間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法檢測HPV疫苗免疫原性的相關(guān)性

摘要：目的 分析間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法檢測HPV疫苗免疫原性的相關(guān)性。方法 選取醫(yī)院2013年4月～2014年1月收治的100例HPV感染患者，并選擇同期接受HPV16/18型雙價疫苗（Cervarix）免疫自然感染的患者100例，抽取其血清作為研究標(biāo)本，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法和假病毒中和法對血清樣本進(jìn)行抗體滴度檢測。結(jié)果 對于自然感染HPV病毒檢測結(jié)果方面，其血清樣本HPV16型抗體的滴度系數(shù)為0.519，HPV18型滴度系數(shù)為0.613，而對于接種疫苗后血清樣本中，去HPV16型抗體滴度系數(shù)達(dá)到0.671，HPV18型為0.879，兩組檢測方法在進(jìn)行HPV疫苗免疫原性檢測中具有相關(guān)性（P<0.05）。結(jié)論 在臨床中，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法，對檢測血清樣本中抗HPV疫苗免疫原性有較好相關(guān)性。

關(guān)鍵詞：假病毒中和法；間接酶聯(lián)免疫吸附法；HPV疫苗免疫原性

據(jù)相關(guān)醫(yī)學(xué)方面文獻(xiàn)報道，高危性人乳頭瘤病毒（HPV），臨床發(fā)生感染極其容易引起患者發(fā)生宮頸癌疾?。粚Υ丝梢詰?yīng)用HPV預(yù)防性疫苗，在臨床預(yù)防HPV感染方面發(fā)揮一定影響[1]。本研究分析了臨床間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法檢測HPV疫苗免疫原性的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料 針對在醫(yī)院2013年4月～2014年1月收治100例HPV感染患者，以及接受HPV16/18型雙價疫苗（Cervarix）免疫后的100例自然感染患者，將其作為本次研究對象，抽取患者的血清，在對樣本進(jìn)行隨機(jī)編號后，比較間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法檢測血清樣本中HPV疫苗免疫原性的相關(guān)性。

1.2方法 間接酶聯(lián)免疫吸附法檢測中，可以將HPV 16 VLP與HPV18 VLP，將其分別稀釋為2.7 ug/ml，然后，可以對于每孔的100 μl包被，將其放置在4℃酶標(biāo)板上，孵育3 d，然后可以用0.2%PBST進(jìn)行洗滌；在三遍之后可加入PBS，并在室溫內(nèi)封閉90 min之后，再洗滌4次；并運用0.36N硫酸終止顯色反應(yīng)后，將其防治在96孔板中，進(jìn)行讀數(shù)，并設(shè)定其波長參數(shù)450 nm，參比波長為620 nm?？梢杂肧oftMax Pro 5.2版本軟件，擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，被計算出標(biāo)本血清抗體的滴度。

假病毒中和法檢測中，可以將1.5×104個/孔人293FT細(xì)胞，接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，然后放置在37℃的恒溫環(huán)境之中，并培養(yǎng)8 h后，將血清進(jìn)行10%DMEM稀釋，并同時能夠在96孔板對倍稀釋8個不同梯度的稀釋液，取60 μl的稀釋血清樣本，稀釋到MOI=0.2范圍，然后可以在4℃環(huán)境內(nèi)進(jìn)行孵育1 h，并去除100 μl血清與假病毒的混和液，加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板之中，在熒光顯微鏡下進(jìn)行結(jié)果觀察，分析檢測結(jié)果。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 對于本次研究結(jié)果處理，可以采用統(tǒng)計學(xué)SSPS 20.0版本軟件，采用Pearman相關(guān)性分析ELISA法和PBNS法測定的抗體值，且以結(jié)果P<0.05來表示具有統(tǒng)計意義。

2結(jié)果

采用Pearman相關(guān)性分析，對臨床間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法測量的血清滴度進(jìn)行統(tǒng)計分析，見圖1。

臨床中，在間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法檢測血清的樣本之中，其中對于自然感染的HPV病毒血清樣本，其中的HPV16型抗體滴度相關(guān)系數(shù)為0.519，HPV18型相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.613，在接種疫苗后的血清樣本檢測之中，HPV16型的抗體滴度相關(guān)系數(shù)0.671，HPV18型為0.879其，兩組檢測方法在進(jìn)行HPV疫苗免疫原性檢測中具有相關(guān)性（P<0.05）。

3 討論

相關(guān)研究中指出，基于HPV疫苗，不僅是一種具有誘導(dǎo)型與特異性的中和抗體，同時，在臨床中也可以有效的保護(hù)機(jī)體免疫力，使機(jī)體免受到病毒的侵害[3]。采取間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法，檢測同一批樣本，比較分析檢測結(jié)果，可以為疫苗免疫原性評價提供參考依據(jù)[4]。在檢測血清樣本中抗HPV疫苗免疫原性方面，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法，為進(jìn)一步臨床評價HPV疫苗免疫效果提供參考。間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法在檢測HPV疫苗原性方面，有相關(guān)性（P<0.05）。在HPV疫苗的免疫原性評價中，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法，檢測不同時間點接種HPV疫苗后的血清樣本，臨床相關(guān)性較高[5]。

本研究結(jié)果充分證實，針對HPV感染中，應(yīng)用間接酶聯(lián)免疫吸附法與假病毒中和法，在檢測HPV疫苗免疫原性方面具有相關(guān)性，可見采取HPV疫苗預(yù)防可發(fā)揮重要作用。

參考文獻(xiàn)：

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