NADPH氧化酶在常見心血管疾病中的表達(dá)與作用

王夢龍++萬軍

[摘要] NADPH氧化酶是唯一一類以生成活性氧類物質(zhì)為主要功能的酶類，目前共發(fā)現(xiàn)7種亞型，心血管系統(tǒng)表達(dá)其中4種。NADPH氧化酶參與心臟和血管生理與病理過程的調(diào)節(jié)，如細(xì)胞增殖、遷移、細(xì)胞肥大、凋亡和細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu)等。本文較系統(tǒng)的綜述NADPH氧化酶在常見心血管疾病包括心力衰竭、冠心病、高血壓病和心律失常中的表達(dá)與作用，以期為臨床抗氧化治療提供幫助。

[關(guān)鍵詞] NADPH氧化酶；心血管疾??；氧化應(yīng)激；抗氧化治療

[中圖分類號] R54 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2015）09（b）-0034-05

越來越多的證據(jù)顯示，活性氧（reactive oxygen species，ROS）生成增多引起的氧化應(yīng)激參與了多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展[1]，而臨床抗氧化應(yīng)激試驗（補(bǔ)充抗氧化劑維生素）的失敗說明氧化應(yīng)激與心血管疾病之間可能存在更為復(fù)雜的關(guān)系[2-3]。正常情況下ROS通過激活不同的信號途徑維持細(xì)胞的生理功能，如細(xì)胞增殖、分化和遷移等；而病理情況下，高水平的ROS導(dǎo)致細(xì)胞功能的紊亂和疾病的發(fā)生?，F(xiàn)有的研究提示ROS的作用高度依賴于ROS的來源、存在的部位、局部濃度，甚至與ROS種類相關(guān)[4]。心臟和血管組織ROS有以下幾種來源：線粒體電子傳遞鏈、黃嘌呤氧化酶、解偶聯(lián)的內(nèi)皮一氧化氮合酶和NADPH氧化酶（NADPH oxidase，Nox）[5]。Nox是一類以生成ROS為主要功能的蛋白質(zhì)，明確Nox在常見心血管疾病中的表達(dá)及其作用對臨床抗氧化治療的實施具有重要意義。

1 NADPH氧化酶家族概述

Nox2是最早發(fā)現(xiàn)的Nox亞型，能夠?qū)ADPH的電子傳遞給分子氧，生成超氧陰離子（O2-）[6]。Nox2表達(dá)于細(xì)胞膜，由胞膜亞基Nox2（gp91phox）、p22phox和胞漿亞基p40phox、p47phox、p67phox、Rac1組成，生理狀態(tài)下不具有活性，其活化需要胞漿亞基相互結(jié)合并轉(zhuǎn)位到細(xì)胞膜。與Nox2不同，Nox4主要表達(dá)于核膜周圍，包括細(xì)胞核、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等，處于持續(xù)激活狀態(tài)，不具有胞漿亞基，其活性的調(diào)節(jié)主要依賴Nox4 mRNA或蛋白水平的變化，且Nox4激活后主要產(chǎn)生過氧化氫（H2O2），而非O2-[6]。目前共發(fā)現(xiàn)7種Nox亞型：Nox1～5和雙氧合酶1、2，心血管系統(tǒng)中主要表達(dá)Nox1、Nox2、Nox4和Nox5，這些亞型在心肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞中均有表達(dá)，其中心肌細(xì)胞主要表達(dá)Nox2和Nox4[7]。

2 NADPH氧化酶在常見心血管疾病中的作用

2.1 心肌肥厚與心力衰竭

研究證實Nox活性增高是心衰患者心肌ROS生成增多的主要原因[8-10]。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)心衰時Nox4、Nox2及Nox2亞基mRNA水平無明顯變化，其活性的增加可能與Nox2亞基p47phox由胞漿向胞膜轉(zhuǎn)移增加引起[9-10]。同時，研究還發(fā)現(xiàn)Nox活性的增加與引起心衰的病因無關(guān)，在擴(kuò)張型心肌病和缺血性心肌病患者心肌中，Nox活性相似[11]。

