液基薄層細(xì)胞檢測與HPV—PCR熒光定量分析應(yīng)用于宮頸癌及癌前病變診斷的臨床意義

曹佳萍

[摘要] 目的 探討TCT聯(lián)合HPV-PCR應(yīng)用于宮頸癌及其癌前病變診斷的臨床意義。 方法 對2011年1月～2014年2月期間我院婦科診治的1600例已婚患者進(jìn)行TCT、HPV-PCR檢查，對TCT不明確的不典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）以上、HPV-PCR陽性368例患者再行陰道鏡宮頸多點(diǎn)活檢。 結(jié)果 1600例患者中TCT檢測陽性80例（5.0%），HPV-PCR檢測陽性368例（23.0%）；80例TCT檢測陽性患者，經(jīng)陰道鏡宮頸多點(diǎn)活檢檢查后，54例慢性宮頸炎、6例輕度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅰ）、8例中度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅱ）、10例重度宮頸上皮瘤病變和原位癌（CIN Ⅲ）、2例鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。368例HPV檢測陽性患者，經(jīng)陰道鏡宮頸多點(diǎn)活檢后，307例慢性宮頸炎、27例輕度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅰ）、17例中度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅱ）、13例重度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅲ）、4例鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。 結(jié)論 TCT、HPV-PCR檢查各有優(yōu)缺點(diǎn)，但聯(lián)合檢測具有高效、便捷等優(yōu)勢，能明顯提高宮頸癌及癌前病變的陽性檢出率，可成為宮頸病變篩查的最佳方法。

[關(guān)鍵詞] TCT；HPV-PCR熒光定量分析；宮頸癌；癌前病變

[中圖分類號] R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）17-0038-03

宮頸癌作為婦科比較常見的惡性腫瘤之一，是由宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）逐漸演變?yōu)榻櫚┑倪^程，存在較長的、可逆性癌前病變[1，2]。只有早期篩查、早期診斷宮頸癌及癌前病變，才能更好地指導(dǎo)治療[3]。液基薄層細(xì)胞檢測（TCT）作為宮頸病變的常規(guī)檢測方法，具有信息量大、背景清晰、便于閱讀等諸多優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于宮頸病變的篩查診斷中[4，5]。有研究表明，人乳頭狀瘤病毒（HPV）是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)病的主要原因，HPV-PCR熒光定量分析檢測能夠提高宮頸癌及癌前病變的篩查敏感度[6，7]。而電子陰道鏡在判斷宮頸病變性質(zhì)、范圍、類型方面具有較高的活檢陽性率[8]。本研究選取我院婦科診治的1600例已婚患者進(jìn)行TCT、HPV-PCR檢查，對于TCT不明確的不典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）以上、HPV-PCR陽性患者368例再進(jìn)行陰道鏡宮頸多點(diǎn)活檢，探討TCT聯(lián)合HPV-PCR篩查應(yīng)用于宮頸癌及癌前病變診斷的臨床意義，從而更好地指導(dǎo)早期診斷和治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年1月～2014年2月期間我院婦科診治的1600例已婚女性為研究對象，年齡22.0～67.0歲，平均（42.0±5.0）歲。所有患者均接受TCT、HPV-PCR檢查，對于TCT分級在不典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cells，ASC-US）以上的80例患者及HPV-PCR陽性368例患者，再進(jìn)行陰道鏡宮頸多點(diǎn)活檢。

1.2 檢查方法

無菌棉球擦凈宮頸分泌物，將宮頸刷插入宮頸管順時針轉(zhuǎn)圈后，取出置入細(xì)胞保存液小瓶。

1.2.1 TCT標(biāo)本采集及檢查方法 分離宮頸分泌物標(biāo)本中的黏液、血液、炎性細(xì)胞、上皮細(xì)胞等成分，經(jīng)過制片、人工巴氏染色等相關(guān)處理后鏡下檢查。根據(jù)2001年陰道細(xì)胞學(xué)的分類及報(bào)告細(xì)則（TBS）分為4個級別[5]：正常范圍（WNL）、不明確的不典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）、低度鱗狀上皮內(nèi)瘤變（LSIL）、重度鱗狀上皮內(nèi)瘤變（HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。

1.2.2 HPV-PCR檢查方法 通過PCR反向點(diǎn)雜交法，利用亞能生物技術(shù)深圳有限公司的“人乳頭癌病毒基因分型（23型）檢測試劑盒，檢測18種高危型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83型。專用宮頸管刷，刷取宮頸管內(nèi)脫落細(xì)胞標(biāo)本，移至專用標(biāo)本液中，折斷刷柄，蓋好瓶蓋送檢，經(jīng)HPV-PCR提取、PCR擴(kuò)增、雜交、洗膜、顯色等方法，根據(jù)斑點(diǎn)顯現(xiàn)的有無判斷結(jié)果，依據(jù)藍(lán)色斑點(diǎn)顯現(xiàn)位置判斷HPV基因型，多點(diǎn)顯色即為多重感染。

