骨髓血細胞形態(tài)淺談

血細胞發(fā)生是造血干細胞經(jīng)增殖、分化直至成為各種成熟血細胞的過程。造血干細胞是生成各種血細胞的原始細胞，又稱多能干細胞。造血干細胞在一定的微環(huán)境和某些因素的調(diào)節(jié)下，增殖分化為各類血細胞的祖細胞，稱造血祖細胞，它也是一種相當原始的具有增殖能力的細胞，但已失去多向分化能力，只能向一個或幾個血細胞系定向增殖分化，故也稱定向干細胞血細胞形態(tài)學檢驗是指應用光學顯微鏡辨認經(jīng)瑞氏染色后的外周血和骨髓涂片的細胞形態(tài)，可以了解骨髓中血細胞的生成、成熟、釋放的程度及病理細胞形態(tài)或異常細胞出現(xiàn)的意義，是血液病基礎診斷與常規(guī)血液學檢驗的重要項目，是最基本的簡便實用的檢查方法。此方法雖然較為傳統(tǒng)，但血細胞形態(tài)學檢驗的質(zhì)量高低是許多疾病尤其是血液病的診斷、鑒別診斷及預后判斷的關鍵[1]。而血細胞形態(tài)學檢驗的主觀性較強，檢驗人員需要積累豐富的工作經(jīng)驗才能勝任。

1臨床資料

1.1正確的取材部位 骨髓穿刺理想部位是髂后上棘和髂前上棘處進行，因為其髓腔比較大髓液較豐富，比較容易獲得符合要求的骨髓標本，且此處易定位和操作。骨髓造血呈所謂向心學說分布，造血組織往往分布不均，且某些病變只局限于局部，所以對一些疑難病例最好是多部位穿刺或取骨髓活檢。

1.2合適的取材量及滿意的涂片制作 骨髓取材嚴格來講是難以有滿意的結果，因為灶性造血影響骨髓稀釋[2]。根據(jù)報導記載，抽0.1～0.2 ml的骨髓，仍有可能混入50%的外周血。根據(jù)筆者的經(jīng)驗抽取0.5 ml左右是最為理想的，抽取骨髓后，將髓液置于玻片一端，然后在其下墊兩張玻片，使髓液自然流下，再用推片取黏稠部分，體積大、密度大的有核細胞及帶骨髓小粒的部分涂片，涂片要求厚薄均勻，頭體尾明顯，手持玻片迅速搖動使其風干。這就要求操作者動作熟練，經(jīng)驗豐富。傳統(tǒng)的方法對操作者要求比較高，如果動作慢，易造成骨髓凝固，從而使細胞分布不均而影響到鏡檢結果。

2 骨髓涂片由于要用油鏡仔細觀察細胞的細微結構，所以對染色質(zhì)量要求很高

2.1載玻片的清潔 新購置的載玻片用1%的稀鹽酸浸泡24 h，除去游離堿質(zhì)，再用流水沖洗干凈，必要時用95%乙醇浸泡1 h，然后烘干備用。

2.2染液及染色方法的選擇 在保證標本及染液質(zhì)量前提下，染色技術直接影響骨髓片的質(zhì)量。要根據(jù)染色時室溫高低，涂片厚薄，有核細胞數(shù)量多少等不同來確定染色時間，可將帶染液的玻片置于顯微鏡下觀察，當有核細胞著色良好再染上1～2 min為好，這就要求操作者具體分析，靈活掌握。

2.3骨髓涂片的觀察 首先用低倍鏡觀察整張涂片。觀察涂片染色是否合格，了解骨髓有核細胞的增生程度，計數(shù)全片巨核細胞數(shù)，尤其是注意觀察片尾及周邊部位有無異常細胞。用油鏡觀察細胞形態(tài)、比例、分類計數(shù)等。選擇涂片上有核細胞分布均勻、形態(tài)舒展、清晰可辨的部位進行觀察和分類。至少分類計數(shù)200個有核細胞，必要時分類500個。當辯認某一類不典型細胞時，單純靠形態(tài)學是有一定欠缺的，應配合相應的組織化學染色來確定，特別是在區(qū)分一些急性白血病時，組織化學染色起了重要的鑒別作用。

3幾種主要血細胞正常形態(tài)

3.1粒細胞系統(tǒng)形態(tài)

3.1.1原始粒細胞 胞體圓形或類橢圓形。胞核較大，約占細胞的2/3以上，核染色質(zhì)呈細粒狀，排列均勻，無濃集，核膜較模糊。核仁2～5個，較小，清楚。胞質(zhì)量少，呈透明天藍色，繞于核周，無顆粒。

3.1.2早幼粒細胞 胞體圓或橢圓形。胞核大，核染色質(zhì)較原粒粗糙，核仁可見或消失。胞質(zhì)量較多，呈淡藍、藍或深藍色，漿內(nèi)含紫紅色非特異性的天青胺藍顆粒。