心肌肥厚是心力衰竭過程中重要的病理生理改變。研究發(fā)現(xiàn)，Nox2活性在血管緊張素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）引起的小鼠心肌肥厚模型中增高，敲除Nox2可以降低AngⅡ誘導(dǎo)的左室肥厚程度，同時心肌肥厚標(biāo)志物如ANP、β-MHC等水平下降[12]。敲除Nox2的活性調(diào)節(jié)分子Rac1得到類似的結(jié)果[13]，提示Nox2在AngⅡ誘導(dǎo)的心肌肥厚中起重要作用。Nox2發(fā)揮作用的機(jī)制可能與ERK1/2、AKT、ASK1/NF-κB活性的改變有關(guān)[13-15]。隨著研究的深入，研究者發(fā)現(xiàn)在主動脈縮窄術(shù)誘導(dǎo)的心肌肥厚模型中，敲除Nox2的小鼠和野生型小鼠出現(xiàn)同等程度的心肌肥厚[16]，提示Nox的功能可能具有亞型特異性，Nox2僅在AngⅡ誘導(dǎo)的心肌肥厚中起作用，而并不參與壓力負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥厚。在Nox2敲除小鼠中，壓力負(fù)荷可引起Nox4水平代償性的增高[16]，這可能是Nox2在壓力負(fù)荷模型中不起作用的原因之一。

Nox4在壓力負(fù)荷心肌肥厚模型中起何種作用，結(jié)論尚不統(tǒng)一。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)Nox4敲除小鼠在壓力負(fù)荷模型中出現(xiàn)更嚴(yán)重的左室肥厚和左室收縮功能障礙，伴有心室的擴(kuò)張，而過表達(dá)Nox4出現(xiàn)相反的心臟表型，說明Nox4在心肌肥厚時起保護(hù)作用[17]。缺氧誘導(dǎo)因子Hif1α的上調(diào)可能參與了Nox4對壓力負(fù)荷模型的保護(hù)作用，但Nox4通過何種途徑上調(diào)Hif1α尚需進(jìn)一步研究[17]。而Sadoshima實驗室的研究卻得出相反的結(jié)論，即Nox4在壓力負(fù)荷誘導(dǎo)的心肌肥厚模型中起損害作用[8]。兩個研究得出不同結(jié)論的原因尚不清楚，推測與小鼠遺傳背景、基因敲除或過表達(dá)技術(shù)的不同以及心肌肥厚嚴(yán)重程度相關(guān)。

2.2 冠狀動脈粥樣硬化和心肌梗死

ROS可以將低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）氧化成ox-LDL并在內(nèi)皮下沉積，促進(jìn)粥樣斑塊的形成。同時ROS還可促進(jìn)平滑肌細(xì)胞遷移、增殖和凋亡，進(jìn)而引起冠狀動脈內(nèi)皮功能障礙[18]。在人心臟冠脈血管，非粥樣斑塊區(qū)域血管內(nèi)膜、中膜和外膜ROS生成量基本一致，而在粥樣斑塊區(qū)域，因巨噬細(xì)胞聚集，ROS生成明顯增多。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)Nox2及其亞基p22phox主要定位于巨噬細(xì)胞，而Nox4主要在非巨噬細(xì)胞，且Nox2、p22phox mRNA含量與粥樣斑塊嚴(yán)重程度相關(guān)[19]。動物實驗證實Nox活性增加促進(jìn)高脂飲食引起的動脈粥樣硬化，運動訓(xùn)練或轉(zhuǎn)變?yōu)檎ｏ嬍晨梢越档蚇ox活性和ERK1/2、JNK磷酸化水平，從而逆轉(zhuǎn)動脈粥樣硬化相關(guān)危險因素[20]。不穩(wěn)定斑塊與急性冠脈綜合征的發(fā)生密切相關(guān)，氧化應(yīng)激水平的增加促進(jìn)斑塊成分的改變和斑塊的進(jìn)展，導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定。近期研究發(fā)現(xiàn)斑塊內(nèi)Nox4水平的增加可促進(jìn)斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞的表型轉(zhuǎn)變，引起斑塊不穩(wěn)定和斑塊破裂，從而導(dǎo)致心肌梗死的發(fā)生[21]。