1.2.3 陰道鏡檢查方法 觀察鱗狀上皮、柱狀上皮交界處上皮組織及血管，3%醋酸涂抹宮頸后，觀察交界處上皮及血管情況，繼而涂抹盧戈氏碘液，不著色組織為陽性區(qū)。觀察陰道鏡圖像、邊界清晰程度、血管擴(kuò)張及毛細(xì)血管間距等情況，在異常圖像或可疑部位取多點(diǎn)活檢?；顧z診斷分為子宮頸黏膜慢性炎、輕度宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN Ⅰ）、中度宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN Ⅱ）、重度宮頸上皮內(nèi)瘤變（CINⅢ）和宮頸癌。對于TCT檢測陽性、HPV檢測陽性、陰道鏡圖像異?；颊撸幍犁R下宮頸多點(diǎn)活檢。

2 結(jié)果

2.1 TCT檢查結(jié)果

1600例患者中TCT檢測陽性80例（5.0%），包括ASC-US、LSIL、HSIL3個級別的細(xì)胞，無SCC檢出。其中，組織病理學(xué)檢查（CIN+SCC）共26例（32.5%），見表1。

2.2 高危型HPV-PCR檢查結(jié)果

1600患者中368例HPV-PCR檢測陽性（23.0%），其中55例（14.9%）診斷為高危型陽性HPV，313例（85.1%）診斷為高危型陰性HPV，見表2。

表2 368例高危型HPV-PCR檢查及其病理學(xué)檢查結(jié)果[n（%）]

2.3 HPV-PCR高危型、TCT檢測結(jié)果比較

368例HPV-PCR高危型標(biāo)本中，經(jīng)過病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，其中55例高危型陽性和26例TCT陽性，19例中HPV-PCR與TCT檢查均為陽性，306例HPV-PCR與TCT檢查均為陰性，見表3。

表3 HPV-PCR高危型、TCT檢測結(jié)果比較

3 討論

宮頸癌作為目前危及婦女健康和安全的常見惡性腫瘤，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，多數(shù)患者就診時已經(jīng)處于晚期，極大地威脅患者的生命安全[9]。因此，早期發(fā)現(xiàn)、早期治療宮頸癌及癌前病變對于宮頸癌的防治具有非常重要的臨床意義[10，11]。

TCT通過TBS細(xì)胞學(xué)分類診斷標(biāo)準(zhǔn)對宮頸細(xì)胞進(jìn)行診斷，是宮頸疾病的常規(guī)檢查方法[12]。但是，鱗狀上皮、柱狀上皮交界處細(xì)胞不好采集，導(dǎo)致篩查敏感度降低，容易出現(xiàn)漏診。有報(bào)道稱，人乳頭瘤病毒（HPV）是宮頸癌的主要致病因素[13]。HPV-PCR病原學(xué)檢查已成為宮頸癌早期診斷的篩查方法，適用于宮頸癌病變前期的廣泛篩查[14]。但是，部分感染HPV的婦女在自身免疫清除HPV病毒作用下，僅有少數(shù)進(jìn)展為宮頸癌，所以，HPV-PCR篩查宮頸癌的檢查方法具有一定程度的局限性[15]。本研究中，1600例患者中TCT檢測陽性80例（5.0%），HPV-PCR檢測陽性368例（23.0%），結(jié)果表明HPV-PCR的檢測陽性率相對較高。

本研究中，80例TCT檢測陽性患者，經(jīng)陰道鏡宮頸多點(diǎn)活檢后，54例慢性宮頸炎、6例輕度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅰ）、8例中度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅱ）、10例重度宮頸上皮瘤病變和原位癌（CIN Ⅲ）、2例鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。368例HPV檢測陽性患者，經(jīng)陰道鏡宮頸多點(diǎn)活檢后，307例慢性宮頸炎、27例輕度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅰ）、17例中度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅱ）、13例重度宮頸上皮瘤病變（CIN Ⅲ）、4例鱗狀細(xì)胞癌（SCC），結(jié)果表明陰道鏡、TCT、HPV-PCR檢查作為宮頸癌及癌前病變篩查的重要檢查方法，相互之間具有互補(bǔ)作用[16]。

陰道鏡直視下宮頸多點(diǎn)活檢是宮頸癌檢查的金標(biāo)準(zhǔn)，但是該檢查方法具有一定的創(chuàng)傷性，一定程度上影響其臨床應(yīng)用范圍。陰道鏡直視下宮頸多點(diǎn)活檢能夠有效提高宮頸疾病的敏感度，避免活檢取材的盲目性[17]。對于TCT不明確的不典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）以上、HPV-PCR陽性患者，進(jìn)行陰道鏡宮頸多點(diǎn)活檢[18-20]。

