1 生產(chǎn)性能測(cè)定
每天記錄雞群死淘只數(shù)。分別在肉雞21和42日齡,每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取30只雞,進(jìn)行個(gè)體空腹稱重(停料12 h、不停水),記錄采食量,計(jì)算各組肉雞的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)和死亡率。
1.4.2 血清指標(biāo)測(cè)定
肉雞21和42日齡時(shí),每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取5只雞,翅靜脈采血,3 000 r/min離心15 min,分離血清,-20℃冰箱保存待測(cè)。全自動(dòng)生化分析儀(日立,7100)測(cè)定血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮含量。
1.4.3 屠宰性能測(cè)定
分別在肉雞21和42日齡時(shí),每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取5只雞開展屠宰試驗(yàn),參考文獻(xiàn)[18]中描述的方法,測(cè)定并計(jì)算肉雞屠宰率、半凈膛率、全凈膛率和腹脂率。取脾臟、胸腺、法氏囊,去除附著組織并用濾紙吸干血水,電子天平稱重,計(jì)算免疫器官指數(shù)。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。數(shù)據(jù)采用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件中ANOVA程序進(jìn)行單因素方差分析和Duncan氏法多重比較,以P<0.05為顯著水平。
肉雞的生產(chǎn)性能指標(biāo)列于表2。在1~21日齡,試驗(yàn)組肉雞的ADFI、ADG高于對(duì)照組2.58%和 1.67%(P <0.05),F(xiàn)/G 低于對(duì)照組 3.36%(P<0.05)。在22~42日齡,試驗(yàn)組肉雞的 ADFI、ADG分別比對(duì)照組高了1.55%和6.93%(P<0.05),同時(shí) F/G 降低了 5.13%(P <0.05)。在肉雞生長(zhǎng)全期(1~42日齡),試驗(yàn)組的 ADFI、ADG高于對(duì)照組 1.83% 和 6.66%(P <0.05),F(xiàn)/G 低于對(duì)照組4.44%(P<0.05)。在1~21日齡和22~42日齡時(shí),試驗(yàn)組死亡率低于對(duì)照組,但統(tǒng)計(jì)上差異不顯著(P>0.05)。在肉雞生長(zhǎng)全期試驗(yàn)組死亡率顯著降低(P<0.05)。
表2 混合添加劑對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of compound additive on performance of broilers
由表3可知,肉雞21日齡,試驗(yàn)組屠宰率、全凈膛率和半凈膛率顯著高于對(duì)照組(P<0.05),分別提高 2.35%、4.11%和 3.23%;在肉雞 42 日齡屠宰時(shí),試驗(yàn)組各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。
由表4可知,21日齡時(shí),試驗(yàn)組肉雞法氏囊指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P<0.05),脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)雖有提高,但未達(dá)顯著水平(P>0.05);42日齡時(shí),試驗(yàn)組肉雞的胸腺指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其余指數(shù)在2組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。
由表5可知,在21日齡時(shí),與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組肉雞血清總蛋白含量提高了6.36%(P<0.05),白蛋白、球蛋白含量沒(méi)有顯著變化(P>0.05);在42日齡時(shí),試驗(yàn)組肉雞血清球蛋白含量高于對(duì)照組8.50%(P <0.05),總蛋白、白蛋白含量無(wú)顯著變化(P>0.05)。21、42日齡試驗(yàn)組肉雞血清尿素氮含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。
表3 混合添加劑對(duì)肉雞屠宰性能的影響Table 3 Effects of compound additive on slaughter performance of broilers %
表5 混合添加劑對(duì)肉雞血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of compound additive on serum biochemical parameters of broilers