通過免疫組化和Western Blot技術(shù)，研究者發(fā)現(xiàn)急性心梗后，梗死區(qū)和梗死周邊區(qū)心肌細(xì)胞Nox2表達(dá)明顯增加，而遠(yuǎn)離心梗部位心肌細(xì)胞Nox2含量并無明顯變化，提示Nox2生成的ROS可能參與心梗的發(fā)生[22]。動物實驗也證實在心肌梗死后心肌細(xì)胞Nox2和Nox4表達(dá)增高[23-24]，抑制Nox2或Nox4不減少心肌梗死面積，但可以減輕心室擴(kuò)張程度，同時改善收縮功能，大幅提高小鼠存活率[24-27]，說明Nox是干預(yù)心肌梗死后心肌重構(gòu)的重要靶點。但目前對于Nox2和Nox4在心肌缺血再灌注（ischemia-reperfusion，I/R）損傷時的亞型特異性作用了解甚少。全身性敲除Nox2與Nox4小鼠在I/R損傷時出現(xiàn)相似的表型：I/R損傷后，心肌ROS水平和梗死面積基本一致[28]，提示定位于細(xì)胞不同部位的Nox2和Nox4產(chǎn)生的ROS在I/R損傷時的作用相似。盡管Nox2生成的主要是O2-，但在超氧歧化酶作用下，O2-很快歧化生成H2O2，而H2O2具有很高的膜通透性，這可能是Nox2與Nox4在I/R損傷時作用相似的原因。另外，心臟特異性敲除Nox4小鼠在I/R刺激時出現(xiàn)與全身性Nox4敲除小鼠同等程度的心肌損傷，說明心肌細(xì)胞中的Nox4，而非其他細(xì)胞來源（如巨噬細(xì)胞）的Nox4，參與了I/R損傷時心肌細(xì)胞功能的改變[28]。一定水平的ROS對心肌細(xì)胞正常生理功能的維持和心肌損傷時的適應(yīng)性反應(yīng)是必需的。心肌特異性過表達(dá)負(fù)向調(diào)控Nox小鼠可以抑制所有Nox亞型，該小鼠與雙敲除Nox2和Nox4的小鼠在受到I/R損傷時，盡管ROS水平比單獨敲除Nox2或Nox4小鼠更低，心肌梗死面積反而更大[28]。

2.3 心律失常

心房顫動（atrial fibrillation，AF）是臨床上常見的一種心律失常，心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)與電重構(gòu)在AF的誘發(fā)和維持中起重要作用?，F(xiàn)有證據(jù)表明心房氧化應(yīng)激途徑在AF病理生理過程中起重要作用[29-30]。AF患者心耳組織Nox活性增加，ROS生成增多，通過調(diào)節(jié)肺靜脈和心房細(xì)胞的電活動，引起異位起搏點活性增加，導(dǎo)致AF發(fā)生[31]。Nox活性在陣發(fā)性房顫和永久性房顫患者心耳組織中并無明顯不同，Real-time PCR結(jié)果也證實Nox2 mRNA水平在兩種患者心耳組織中表達(dá)量相似[32]。但目前尚無統(tǒng)一結(jié)論說明何種Nox亞型在AF患者Nox活性調(diào)節(jié)中起主要作用。Zhang等[31]的研究提示AF患者左心耳Nox4 mRNA水平增加，與心耳組織H2O2水平正相關(guān)。而Kim等[33]并未在AF患者右心耳組織中檢測到Nox4的表達(dá)。在對Nox參與AF的機(jī)制探討中，研究者發(fā)現(xiàn)Nox2可以激活蛋白激酶A（proteinkinase A，PKA）和鈣離子/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱ（Ca2+/calmodulin-dependent kinaseⅡ，CaMKⅡ），活化的PKA可以導(dǎo)致鈉電流和鈣電流的紊亂；同時活化的CaMKⅡ增加肌漿網(wǎng)Ca2+外漏，通過這兩種不同的途徑參與了AngⅡ誘導(dǎo)心肌細(xì)胞早期后除極[34-35]。

