A激酶錨定蛋白4在人非小細胞肺癌中的表達

宣麗穎　王　永　趙　明　呼　和　宋葆華　湯文莉　寶魯爾　林　琳　劉月英

(內蒙古民族大學醫(yī)學院生理與病生教研室，內蒙古　通遼　028043)

?

A激酶錨定蛋白4在人非小細胞肺癌中的表達

宣麗穎王永1趙明2呼和3宋葆華湯文莉寶魯爾林琳劉月英

(內蒙古民族大學醫(yī)學院生理與病生教研室，內蒙古通遼028043)

摘要〔〕目的探討A激酶錨定蛋白4(AKAP4)在人非小細胞肺癌(NSCLC)組織中的表達及其臨床意義。方法免疫組織化學方法檢測AKAP4在人NSCLC組織中的表達情況。結果免疫組織化學結果顯示AKAP4在人NSCLC組織中的表達陽性率為86.4%(19/22)，而在活檢的正常氣管及肺組織中陰性表達，二者表達水平具有顯著性差異(P<0.05)。 結論AKAP4在人NSCLC組織中具有較高的表達水平，可以成為潛在的病理指標及免疫治療靶點，具有重要的臨床意義。

關鍵詞〔〕非小細胞肺癌；A激酶錨定蛋白4；免疫組織化學

1通遼市科爾沁區(qū)第一人民醫(yī)院心胸外科

2內蒙古民族大學附屬醫(yī)院心內科

3內蒙古民族大學醫(yī)學院解剖教研室

第一作者：宣麗穎(1983-)，女，講師，主要從事心血管生理研究。

非小細胞型肺癌(NSCLC)包括鱗狀細胞癌(鱗癌)、腺癌、大細胞癌，與小細胞癌相比其癌細胞生長分裂較慢,擴散轉移相對較晚。NSCLC約占所有肺癌的80%，約75%的患者發(fā)現(xiàn)時已處于中晚期，5年生存率很低，肺癌是發(fā)病率和死亡率增長最快〔1〕。肺癌的早期診斷有賴于痰脫落細胞及氣管鏡下的組織活檢。A激酶錨定蛋白4(AKAP4)被發(fā)現(xiàn)高度表達于前列腺癌組織中。本文擬探討AKAP4在人NSCLC組織中的表達及其臨床意義〔2〕。

1材料與方法

1.1標本及病理觀察選用22例病理明確診斷的人NSCLC的組織標本，進行常規(guī)的固定、包埋、切片及蘇木素-伊紅(HE)染色。年齡45～72歲。男例，女例。此外，選取氣管鏡活檢獲得的18例氣管及肺組織作為對照組織。

1.2免疫組織化學將人NSCLC的組織標本及對照組織以磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗。以0.3%過氧化氫處理組織5 min封閉內源性過氧化物酶。以0.15%的Triton-X100的PBS漂洗樣品，并用封閉緩沖液(5%FBS + 0.05%Triton20的PBS)中和1 h，然后用第一抗體溫育(封閉緩沖液10 μg/ml)1 h。然后用封閉緩沖液3次洗滌標本(每次5 min)，將樣品與第二抗體溫育(封閉緩沖液2 μg/ml)，1 h。 HRP-DAB反應進行5 min后，PBS洗滌標本，最后終止液終止反應。用奧林巴斯X71倒置顯微鏡觀察結果。第一抗體為山羊抗AKAP4(圣克魯斯)；二抗(HRP-連接)來自Abcam公司。

1.3結果判定每個標本觀察隨機的10個高倍視野。平均陽性細胞總數(shù)在50%以上視為陽性。

1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS11.0軟件，計數(shù)資料行χ2檢驗。

2結果

免疫組織化學結果顯示AKAP4在人NSCLC組織中的表達陽性率為86.4%(19/22)。而在18例活檢的正常氣管及肺組織中陰性表達，二者表達水平差異顯著(P<0.05)。 可見，AKAP4在人NSCLC組織中具有較高的表達水平，而在正常氣管及肺組織無表達，可以成為潛在的病理診斷指標，具有重要的臨床意義。

3討論

近50年來許多國家都報道肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高，男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的第1位；女性發(fā)病率占第2位，死亡率占第2位。肺癌的病因至今尚不完全明確，大量資料表明，老年人口中既往長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關系。有報道顯示，肺癌組織中AKAP95高度表達〔3〕。本研究證實肺癌組織中AKAP95相對于正常肺組織，AKAP4被異常表達于NSCLC組織樣品中。筆者的研究結果證明AKAP4表達于人類非小細胞肺原發(fā)腫瘤，對于病理診斷及分型有著重要意義，同時也為肺癌患者的免疫治療提供新的靶點，為提高免疫治療的療效和減少目前的治療的副作用提供基礎〔4〕。

參考文獻4

1Siegel R,Naishadham D,Jemal A.Cancer statistics,2012〔J〕.CA Cancer J Clin,2012；62(1):10-29.

2Chiriva-Internati M,Yu Y,Mirandola L,etal.Dentification of AKAP-4 as a new cancer/testis antigen for detection and immunotherapy of prostate cancer〔J〕.Prostate,2012；72(1):12-23.

3陳毅德,陳小旋,沈麗娜,等.肺癌組織中AKAP95和eyclinE2蛋白表達的意義及與Cx43蛋白的關聯(lián)性分析〔J〕.中華衛(wèi)生勞動職業(yè)病雜志,2012;30(10):725-9.

4Wang J,Zou ZH,Xia HL,etal.Strengths and weaknesses of immunotherapy for advanced non-small-cell lung cancer:a meta-analysis of 12 randomized controlled trials〔J〕.PLoS One,2012；7(3):e32695.

〔2015-04-20修回〕

(編輯曲莉/滕欣航)

中圖分類號〔〕R73〔

文獻標識碼〕A〔

文章編號〕1005-9202(2015)21-6158-01；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.21.074