家禽的生產(chǎn)性能受品種、營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等諸多因素的影響。規(guī)模化肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)為了提高效益,往往在飼糧中使用多種添加劑,比如抗生素、抗氧化劑、酸化劑、多種復(fù)合酶等,這些添加劑的作用效果是否具有累加效應(yīng)或拮抗作用,相關(guān)研究報(bào)道較少。本試驗(yàn)選擇以GOD和酵母硒為主要成分的混合添加劑,在規(guī)?;怆u場(chǎng)開展試驗(yàn),結(jié)果表明,混合添加劑顯著提高肉雞ADFI和ADG,顯著降低F/G與死亡率。有研究發(fā)現(xiàn),飼糧中加入0.2%的GOD,35日齡肉雞采食量顯著提高,增重率和成活率分別比對(duì)照組提高6.23%和3.5%[19]。在玉米 -豆粕基礎(chǔ)飼糧中添加0.15 mg/kg的酵母硒,嶺南黃羽肉雞平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率分別提高了17.86%和16.19%[20]。本試驗(yàn)將GOD與酵母硒聯(lián)合使用,當(dāng)混合制劑添加量為0.2%時(shí),肉雞ADG提高了6.66%,F(xiàn)/G降低了4.44%,成活率增加了32.31%,這與本實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果相一致[21]。與前人研究結(jié)果相比,混合添加劑改善成活率的效果比單獨(dú)添加GOD要高,表明酵母硒與GOD的聯(lián)合使用,具有改善肉雞健康水平的作用。本試驗(yàn)屠宰數(shù)據(jù)顯示,混合添加劑可以顯著提高21日齡肉雞的屠宰率、全凈膛率和半凈膛率,這與二者的特性有關(guān)。GOD可以消耗腸道內(nèi)的氧,產(chǎn)生葡萄糖酸及H2O2,調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡[5],改善腸道形態(tài)[22],提高消化酶的活性[23],提高養(yǎng)分利用率[24-25]。酵母硒具有使過(guò)氧化物變成羥基化物的作用,保護(hù)動(dòng)物細(xì)胞及其組織不被過(guò)氧化物損傷[9]。GOD與酵母硒聯(lián)合使用,能夠改善肉雞生產(chǎn)性能,同時(shí)提高屠宰性能。
動(dòng)物免疫功能的高低取決于免疫器官的發(fā)育狀態(tài)及機(jī)能的強(qiáng)弱。一般用胸腺、脾臟和法氏囊的相對(duì)重量來(lái)評(píng)價(jià)雛雞的免疫狀態(tài)[26],并認(rèn)為免疫器官重量降低為免疫抑制所致,反之則為免疫增強(qiáng)、生長(zhǎng)發(fā)育快[27]。免疫器官迅速成熟,可使肉雞機(jī)體免疫機(jī)能增加,抵抗各種病原微生物感染的能力和抵抗各種應(yīng)激的能力得到提高[28]。免疫球蛋白是一種抗體蛋白,主要由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,當(dāng)機(jī)體循環(huán)抗體含量增加時(shí),血清中球蛋白水平升高,從而提高動(dòng)物機(jī)體抵抗不良環(huán)境和疾病的能力[29]。GOD具有抗氧化作用,可以清除自由基,保護(hù)腸道上皮細(xì)胞的完整性,降低大腸桿菌、沙門氏菌等感染畜禽的機(jī)會(huì),達(dá)到防御病原菌侵襲的目的[30]。有研究表明,金水烏雞飼糧添加GOD可以極顯著降低球蟲引發(fā)的疾病和死亡率[31];蛋雞飼糧添加0.1% ~0.4%的GOD可以提高血清中球蛋白含量[32]。有研究報(bào)道,酵母硒可以顯著提高仔豬[10]、柴雞[33]血清中球蛋白含量,提高機(jī)體免疫力。孫春陽(yáng)等[21]研究表明,飼糧中添加0.2%的GOD和酵母硒混合添加劑可以提高肉雞抗氧化酶活性,有效降低肉雞血清中丙二醛(MDA)含量,即降低了機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化程度,改善動(dòng)物機(jī)體的抗氧化應(yīng)激能力,提高機(jī)體免疫力。本試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證實(shí),含有GOD與酵母硒的混合添加劑對(duì)肉雞免疫器官的發(fā)育有促進(jìn)作用,可顯著提高肉雞血清免疫球蛋白含量,這與前人研究結(jié)果基本一致。
尿素氮是機(jī)體內(nèi)氨基酸分解代謝的終產(chǎn)物之一,其含量是反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的重要指標(biāo)[34],血清總蛋白包括白蛋白和球蛋白,其含量在一定程度上反映機(jī)體蛋白質(zhì)的吸收和代謝情況,其含量增加是肝臟合成蛋白質(zhì)能力加強(qiáng)的表現(xiàn),有利于機(jī)體生長(zhǎng)和提高飼料轉(zhuǎn)化率[35]。白蛋白是血清含量最多的蛋白質(zhì),占總蛋白含量的50%以上,具有增加抗體,提高免疫力等作用[36]。
研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加0.4%GOD可以顯著提高蛋雞血清中總蛋白含量,添加0.1%和0.4%的GOD能顯著提高蛋雞血清中白蛋白含量[3]。飼糧中添加0.3、0.5 和1.0 mg/kg 的酵母硒能顯著提高柴雞血清中總蛋白含量,具有提高白蛋白含量的趨勢(shì),并隨著酵母硒含量的增加呈上升趨勢(shì)[37]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧中添加GOD和酵母硒混合添加劑能顯著提高肉雞21日齡血清總蛋白含量;顯著降低21和42日齡血清尿素氮含量。這與前人的研究結(jié)果基本一致,說(shuō)明GOD和酵母硒混合添加劑,可提高肝臟代謝功能,改善飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收及蛋白質(zhì)與氨基酸的利用率,蛋白質(zhì)合成代謝增強(qiáng),有利于動(dòng)物機(jī)體的正常生長(zhǎng)發(fā)育[3]。
飼糧中添加GOD和酵母硒混合添加劑能夠提高肉雞生產(chǎn)性能,降低死亡率,提高免疫器官指數(shù),降低血清尿素氮含量。
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