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    不同有機(jī)物對厭氧氨氧化耦合反硝化的影響

    2015-11-17 09:25:32劉常敬李澤兵鄭照明王春香王昌穩(wěn)張美雪趙白航北京工業(yè)大學(xué)水質(zhì)科學(xué)與
    中國環(huán)境科學(xué) 2015年1期
    關(guān)鍵詞:鄰苯二酚苯甲酸鈉異養(yǎng)

    劉常敬,李澤兵,鄭照明,王春香,王昌穩(wěn),張美雪,趙白航,李 軍*(.北京工業(yè)大學(xué)水質(zhì)科學(xué)與

    水環(huán)境恢復(fù)工程北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100124;2.中國市政工程西北設(shè)計研究院有限公司天津分院,天津 300201;3.東華理工大學(xué)水資源與環(huán)境工程學(xué)院,江西 南昌 330013)

    不同有機(jī)物對厭氧氨氧化耦合反硝化的影響

    劉常敬1,2,李澤兵3,鄭照明1,王春香1,王昌穩(wěn)1,張美雪1,趙白航1,李 軍1*(1.北京工業(yè)大學(xué)水質(zhì)科學(xué)與

    水環(huán)境恢復(fù)工程北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100124;2.中國市政工程西北設(shè)計研究院有限公司天津分院,天津 300201;3.東華理工大學(xué)水資源與環(huán)境工程學(xué)院,江西 南昌 330013)

    通過連續(xù)試驗(yàn)和血清瓶批式試驗(yàn)研究了不同種類有機(jī)物對厭氧氨氧化耦合異養(yǎng)反硝化脫氮性能的影響.結(jié)果表明,從TN去除率來看,對耦合反應(yīng)器的影響:苯甲酸鈉<鄰苯二酚<間苯二酚<丙酸鈉<乙酸鈉;苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉對厭氧氨氧化菌的影響很小.苯酚反硝化菌能利用苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉作為電子供體進(jìn)行反硝化.不同有機(jī)物對苯酚反硝化菌的影響不同,進(jìn)而影響苯酚反硝化菌與厭氧氨氧化菌之間的協(xié)同和競爭關(guān)系.苯甲酸是苯酚降解過程中可能的中間產(chǎn)物.

    厭氧氨氧化;異養(yǎng)反硝化;有機(jī)物;脫氮

    近年來,國內(nèi)外的研究者對厭氧氨氧化(ANAMMOX)耦合異養(yǎng)反硝化做了很多研究[1-5].周少奇[6]從電子計量學(xué)方程提出兩者可實(shí)現(xiàn)協(xié)同作用:ANAMMOX反應(yīng)以CO2為碳源產(chǎn)生一定量的,為反硝化提供電子受體;而反硝化反應(yīng)消耗有機(jī)物且產(chǎn)生CO2,為ANAMMOX菌解除有機(jī)物抑制并提供無機(jī)碳源.研究發(fā)現(xiàn),低濃度有機(jī)物存在時,ANAMMOX菌和異養(yǎng)反硝化菌協(xié)同脫氮,提高了TN的去除率[1,7-8].但大多是采用單一有機(jī)物進(jìn)行的研究,然而,實(shí)際污水大多含有多種有機(jī)物,因此,在不同有機(jī)環(huán)境下ANAMMOX菌、異養(yǎng)反硝化菌的活性,耦合系統(tǒng)的穩(wěn)定性以及兩種菌之間協(xié)同、競爭關(guān)系等問題都值得研究.本文以實(shí)驗(yàn)室投加苯酚條件下已經(jīng)長期穩(wěn)定運(yùn)行的ANAMMOX耦合異養(yǎng)反硝化反應(yīng)器為基礎(chǔ),通過連續(xù)流和批次試驗(yàn)研究了苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉對ANAMMOX耦合異養(yǎng)反硝化脫氮性能的影響.