2.4 高血壓病

研究發(fā)現(xiàn)Nox同樣是血管系統(tǒng)ROS的主要來源。病理因素刺激時，Nox被激活，產(chǎn)生大量的ROS，導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能的紊亂和疾病的發(fā)生。Nox生成的O2-很快歧化生成具有高度膜通透性的H2O2，而H2O2是重要的血管舒張因子，因此過表達(dá)Nox4可以增加內(nèi)皮依賴性血管舒張作用[36]。此外，H2O2還可以增加內(nèi)皮一氧化氮合酶的表達(dá)與活性，從而促進(jìn)血管舒張因子一氧化氮的合成[37]。

高血壓病是一種復(fù)雜的、具有多種調(diào)控因素的疾病，高血壓病患者血管Nox表達(dá)水平尚不清楚，動物實驗發(fā)現(xiàn)自發(fā)性高血壓大鼠主動脈Nox4表達(dá)下降[38]。另有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，與血壓正常大鼠相比，自發(fā)性高血壓大鼠基底動脈Nox4 mRNA水平升高4.1倍[39]，這些結(jié)果提示Nox在高血壓病血管中的表達(dá)可能與血管部位相關(guān)。Nox在高血壓病中的作用在AngⅡ誘導(dǎo)的高血壓模型中得到充分證實。Nox1或Nox2缺失小鼠在AngⅡ刺激時不會出現(xiàn)血壓升高[40-41]，而平滑肌特異性過表達(dá)Nox1或內(nèi)皮特異性過表達(dá)Nox2小鼠在AngⅡ刺激時血壓升高更為顯著[42-44]。然而，內(nèi)皮特異性過表達(dá)Nox4卻可以導(dǎo)致小鼠基礎(chǔ)血壓的下降，可能與過表達(dá)Nox4導(dǎo)致H2O2含量大幅升高、內(nèi)皮依賴性血管舒張作用增強(qiáng)有關(guān)[36]。不同Nox在高血壓病中作用不同可能與其生成的ROS類型不同有關(guān)[45]，Nox1或Nox2主要生成O2-，而Nox4主要生產(chǎn)H2O2。另外，有證據(jù)表明大腦的Nox參與了AngⅡ誘導(dǎo)的血壓反應(yīng)。下調(diào)大腦Nox水平可以降低全身性或大腦局部AngⅡ處理引起的血壓升高[46-47]。盡管關(guān)于Nox在高血壓病中作用的研究大部分是在AngⅡ模型中完成，有少量研究表明Nox參與了腎性高血壓的形成。在Nox缺失的小鼠中，醋酸脫氧皮質(zhì)酮高鹽不能誘導(dǎo)小鼠出現(xiàn)高血壓模型[48-49]。進(jìn)一步分析其原因發(fā)現(xiàn)，腎小球致密斑表達(dá)Nox蛋白，可能參與了球-管反饋，進(jìn)而參與高血壓的形成。

3 小結(jié)與展望

利用NADPH的電子生成ROS是Nox的唯一作用，而Nox復(fù)雜的激活和活性調(diào)節(jié)過程以及下游不同的信號途徑提供了多種干預(yù)病理生理過程的靶點。通過探討Nox在常見心血管疾病中的表達(dá)與作用可以發(fā)現(xiàn)，Nox在病理生理過程中的作用很大程度上取決于活化的Nox亞型及其表達(dá)水平。目前對于Nox的亞型特異性作用研究尚不充分，同時尚未開發(fā)出針對不同Nox亞型的特異性抑制劑[50]。ROS在病理生理過程中的“雙刃劍”作用增加了臨床抗氧化治療的難度，因此需要更多的研究明確不同Nox亞型的作用，并開發(fā)出Nox亞型特異性抑制劑，從而更好地開展臨床抗氧化治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Burgoyne JR，Mongue-Din H，Eaton P，et al. Redox signaling in cardiac physiology and pathology [J]. Circ Res，2012， 111（8）：1091-1106.