總而言之，HPV-PCR檢查雖然具有較高的檢出率，但是其檢查費(fèi)用相對較貴，而TCT檢查操作簡單、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，因此，HPV-PCR和TCT檢查作為宮頸癌及癌前病變篩查的重要檢查方法，相互之間具有互補(bǔ)作用，在患者經(jīng)濟(jì)條件許可的情況下，建議聯(lián)合檢查。TCT、HPV-PCR聯(lián)合檢測能夠取長補(bǔ)短，提高宮頸癌及癌前病變的陽性檢出率，降低臨床漏診率。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 許敏，余倩. 分析宮頸刮片聯(lián)合陰道鏡檢查在宮頸病變篩查中的價值[J]. 中國內(nèi)鏡雜志，2013，19（8）：866-868.

[2] Zhu J，Lin Y，Ruan HB，et al. Value of high risk human papilloma virus detection in screening and diagnosing cervical lesion in littoral of zhejiang province[J]. Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi，2013，27（3）：212-214.

[3] 李敬巍，趙俊紅，程建英，等. 宮頸病變四種檢查方法臨床應(yīng)用價值分析[J]. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2010，19（7）：518-522.

[4] 胡芳艷，金志紅，劉國華，等. 液基細(xì)胞、HPV 檢測與陰道鏡宮頸癌的篩查方面的應(yīng)用研究[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，13（6）：1130-1133.

[5] Sun XF，Gu YQ，Wang AC，et al. Value assessment of high-risk HPV test and TCT in the screening of cervical carcinoma[J]. Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi，2013，27（4）：273-276.

[6] 何偉華. TCT 和陰道鏡與TCT、HPV 和陰道鏡在宮頸癌篩查中應(yīng)用體會[J]. 中外婦兒健康，2011，19（40）：194-196.

[7] 廖秦平. 要真正理解和重視人乳頭瘤病毒感染[J]. 中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2010，26（5）：321-323.

[8] 金紅雁，黃惠娟，陸紅梅，等. HPV、TCT及陰道鏡對宮頸癌篩查的意義[J]. 中國婦幼保健，2010，25（2）：4307-4308.

[9] 王會娟，劉玉玲，湯福想. TCT檢查、HPV檢測及陰道鏡檢查在宮頸癌篩查中的應(yīng)用[J]. 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2011， 5（4）：14-15.

[10] 余苑婷. HPV、TCT檢查聯(lián)合陰道鏡下活檢篩查宮頸病變[J]. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，8（7）：702-705.

[11] Wang JL，Yang YZ，Dong WW，et al. Application of human papillomavirus in screening for cervical cancer and precancerous lesions[J]. Asian Pac J Cancer Prev，2013， 14（5）：2979-2982.

[12] 徐紅. 液基薄層細(xì)胞檢測聯(lián)合陰道鏡檢查在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價值分析[J]. 中國內(nèi)鏡雜志，2013，19（7）：729-731.

[13] 郭芝亮. 宮頸HPV-DNA聯(lián)合陰道鏡檢查在宮頸癌早期篩查中的臨床應(yīng)用[J]. 醫(yī)學(xué)綜述，2013，23（19）：4411-4413.

[14] 郭柳薇，郭豪. TCT、HPV-PCR和陰道鏡檢查在宮頸癌疾病診斷中的應(yīng)用研究[J]. 中國婦幼保健，2013，28（22）：3687-3689.

[15] 馮玲，楊湖珍. TCT、PV-DNA分型及陰道鏡在宮頸癌篩查中的應(yīng)用[J]. 當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2013，25（19）：19-21.

[16] 蘇雅潔，景竹春，樸淑娜，等. TCT和陰道鏡活檢在宮頸癌前病變診斷中的價值[J]. 中外醫(yī)學(xué)研究，2010，8（2）：3-4.

[17] 王方. 高危型人乳頭瘤病毒檢測聯(lián)合液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸癌篩查中的臨床價值[J]. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，9（6）：443-444.

[18] 黎哲斌，魏換娣. TCT、HPV-PCR和陰道鏡在宮頸癌疾病診斷中的應(yīng)用研究[J]. 分子診斷與治療雜志，2011， 3（6）：107-108.

[19] 景笑笑，楊雪峰. TCT、HPV、陰道鏡下活體組織檢查及LEEP術(shù)在宮頸疾病篩查中的臨床價值[J]. 中國婦幼保健，2012，27（3）：617-619.

[20] HK E，Vourlekis B，Xie B，et al. Cancer treatment adheren ceamong low-in come women with breast or gynecologic caner：a randomized controlled trial of patient navigation[J]. Cancer，2009，115（19）：4606-4615.

（收稿日期：2015-04-28）