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)裝置及其運(yùn)行條件

    1.1.1 連續(xù)流試驗(yàn)裝置及其運(yùn)行條件 連續(xù)流試驗(yàn)裝置如圖1所示.采用UASB-生物膜反應(yīng)器,反應(yīng)器高110m,內(nèi)徑11cm,有效容積為10L,反應(yīng)器采用黑色軟性材料(EVA泡沫)包裹以避光,廢水由蠕動泵泵入反應(yīng)器底部,通過水浴使反應(yīng)器內(nèi)溫度維持在(25±1)℃,HRT為1.5h,進(jìn)水pH值控制在7.8左右,反應(yīng)器內(nèi)部上三分之一部分添加直徑為10cm的聚氯乙烯球形填料以減少污泥的流失,球形填料內(nèi)有環(huán)狀辮帶式纖維填料.

    圖1 UASB-生物膜反應(yīng)器示意Fig.1 Schematic diagram of UASB-biofilm reactor

    1.1.2 批次試驗(yàn)裝置及其運(yùn)行條件 批次試驗(yàn)裝置采用血清瓶,有效容積為500mL.首先,從連續(xù)流反應(yīng)器中取適量污泥,先用蒸餾水沖洗污泥3遍以去除殘留基質(zhì).然后向每個血清瓶中加入150mL污泥和350mL配有相應(yīng)基質(zhì)的水,放在磁力攪拌器上500r/min邊攪拌邊以純度99.9%的N2向瓶中吹脫20min除氧.最后將血清瓶連同磁力攪拌器放入25℃的恒溫箱培養(yǎng),待溫度穩(wěn)定后,開始取樣.試驗(yàn)開始、結(jié)束均測定pH值,每隔1h取樣測定、、的濃度,最后取50mL混合液測定MLVSS.設(shè)置了A、B、C 3組試驗(yàn),見表1.反應(yīng)器運(yùn)行到第7,22,33,48,64d時,分別用苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉代替苯酚.每種有機(jī)物連續(xù)運(yùn)行6~9d,反應(yīng)器進(jìn)水中苯甲酸鈉、鄰苯二酚、甲苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉的濃度分別控制為28.8,22.0,22.0,38.4,49.2mg/L,相當(dāng)于COD濃度分別為46.3,41.6,41.6,41.5,33.6mg/L.

    表1 間歇試驗(yàn)條件Table 1 Batch experimental conditions

    1.2 試驗(yàn)廢水

    試驗(yàn)廢水采用模擬廢水,主要成分有NH4Cl,NaNO2, NaHCO3, KH2PO4, MgSO4·7H2O, CaCl2,苯酚(苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉、乙酸鈉).

    微量元素Ⅰ(mg/L):EDTA 5000, FeSO45000;微量元素Ⅱ(mg/L):EDTA 15000, ZnSO4·7H2O 430, CoCl2·6H2O 240, MnCl2·4H2O 990, CuSO4· 5H2O 250, Na2MoO4·2H2O 220, NiCl2·6H2O 190,Na2SeO4·10H2O 210, H3BO314.其中微量元素Ⅰ、Ⅱ投加量各1mL/L.

    1.3 分析方法

    2 結(jié)果與討論

    2.1 苯酚條件下耦合反應(yīng)器的脫氮性能

    當(dāng)苯酚作為有機(jī)物時,ANAMMOX耦合異養(yǎng)反硝化反應(yīng)器能長期穩(wěn)定運(yùn)行[9].出水、去除率高達(dá)100%,TN去除率高達(dá)90.88%,平均總氮去除負(fù)荷達(dá)2.26kg/(m3·d),耦合系統(tǒng)消耗的、消耗的和生成的的比例關(guān)系為1:1.49:0.12.異養(yǎng)反硝化與ANAMMOX存在協(xié)同和競爭關(guān)系,TN的去除是ANAMMOX過程和異養(yǎng)反硝化過程共同作用的結(jié)果.耦合反應(yīng)器中ANAMMOX對TN去除貢獻(xiàn)率達(dá)到86.72%,反硝化過程對TN去除貢獻(xiàn)率達(dá)到13.28%,其中反硝化菌利用對TN去除的貢獻(xiàn)率為7.16%,反硝化菌利用對TN去除的貢獻(xiàn)率為5.89%.苯酚反硝化菌經(jīng)克隆、測序、比對后分析認(rèn)為屬于β-變形菌綱(β-proteobacteria)[10].

