并發(fā)根尖周炎對根管治療患者持續(xù)性根尖周感染影響的研究

王景暉，石靈萍，劉志壽

（甘肅臨夏州人民醫(yī)院 口腔科，甘肅 臨夏731100）

研究已證實[1]，口腔中約有500多種細菌，不注意口腔清潔者的口腔內(nèi)的細菌達到1萬億個。一般而言，如果口腔細菌微生態(tài)破壞，則會使根尖周嚴重損傷而無法恢復。臨床上反復根管治療仍不能有效清除的根內(nèi)感染為持續(xù)性根尖周感染。研究證實[2]，根管內(nèi)外微生物是引起持續(xù)性根尖周感染的主要原因。在此背景下，本研究即探討根管治療后并發(fā)根尖周炎對患者持續(xù)性根尖周感染病原菌的影響，為其研究提供可參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2011年1月-2014年10月來我院行根管治療的患者作為研究對象，男38例，女42例，年齡（60～75）歲，平均（64.3±3.1）歲，診斷符合1999年牙周病分類國際研討會制定的標準[3]。根據(jù)治療后是否伴發(fā)根尖周炎分為并發(fā)組40例與未并發(fā)組40例，兩組性別、年齡等基本資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

納入標準：患牙均為單根牙，根尖周炎穩(wěn)定期，無牙髓炎癥，探診深度（probing depth，PD）<3mm，無附著喪失（attachment loss，AL）及牙槽骨吸收。排除標準：根尖周炎急性發(fā)作期，PD≥6mm，AL≥4 mm，根尖X線片示有鄰面牙槽骨吸收，結(jié)締組織病，惡性腫瘤，吸煙史，近3個月行牙周治療或服用抗生素等。所有患者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

唾液采集前清水漱口，生理鹽水清除食物殘渣，吹干后棉球隔濕、碘酊棉球消毒。在無刺激條件下留取唾液。放于培養(yǎng)基，4℃厭氧袋中保存，1 h內(nèi)送檢行細菌培養(yǎng)。以1mm直徑取菌環(huán)于培養(yǎng)基上，給予相應(yīng)的溫度及pH值，培養(yǎng)48 h后取合適的菌落進行鑒定。在×1 000顯微鏡下計數(shù)200個菌細胞，共分為球菌、桿菌、梭狀菌、絲狀菌、彎曲菌和螺旋體6類，以百分比表示。將轉(zhuǎn)種培養(yǎng)基分別接種于牛心腦浸液培養(yǎng)基和胰蛋白酶大豆血瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)，條件：氮氣N2為80%、二氧化碳CO2為10%和氫氣H2為10%的無氧環(huán)境，37℃培養(yǎng)3～7 d。分析牙齦卟啉單胞菌（porphyromonas gingivalis，Pg）、核梭桿菌（fusobacterium nucleatum，F(xiàn)n）、福塞氏類桿菌（bacteroides forsythus，Bf）和放線桿菌（actinobacillus pleuropneumoniae，Aa）的檢出率。并采用全自動生化儀檢測堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性。

1.3 統(tǒng)計學方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行處理。數(shù)據(jù)資料經(jīng)正態(tài)性檢驗，符合正態(tài)分布數(shù)據(jù)的計量資料采用（±s）表示，兩組間的比較采用獨立樣本t檢驗；非正態(tài)分布資料采用中位數(shù)表示，采用秩和檢驗；計數(shù)資料以構(gòu)成比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗或者精確概率法。P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組患者致病菌分布情況

不同組患者致病菌分布情況結(jié)果顯示：并發(fā)組檢出20個菌門，未并發(fā)組檢出18個菌門。兩組患者檢出菌屬構(gòu)成比比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；并發(fā)組放線菌門構(gòu)成比明顯高于未并發(fā)組（P<0.05）；其他菌門構(gòu)成比比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2 不同組患者致病菌培養(yǎng)情況

不同組患者致病菌培養(yǎng)情況結(jié)果顯示：并發(fā)組Aa檢出率明顯高于未并發(fā)組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；但兩組Pg、Fn和Bf檢出率比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表2。

2.3 不同組患者唾液ALP活性情況分析

不同組患者唾液ALP活性情況結(jié)果顯示：并發(fā)組患者唾液ALP活性明顯高于未并發(fā)組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表3。