[2] Cook NR，Albert CM，Gaziano JM，et al. A randomized factorial trial of vitamins C and E and beta carotene in the secondary prevention of cardiovascular events in women：results from the Women's antioxidant cardiovascular study [J]. Arch Intern Med，2007，167（15）：1610-1618.

[3] Sesso HD，Buring JE，Christen WG，et al. Vitamins E and C in the prevention of cardiovascular disease in men： the Physicians' Health Study Ⅱ randomized controlled trial [J]. JAMA，2008，300（18）：2123-2133.

[4] Finkel T. Oxidant signals and oxidative stress [J]. Curr Opin Cell Biol，2003，15（2）：247-254.

[5] Giordano FJ. Oxygen，oxidative stress，hypoxia，and heart failure [J]. J Clin Invest，2005，115（3）：500-508.

[6] Zhang M，Perino A，Ghigo A，et al. NADPH oxidases in heart failure：poachers or gamekeepers？[J]. Antioxid Redox Signal，2013，18（9）：1024-1041.

[7] Akki A，Zhang M，Murdoch C，et al. NADPH oxidase signaling and cardiac myocyte function [J]. J Mol Cell Cardiol，2009，47（1）：15-22.

[8] Kuroda J，Ago T，Matsushima S，et al. NADPH oxidase 4 （Nox4）is a major source of oxidative stress in the failing heart [J]. Proc Natl Acad Sci USA，2010，107（35）：15565-15570.

[9] Heymes C，Bendall JK，Ratajczak P，et al. Increased myocardial NADPH oxidase activity in human heart failure [J]. J Am Coll Cardiol，2003，41（12）：2164-2171.

[10] Maack C，Kartes T，Kilter H，et al. Oxygen free radical release in human failing myocardium is associated with increased activity of rac1-GTPase and represents a target for statin treatment [J]. Circulation，2003，108（13）：1567-1574.

[11] Borchi E，Bargelli V，Stillitano F，et al. Enhanced ROS production by NADPH oxidase is correlated to changes in antioxidant enzyme activity in human heart failure [J]. Biochim Biophys Acta，2010，1802（3）：331-338.

[12] Bendall JK，Cave AC，Heymes C，et al. Pivotal role of a gp91（phox）-containing NADPH oxidase in angiotensin Ⅱ-induced cardiac hypertrophy in mice [J]. Circulation，2002， 105（3）：293-296.

[13] Satoh M，Ogita H，Takeshita K，et al. Requirement of Rac1 in the development of cardiac hypertrophy [J]. Proc Natl Acad Sci USA，2006，103（19）：7432-7437.

[14] Hirotani S，Otsu K，Nishida K，et al. Involvement of nuclear factor-kappa B and apoptosis signal-regulating kinase 1 in G-protein-coupled receptor agonist-induced cardiomyocyte hypertrophy [J]. Circulation，2002，105（4）：509-515.

[15] Hingtgen SD，Tian X，Yang J，et al. Nox2-containing NADPH oxidase and Akt activation play a key role in angiotensin Ⅱ-induced cardiomyocyte hypertrophy [J]. Physiol Genomics，2006，26（3）：180-191.

[16] Byrne JA，Grieve DJ，Bendall JK，et al. Contrasting roles of NADPH oxidase isoforms in pressure-overload versus angiotensin Ⅱ-induced cardiac hypertrophy [J]. Circ Res，2003，93（9）：802-805.

[17] Zhang M，Brewer A C，Schroder K，et al. NADPH oxidase-4 mediates protection against chronic load-induced stress in mouse hearts by enhancing angiogenesis [J]. Proc Natl Acad Sci USA，2010，107（42）：18121-18126.

[18] Griendling KK，Sorescu D，Ushio-Fukai M. NAD（P）H oxidase： role in cardiovascular biology and disease [J]. Circ Res，2000，86（5）：494-501.