    2.2 連續(xù)流時不同種類有機(jī)物對耦合反應(yīng)器脫氮性能的影響

    表2 不同有機(jī)物對耦合系統(tǒng)的影響Table 2 The effect of different organic matters on coupling system

    圖2 不同有機(jī)物時進(jìn)、出水、和含量及變化曲線Fig.2 Variations ofandduring the operation with different organic matters

    由表2,圖2、3和4可知,苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉對耦合反應(yīng)器脫氮性能影響較小,處理效果接近苯酚作為有機(jī)碳源時耦合系統(tǒng)的脫氮效果.

    圖3 不同有機(jī)物時TN的去除特性Fig.3 Characteristics of TN removal with different organic matters

    圖4 不同有機(jī)物時反應(yīng)器中和Fig.4 Ratios oftoandtoN in the reactor with different organic matters

    從耦合系統(tǒng)中各氮素的化學(xué)計量關(guān)系可知,不同有機(jī)物對苯酚反硝化菌的影響不同,進(jìn)而影響苯酚反硝化菌與ANAMMOX菌之間的協(xié)同和競爭關(guān)系.用苯甲酸鈉、鄰苯二酚、鄰苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉代替苯酚時,經(jīng)計算可得出各反應(yīng)過程對TN去除的貢獻(xiàn)率,如表3所示.

    從苯酚反硝化菌與ANAMMOX菌之間的協(xié)同和競爭關(guān)系可以看出,不管哪種有機(jī)物存在,在耦合系統(tǒng)中,ANAMMOX過程始終處于主導(dǎo)地位,這是耦合系統(tǒng)TN去除率高的保障.另外,投加苯甲酸鈉時系統(tǒng)的處理效果與苯酚時最接近,且效果優(yōu)于苯酚(競爭的量少,去除的量多),說明在此系統(tǒng)中,苯甲酸是苯酚降解過程中的中間產(chǎn)物,這與Gallert等[11],Ke等[12]研究結(jié)果相同.

    表3 各反應(yīng)過程對TN去除的貢獻(xiàn)率(%)Table 3 The contributions of each reaction process on TN removal (%)

    2.3 批式試驗(yàn)時不同有機(jī)物對耦合反應(yīng)器脫氮性能的影響

    圖5 投加苯甲酸鈉時基質(zhì)的降解特性Fig.5 Substances degradation characteristics with sodium benzoate addition

    2.3.1 苯甲酸鈉對耦合反應(yīng)器脫氮性能的影響反應(yīng)結(jié)束后測得A、B和C的MLVSS濃度分別為2.66,2.55,2.67g/L.如圖5A所示和的降解過程均為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2分別為0.989、0.997,線性關(guān)系很好,比降解速率(單位質(zhì)量MLVSS在單位時間降解的基質(zhì)的質(zhì)量)分別為2.97,5.41mg/(g·h),比降解速率之比為1:1.82.在前1h生成量很少,后生成量增多,濃度明顯升高,在后3h比生成速率為0.73mg/(g·h),與的比降解速率之比為0.25:1.如圖5B所示在前2h降解較快,后2h降解緩慢,這是反硝化電子供體苯甲酸鈉濃度逐步變低的原因.如圖5C所示的降解過程為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2為0.955,線性關(guān)系較好,比降解速率為1.11mg/(g·h),降解過程中在前1h有少量的的積累.

    2.3.2 鄰苯二酚對耦合反應(yīng)器脫氮性能的影響 反應(yīng)結(jié)束后測得A、B和C的MLVSS濃度分別為4.63,5.24,2.94g/L.如圖6A所示和的降解過程均為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2分別為0.987、0.988,線性關(guān)系較好,比降解速率分別為2.54,4.05mg/(g·h),比降解速率之比為1:1.60.NO3--N的比生成速率為0.45mg/(g·h),與的比降解速率之比為0.18:1.如圖6B所示的濃度隨著試驗(yàn)的進(jìn)行而降低明顯.如圖6C所示的濃度在前1h降解的明顯,在后3h幾乎沒降解,在整個過程一直有少量的的積累.