3.1.3中幼粒細胞 ①中性中幼粒細胞：胞體圓形。胞核橢圓形或一側開始扁平，染色質(zhì)聚集成索塊狀，核仁消失。胞質(zhì)量多，內(nèi)含中等量、大小較一致的特異的中性顆粒。②嗜酸性中幼粒細胞：胞核與中性中幼粒細胞相似。胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大、均勻、排列緊密、桔紅色的特異的嗜酸性顆粒。③嗜堿性中幼粒細胞：胞核橢圓形，輪廓不清楚，核染色質(zhì)較模糊。胞質(zhì)內(nèi)及核上含有數(shù)量不多、排列零亂、大小不等的紫黑色特異的嗜堿性顆粒。

3.1.4晚幼粒細胞 ①中性晚幼粒細胞：呈圓形，胞核明顯凹陷，但其凹陷程度一般不超過核假設直徑的一半。核染色質(zhì)粗糙，排列更緊密。胞質(zhì)量多，染淺紅色，充滿中性顆粒。②嗜酸性晚幼粒細胞：胞核在中央或偏一側，呈腎形或橢圓形。胞質(zhì)充滿著嗜酸性顆粒。③嗜堿性晚幼粒細胞：胞核固縮呈腎形，輪廓模糊。胞質(zhì)內(nèi)及核上含有少量、分布不勻的嗜堿性顆粒。

3.1.5桿狀核粒細胞 ①中性桿狀核粒細胞：胞體圓形。胞核凹陷程度超過核假設直徑的一半，形態(tài)彎曲成帶狀，核染色質(zhì)粗糙呈塊狀，核兩端鈍圓染深紫紅色。胞質(zhì)充滿中性顆粒。②嗜酸性桿狀核粒細胞：胞體圓形。胞核與中性桿狀粒細胞相似。胞質(zhì)充滿著粗大的桔紅色嗜酸性顆粒。③嗜堿性桿狀核粒細胞：胞核呈模糊桿狀。胞質(zhì)內(nèi)及胞核上含有紫黑色、大小不勻、數(shù)量較少的嗜堿性顆粒。

3.1.6分葉核粒細胞 ①中性分葉核粒細胞：胞體圓形。胞核分葉狀，常分2～5葉，核染色質(zhì)濃集或呈較多小塊。胞質(zhì)豐富，漿內(nèi)分布著細小紫紅色中性顆粒。②嗜酸性分葉核粒細胞：胞核多分為兩葉。胞質(zhì)充滿著粗大呈桔紅色嗜酸性顆粒。③嗜堿性分葉核粒細胞：胞核可分3～4葉或分葉不明顯。胞質(zhì)嗜堿性顆粒呈紫黑色，大小不一，分布不均，常掩蓋在核上。

3.2紅細胞系統(tǒng)形態(tài)

3.2.1原始紅細胞 圓形或橢圓形，邊緣常有鈍角狀或瘤狀突起。胞核圓形、居中或稍偏于一旁，約占細胞直徑的4/5，核染色質(zhì)呈顆粒狀，比原始粒細胞粗而密，核仁1～2個，胞質(zhì)量少，深藍色，不透明，在核周圍常形成淡染區(qū)。

3.2.2早幼紅細胞 圓形或橢圓形。胞核圓或橢圓形，占細胞2/3以上，核染色質(zhì)可濃集成粗密的小塊，核仁模糊或消失，胞質(zhì)量多，染不透明藍或深藍色，仍可見瘤狀突起及核周淡染區(qū)。

3.2.3中幼紅細胞 圓形。胞核圓形或橢圓形，約占細胞的1/2，核染色質(zhì)凝聚成索條狀或塊狀，其中有明顯空隙，核仁消失。胞質(zhì)內(nèi)血紅蛋白形成逐漸增多，可呈嗜多色性。

3.2.4晚幼紅細胞 圓形，胞核圓形，居中或偏位，占細胞1/2以下，核染色質(zhì)聚集成數(shù)個大塊或凝縮成紫黑色團塊狀，胞質(zhì)量較多，淺灰或淺紅色。

3.2.5網(wǎng)織紅細胞 為晚幼紅細胞剛脫核的分化階段，胞質(zhì)內(nèi)仍含嗜堿物質(zhì)，屬未成熟紅細胞。

3.2.6紅細胞 形態(tài)呈雙面微凹之圓盤狀，中央較薄，邊緣較厚，染色后呈淡紅略帶紫色，中央部分淡染，無核。

3.3血小板 胞體很小，呈星形、橢圓形、逗點狀或不規(guī)則形。胞質(zhì)染淺藍色或淡紅色，中心部位有細小紫紅色顆粒，但無細胞核。

參考文獻：

[1]朱偉，許文榮.血細胞形態(tài)學質(zhì)量控制[J].臨床檢驗雜志，2008，26（1）：1.

[2]郭小平.血細胞形態(tài)學檢驗質(zhì)量控制及臨床意義[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2004，13（22）：92.

編輯/申磊