[19] Sorescu D，Weiss D，Lassegue B，et al. Superoxide production and expression of nox family proteins in human atherosclerosis [J]. Circulation，2002，105（12）：1429-1435.

[20] Touati S，Montezano ACI，Meziri F，et al. Exercise training protects against atherosclerotic risk factors through vascular NADPH oxidase，ERK1/2 and SAPK/JNK down-regulation in obese rats [J]. Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology，2015，42（2）：179-185.

[21] Xu S，Chamseddine AH，Carrell S，et al. Nox4 NADPH oxidase contributes to smooth muscle cell phenotypes associated with unstable atherosclerotic plaques [J]. Redox Biology，2014，（2）：642-650.

[22] Krijnen PA，Meischl C，Hack CE，et al. Increased Nox2 expression in human cardiomyocytes after acute myocardial infarction [J]. J Clin Pathol，2003，56（3）：194-199.

[23] Fukui T，Yoshiyama M，Hanatani A，et al. Expression of p22-phox and gp91-phox，essential components of NADPH oxidase，increases after myocardial infarction [J]. Biochem Biophys Res Commun，2001，281（5）：1200-1206.

[24] Infanger DW，Cao X，Butler SD，et al. Silencing nox4 in the paraventricular nucleus improves myocardial infarction-induced cardiac dysfunction by attenuating sympathoexcitation and periinfarct apoptosis [J]. Circ Res，2010，106（11）：1763-1774.

[25] Bauersachs J，Galuppo P，F(xiàn)raccarollo D，et al. Improvement of left ventricular remodeling and function by hydroxymethylglutaryl coenzyme a reductase inhibition with cerivastatin in rats with heart failure after myocardial infarction [J]. Circulation，2001，104（9）：982-985.

[26] Qin F，Simeone M，Patel R. Inhibition of NADPH oxidase reduces myocardial oxidative stress and apoptosis and improves cardiac function in heart failure after myocardial infarction [J]. Free Radic Biol Med，2007，43（2）：271-281.

[27] Doerries C，Grote K，Hilfiker-Kleiner D，et al. Critical role of the NAD（P）H oxidase subunit p47phox for left ventricular remodeling/dysfunction and survival after myocardial infarction [J]. Circ Res，2007，100（6）：894-903.

[28] Matsushima S，Kuroda J，Ago T，et al. Broad suppression of NADPH oxidase activity exacerbates ischemia/reperfusion injury through inadvertent downregulation of hypoxia-inducible factor-1alpha and upregulation of peroxisome proliferator-activated receptor-alpha [J]. Circ Res，2013，112（8）：1135-1149.

[29] Carnes CA，Chung MK，Nakayama T，et al. Ascorbate attenuates atrial pacing-induced peroxynitrite formation and electrical remodeling and decreases the incidence of postoperative atrial fibrillation [J]. Circ Res，2001，89（6）：E32-E38.

[30] Mihm MJ，Yu F，Carnes CA，et al. Impaired myofibrillar energetics and oxidative injury during human atrial fibrillation [J]. Circulation，2001，104（2）：174-180.

[31] Zhang J，Youn JY，Kim AY，et al. NOX4-Dependent Hydrogen Peroxide Overproduction in Human Atrial Fibrillation and HL-1 Atrial Cells： Relationship to Hypertension [J]. Front Physiol，2012，3：140.

[32] Chang JP，Chen MC，Liu WH，et al. Atrial myocardial nox2 containing NADPH oxidase activity contribution to oxidative stress in mitral regurgitation： potential mechanism for atrial remodeling [J]. Cardiovasc Pathol，2011，20（2）：99-106.

[33] Kim YM，Guzik TJ，Zhang YH，et al. A myocardial Nox2 containing NAD（P）H oxidase contributes to oxidative stress in human atrial fibrillation [J]. Circ Res，2005，97（7）：629-636.

[34] Wagner S，Dantz C，F(xiàn)lebbe H，et al. NADPH oxidase 2 mediates angiotensin II-dependent cellular arrhythmias via PKA and CaMKⅡ [J]. Journal of Molecular and Cellular Cardiology，2014，75：206-215.