    圖6 投加鄰苯二酚時基質(zhì)的降解特性Fig.6 Substances degradation characterisics with o-dihydroxybenzene addition

    2.3.3 間苯二酚對耦合反應(yīng)器脫氮性能的影響 反應(yīng)結(jié)束后測得A、B和C的MLVSS濃度分別為4.33,5.11,4.26g/L.如圖7A所示和的降解過程均為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2分別為0.996、0.990,線性關(guān)系很好,比降解速率分別為3.47,5.41mg/(g·h),比降解速率之比為1:1.56.的比生成速率為0.73mg/(g·h),與的比降解速率之比為0.21:1.如圖7B所示的濃度隨著試驗(yàn)的進(jìn)行而降低的明顯.如圖7C所示在整個試驗(yàn)過程中降解緩慢,且一直有少量的的積累.

    圖7 投加間苯二酚時基質(zhì)的降解特性Fig.7 Substances degradation characterisics with m-dihydroxybenzene addition

    2.3.4 丙酸鈉對耦合反應(yīng)器脫氮性能的影響反應(yīng)結(jié)束后測得A、B和C的MLVSS濃度分別為5.06,7.74,6.32g/L.如圖8A所示在前2h的降解過程為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2為0.961,比降解速率為4.00mg/(g·h),在后2h降解緩慢.的降解過程為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2為0.932,線性關(guān)系較好,比降解速率為5.34mg/(g·h),與的比降解速率之比為1.33:1.在前2h的比生成速率為0.37mg/(g·h),與的比降解速率之比為0.09:1,在后2h比生成速率變小.如圖8B所示的降解過程為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2為0.979,線性關(guān)系較好,比降解速率為1.72mg/(g·h).如圖8C所示在前2h的降解過程為零級反應(yīng),比降解速率為0.46mg/(g·h),降解過程中在前3h有少量的的積累.

    圖8 投加丙酸鈉時基質(zhì)的降解特性Fig.8 Substances degradation characterisics with sodium propionate addition

    2.3.5 乙酸鈉對耦合反應(yīng)器脫氮性能的影響反應(yīng)結(jié)束后測得A、B和C的MLVSS濃度分別為5.51,6.67,5.76g/L.如圖9A所示,和的降解過程均為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2分別為0.973、0.978,線性關(guān)系較好,比降解速率分別為2.35,3.80mg/(g·h),比降解速率之比為1:1.62.的比生成速率為0.34mg/(g·h),與的比降解速率之比為0.15:1.如圖9B所示的降解過程為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2為0.994,線性關(guān)系很好,比降解速率為1.65mg/(g·h).如圖9C所示的降解過程均為零級反應(yīng),線性相關(guān)系數(shù)R2為0.918,線性關(guān)系較好,比降解速率為0.22mg/(g·h),降解過程中始終有少量的的積累.

    圖9 投加乙酸鈉時基質(zhì)的降解特性Fig.9 Substances degradation characterisics with sodium acetate addition

    試驗(yàn)起始、結(jié)束的pH值如表4所示,所有批次試驗(yàn)結(jié)束時的pH值均高于起始時的pH值,這是因?yàn)锳NAMMOX和異養(yǎng)反硝化均消耗H+,隨著試驗(yàn)的進(jìn)行,會引起pH值升高[6,13].過高的pH值會抑制微生物的活性,研究表明,ANAMMOX菌最適宜的pH值范圍6.7~8.3[14],反硝化菌生長適宜pH值范圍為6~9[15].pH值會影響ANAMMOX與異養(yǎng)反硝化的耦合關(guān)系,胡勇有等[16]研究表明,ANAMMOX與異養(yǎng)反硝化耦合最適的pH值為8.0.

    表4 試驗(yàn)起始和結(jié)束時的pH值Table 4 The changes of pH at the beginning and ending of the experiment

    從所有組的B試驗(yàn)可以看出,苯酚反硝化菌能以苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉作為電子供體,以作為電子受體進(jìn)行反硝化,說明反硝化菌和ANAMMOX菌之間有競爭關(guān)系.