表1 不同組患者致病菌分布情況

表2 不同組患者致病菌培養(yǎng)情況

表3 不同組患者唾液ALP活性情況分析（μU/30 s，±s）

表3 不同組患者唾液ALP活性情況分析（μU/30 s，±s）

組別 例數(shù) ALP并發(fā)組 40 194.32±56.65未并發(fā)組 40 150.45±89.12 t值 3.938 P值 0.000

3 討論

臨床上根尖周病是指局限于根尖部的牙周組織，包括牙骨質(zhì)、牙周膜和牙槽骨的炎癥[3]。目前根尖周感染主要采用根管治療，其主要是通過清除根管內(nèi)的壞死或壞疸物質(zhì)，進行適當?shù)南?，并根管充填去除不良刺激，促進尖周病變愈合。研究發(fā)現(xiàn)[4]，根管治療根尖周病的成功率為86.00%～98.00%，有部分患者根管治療療效不佳，甚至反復多次治療仍未痊愈，成為持續(xù)性根尖周感染。凌均柴等[5]研究認為，根管中細菌滯留是引起持續(xù)性根尖周感染的主要原因。因此，更好的了解根管治療后是否并發(fā)根尖周炎患者根管內(nèi)的細菌情況，可促進研究持續(xù)性根尖周感染的發(fā)生機制。

本研究分析根管內(nèi)致病菌分布情況發(fā)現(xiàn)，并發(fā)組檢出20個菌門，未并發(fā)組檢出18個菌門。兩組厚壁菌門、變形菌門、放線菌門所占比例均比較高，在前3位。但并發(fā)組放線菌門構(gòu)成比明顯高于未并發(fā)組，其他菌門構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學意義?？梢娛欠癫l(fā)根尖周炎對根管內(nèi)菌類分布產(chǎn)生影響，放線菌門比例增高可能增加并發(fā)根尖周炎發(fā)生風險。王娟等[6]進行類似研究發(fā)現(xiàn)，檢出132種細菌，分屬于21個菌門和96個菌屬。在門水平，伴根尖周炎組群落的主要菌門為厚壁菌門[32%（18 534/58 688）]、變形菌門[27%（15 626/58 688）]、放線菌門[15%（8 685/58 688）]和梭桿菌門[8%（4 761/58 688）]；無根尖周炎組群落的主要菌門為厚壁菌門[3l%（16 941/55 480）]、變形菌門[27%（14 748/55 480）]、梭桿菌門[10%（5 307/55 480）]和放線菌門[9%（4761/55 480）]，兩組比較伴根尖周炎組放線菌門比例明顯高于無根尖周炎組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），與本研究結(jié)果相似。

本研究進一步分析致病菌培養(yǎng)情況發(fā)現(xiàn)，并發(fā)組Aa檢出率明顯高于未并發(fā)組?？梢夾a比例的增高可能與持續(xù)性根尖周感染存在相關(guān)性。李欣[7]通過變性梯度凝膠電泳技術(shù)分析根管治療后伴發(fā)根尖周炎對根管內(nèi)細菌影響發(fā)現(xiàn)，無論是否伴發(fā)根尖周炎根管內(nèi)均可檢測到細菌定植，但不同菌類構(gòu)成比有差異，但該研究未進一步通過定性分析了解細菌種類。SETZER等[8]通過基因豐度檢測發(fā)現(xiàn)，放線菌屬在伴根尖周炎組菌群中的豐度和檢出率分別為6.00%和100.00%，而在無根尖周炎組中分別為2.00%和50.00%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。分析認為臨床上Aa感染可表現(xiàn)為慢性肉芽腫，可伴有瘺道形成，其可有硫磺顆粒形成[9]，與持續(xù)性根尖周感染有相似表現(xiàn)。目前關(guān)于Aa在持續(xù)性根尖周感染中的作用機制尚不明確，其可能與Aa的黏附力、共聚能力以及逃避宿主免疫反應(yīng)有關(guān)。Aa有發(fā)達的菌絲，可以與其他細菌發(fā)生共聚而形成生物膜樣屏障，進而可以避免根管治療中沖洗等操作的影響[10]；此外生物膜樣屏障亦可保護Aa進而逃避宿主免疫反應(yīng)[11]。有研究認為[12]，Aa較強的生存能力可以使其在根管治療后根管內(nèi)低營養(yǎng)環(huán)境中長期生存。

ALP是一種能夠?qū)?yīng)底物去磷酸化的磷酸酶，可以進行去磷酸化作用，在堿性環(huán)境下最為有效[13]。本研究分析不同組患者唾液ALP活性情況發(fā)現(xiàn)，并發(fā)組患者唾液ALP活性明顯高于未并發(fā)組。分析可能與Aa可以促進牙周組織溫度、pH值升高，抑制正常有益菌活性，引起ALP分泌增加。

綜上所述，本研究顯示，根管治療后伴發(fā)根尖周炎可引起根管內(nèi)細菌比例改變，放線菌與根管治療后持續(xù)性根尖周感染存在相關(guān)性。

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