[35] Zhao Z，F(xiàn)efelova N，Shanmugam M，et al. Angiotensin II induces afterdepolarizations via reactive oxygen species and calmodulin kinase Ⅱ signaling [J]. J Mol Cell Cardiol，2011，50（1）：128-136.

[36] Ray R，Murdoch CE，Wang M，et al. Endothelial Nox4 NADPH oxidase enhances vasodilatation and reduces blood pressure in vivo [J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol，2011，31（6）：1368-1376.

[37] Thomas S R，Chen K，Keaney JJ. Hydrogen peroxide activates endothelial nitric-oxide synthase through coordinated phosphorylation and dephosphorylation via a phosphoinositide 3-kinase-dependent signaling pathway [J]. J Biol Chem，2002，277（8）：6017-6024.

[38] Wind S，Beuerlein K，Armitage ME，et al. Oxidative stress and endothelial dysfunction in aortas of aged spontaneously hypertensive rats by NOX1/2 is reversed by NADPH oxidase inhibition [J]. Hypertension，2010，56（3）：490-497.

[39] Paravicini TM，Chrissobolis S，Drummond GR，et al. Increased NADPH-oxidase activity and Nox4 expression during chronic hypertension is associated with enhanced cerebral vasodilatation to NADPH in vivo [J]. Stroke，2004，35（2）：584-589.

[40] Matsuno K，Yamada H，Iwata K，et al. Nox1 is involved in angiotensin II-mediated hypertension：a study in Nox1-deficient mice [J]. Circulation，2005，112（17）：2677-2685.

[41] Jung O，Schreiber JG，Geiger H，et al. Gp91phox-containing NADPH oxidase mediates endothelial dysfunction in renovascular hypertension [J]. Circulation，2004，109（14）：1795-1801.

[42] Dikalova A，Clempus R，Lassegue B，et al. Nox1 overexpression potentiates angiotensin Ⅱ-induced hypertension and vascular smooth muscle hypertrophy in transgenic mice [J]. Circulation，2005，112（17）：2668-2676.

[43] Bendall JK，Rinze R，Adlam D，et al. Endothelial Nox2 overexpression potentiates vascular oxidative stress and hemodynamic response to angiotensin Ⅱ：studies in endothelial-targeted Nox2 transgenic mice [J]. Circ Res，2007，100（7）：1016-1025.

[44] Murdoch CE，Alom-Ruiz SP，Wang M，et al. Role of endothelial Nox2 NADPH oxidase in angiotensin Ⅱ-induced hypertension and vasomotor dysfunction [J]. Basic Res Cardiol，2011，106（4）：527-538.

[45] Brandes RP，Takac I，Schroder K. No superoxide——no stress？：Nox4，the good NADPH oxidase！ [J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol，2011，31（6）：1255-1257.

[46] Peterson JR，Sharma RV，Davisson RL. Reactive oxygen species in the neuropathogenesis of hypertension [J]. Curr Hypertens Rep，2006，8（3）：232-241.

[47] Capone C，F(xiàn)araco G，Park L，et al. The cerebrovascular dysfunction induced by slow pressor doses of angiotensin Ⅱ precedes the development of hypertension [J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2011，300（1）：H397-H407.

[48] Fujii A，Nakano D，Katsuragi M，et al. Role of gp91phox-containing NADPH oxidase in the deoxycorticosterone acetate-salt-induced hypertension [J]. Eur J Pharmacol，2006，552（1-3）：131-134.

[49] Zhang A，Jia Z，Wang N，et al. Relative contributions of mitochondria and NADPH oxidase to deoxycorticosterone acetate-salt hypertension in mice [J]. Kidney Int，2011，80（1）：51-60.

[50] Altenhofer S，Kleikers PW，Radermacher KA，et al. The NOX toolbox： validating the role of NADPH oxidases in physiology and disease [J]. Cell Mol Life Sci，2012，69（14）：2327-2343.

（收稿日期：2015-03-29 本文編輯：蘇 暢）