    從所有組的C試驗(yàn)可以看出,苯酚反硝化菌能以苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉作為電子供體,以作為電子受體進(jìn)行反硝化,說明反硝化菌和ANAMMOX菌之間有協(xié)同關(guān)系.另外,試驗(yàn)過程中都有的積累,只是積累的時間段不同,這說明協(xié)同關(guān)系不僅體現(xiàn)在反硝化菌利用了ANAMMOX過程生成的,還體現(xiàn)在反硝化菌降解為ANAMMOX菌提供.有研究表明,反硝化反應(yīng)分為4個步驟:首先是在硝酸鹽還原酶作用下將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽;然后在亞硝酸鹽還原酶作用下將亞硝酸鹽轉(zhuǎn)化成異化亞硝酸鹽;然后在異化亞硝酸鹽還原酶作用下將異化亞硝酸鹽還原成一氧化二氮;最后在一氧化二氮還原酶作用下將一氧化二氮還原為氮?dú)猓?8-19].有的積累說明反硝化過程中第一步的反應(yīng)速率快于后續(xù)步驟的反應(yīng)速率.酶是由基因來控制的,若能從酶或基因等分子生物學(xué)來控制反硝化過程,就能很好的控制ANAMMOX與異養(yǎng)反硝化的耦合.

    不同有機(jī)物對ANAMMOX和異養(yǎng)反硝化的影響不同,進(jìn)而影響了ANAMMOX與反硝化的協(xié)同與競爭關(guān)系,ANAMMOX與異養(yǎng)反硝化的耦合關(guān)系還值得深入研究.

    3 結(jié)論

    3.1 不同有機(jī)物對ANAMMOX耦合異養(yǎng)反硝化的影響:苯甲酸鈉<鄰苯二酚<間苯二酚<丙酸鈉<乙酸鈉.不同有機(jī)物存在時,苯酚反硝化菌與ANAMMOX菌之間的協(xié)同和競爭關(guān)系不同.苯甲酸是苯酚降解過程中的中間產(chǎn)物.

    3.2 苯酚反硝化菌能以苯甲酸鈉、鄰苯二酚、間苯二酚、丙酸鈉和乙酸鈉作為電子供體,以和作為電子受體進(jìn)行反硝化,反硝化降解過程中有的積累,反硝化菌和ANAMMOX菌之間的協(xié)同關(guān)系不僅體現(xiàn)在反硝化菌利用了ANAMMOX過程生成的,還體現(xiàn)在反硝化菌降解為ANAMMOX菌提供.

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    Effect of different organic matters on anammox coupling denitrifying.

    LIU Chang-jing1,2, LI Ze-bing3, ZHENG Zhao-ming1, WANG Chun-xiang1, WANG Chang-wen1, ZHANG Mei-xue1, ZHAO Bai-hang1, LI Jun1*(1.Key Laboratory of Beijing for Water Quality Science and Water Environment Recovery Engineering, Beijing University of Technology, Beijing 100124, China;2.Tianjin Branch,China Northwest Municipal Engineering Design and Research Institute Limited Company, Tianjin 300201, China;3.School of Water Resources and Environmental Engineering, East China Institute of Technology, Nanchang 330013, China). China Environmental Science, 2015,35(1):87~94

    The effect of different organic matters on nitrogen removal performance of anammox coupling heterotrophic denitrification process was investigated by continuous cultivation and serum bottle batch tests. In view of TN removal rate,the results showed that the sequence of these orgnic matters’ influence on the coupling reactor was (from minimum to maximum): sodium benzoate, o-dihydroxybenzene, m-dihydroxybenzene, sodium propionate, sodium acetate;. sodium benzoate, o-dihydroxybenzene, m-dihydroxybenzene, sodium propionate and sodium acetate have a little impact on the anaerobic ammonia oxidation bacteria. Phenol denitrifying bacteria could use sodium benzoate, o-dihydroxybenzene,m-dihydroxybenzene, sodium propionate and sodium acetate as electron donor for denitrification. Different organic matters had different influences on phenol denitrifying bacteria and then affected the cooperative and competitive relationship between phenol denitrifying bacteria and anaerobic ammonia oxidation bacteria. Benzoic acid was the possible product of phenol degradation.

    ANAMMOX;heterotrophic denitrification;organic matter;nitrogen removal

    X703.5

    A

    1000-6923(2015)01-0087-08

    劉常敬(1987-),男,河北保定人,北京工業(yè)大學(xué)碩士研究生,主要從事厭氧氨氧化脫氮研究.發(fā)表論文4篇.

    2014-04-18

    國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(51078008);北京市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(8122005);北京市教委重點(diǎn)項(xiàng)目(KZ201110005008)

    * 責(zé)任作者, 教授, jglijun@bjut.edu.cn

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