土茯苓及其單體落新婦苷的免疫抑制作用

孟慶芳　李衍濱

摘要：土茯苓性甘、淡，平和，歸肝、胃經(jīng)，有解毒、除濕、通利關(guān)節(jié)之功，在臨床上應(yīng)用廣泛。近代藥理研究表明土茯苓及單體落新婦苷具有選擇性免疫抑制作用，這一特性對(duì)于細(xì)胞免疫依賴的自身免疫性疾病和變態(tài)反應(yīng)性疾病的治療具有重要意義。

關(guān)鍵詞：土茯苓；落新婦苷；選擇性免疫抑制

中圖分類號(hào)：R28文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）10-0094-02

土茯苓為百合科植物光葉菝葜（Smilax glabra Roxb）的干燥塊莖，是中醫(yī)臨床治療中的常用藥物，其性甘、淡，平和，歸肝、胃經(jīng)，有解毒、除濕、通利關(guān)節(jié)之功。歷代古籍記載，如《本草綱目》：“土茯苓……健脾胃，強(qiáng)筋骨，去風(fēng)濕，利關(guān)節(jié)，止泄瀉，治拘攣骨痛，惡瘡癰腫。解汞粉、銀朱毒?！薄兜崮媳静荨罚骸爸挝辶馨诐幔嬷螚蠲矾彾?、丹毒”?！侗静輦湟罚骸爸螚蠲矾彾?，瘰疬瘡腫?！?/p>

土茯苓臨床上常用來治療梅毒和淋病，還可見于風(fēng)濕熱、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、其它多種結(jié)締組織疾病[1]及銀屑病、慢性肝炎、腎炎等免疫性疾病的治療應(yīng)用中[2]。現(xiàn)代藥理研究也表明，土茯苓除具有抗心肌缺血和對(duì)心臟缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用，β-受體阻滯作用，抗動(dòng)脈粥樣硬化和抗血栓作用，利尿、鎮(zhèn)痛作用，抗腫瘤、抗胃潰瘍、抗菌作用，及對(duì)棉酚的解毒作用以外，還具有選擇性免疫抑制作用[3]。自發(fā)現(xiàn)土茯苓具有選擇性免疫抑制作用以來，研究者們已開展一系列實(shí)驗(yàn)對(duì)其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制進(jìn)行探討，并期望將其應(yīng)用于自身免疫性疾病及變態(tài)反應(yīng)性疾病中。目前，各文獻(xiàn)中所提到的土茯苓及其有效成分落新婦苷對(duì)免疫應(yīng)答的抑制作用涉及到以下幾個(gè)方面：（1）抑制活化的T淋巴細(xì)胞的功能并降低其增殖能力；（2）調(diào)節(jié)Th細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子之間的平衡；（3）上調(diào)具有免疫負(fù)向調(diào)控作用的Treg細(xì)胞數(shù)量；（4）抑制機(jī)體免疫系統(tǒng)中最強(qiáng)有力的抗原呈遞細(xì)胞—樹突細(xì)胞的成熟及其抗原呈遞能力，從而影響免疫應(yīng)答的啟動(dòng)、調(diào)控和維持。為系統(tǒng)全面認(rèn)識(shí)土茯苓的免疫抑制機(jī)制，現(xiàn)將目前對(duì)土茯苓及其有效成分落新婦苷免疫抑制作用的研究現(xiàn)狀概述如下。

1土茯苓的免疫抑制作用

南京大學(xué)徐強(qiáng)教授帶領(lǐng)的課題組最初為探究土茯苓的免疫藥理作用，將土茯苓水提取物對(duì)遲發(fā)型超敏反應(yīng)（DTH）模型，即2，4，6-三硝基氯苯（PC）誘導(dǎo)的接觸性皮炎小鼠和綿羊紅細(xì)胞（SRBC）誘導(dǎo)的足跖反應(yīng)小鼠，分不同時(shí)效進(jìn)行灌胃干預(yù)，發(fā)現(xiàn)土茯苓水提取物可顯著抑制DTH，且攻擊后給藥時(shí)其抑制作用更強(qiáng)。同時(shí)，對(duì)小鼠脾臟空斑形成細(xì)胞（PFC）數(shù)及血中溶血素水平進(jìn)行測(cè)定來分析對(duì)機(jī)體體液免疫的影響，發(fā)現(xiàn)土茯苓水提取物對(duì)小鼠抗SRBC抗體形成的細(xì)胞數(shù)（IgM-及IgG-PFC數(shù)）無明顯影響，但其溶血空斑明顯較環(huán)磷酰胺對(duì)照組大，血清溶血素水平呈增高趨勢(shì)。此外，與環(huán)磷酰胺對(duì)照組相比，土茯苓對(duì)脾重和脾指數(shù)無影響。以上結(jié)果表明，土茯苓對(duì)體液免疫反應(yīng)無抑制作用，但可選擇性地抑制細(xì)胞免疫反應(yīng)，從而首次發(fā)現(xiàn)土茯苓具有選擇性免疫抑制作用，并且其毒副作用較低[4]。

為進(jìn)一步驗(yàn)證土茯苓選擇性免疫抑制的特性，又將土茯苓水提取物應(yīng)用于角叉菜膠誘導(dǎo)的炎性水腫、棉球誘導(dǎo)的肉芽腫形成及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型—大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)土茯苓水提取物對(duì)這些免疫疾病均有治療作用，通過抑制PGE2的合成和釋放來發(fā)揮其抗炎活性，明顯下調(diào)過分活躍的巨噬細(xì)胞的功能活性，抑制IL-1，TNF 和 NO的產(chǎn)生，并上調(diào)T淋巴細(xì)胞的功能、增加IL-2的產(chǎn)生[5～6]。

2落新婦苷的免疫抑制作用

徐強(qiáng)教授為探索土茯苓選擇性免疫抑制作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，其對(duì)土茯苓的水提取物進(jìn)行分離、提取，發(fā)現(xiàn)土茯苓中所含的主要黃酮類化合物——落新婦苷同樣具有選擇性免疫抑制作用。徐強(qiáng)教授大量研究證明落新婦苷對(duì)免疫性肝損傷[7]，膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎[8]和接觸性過敏反應(yīng)[9]均具有免疫抑制作用。其免疫抑制機(jī)制包括誘導(dǎo)浸潤(rùn)至肝臟的CD4+T淋巴細(xì)胞[7]和植物凝集素（PHA）活化的Jurkat T細(xì)胞的凋亡[10]；通過下調(diào)MMP活性而抑制活化T細(xì)胞的遷移[8，11]；誘導(dǎo)內(nèi)源性IL-10的產(chǎn)生，并明顯提高IL-10下游的信號(hào)分子SOCS-1和SOCS-3的表達(dá)[9]；抑制活化的T淋巴細(xì)胞CD44的表達(dá)以降低脾細(xì)胞的粘附能力，純化從刀豆蛋白A誘導(dǎo)的肝損傷小鼠中分離出來的T淋巴細(xì)胞，同時(shí)降低TNF-α的分泌[12～13]。這些結(jié)果表明落新婦苷具有獨(dú)特的免疫抑制模式，即選擇性地抑制活化的T細(xì)胞，這不同于其他免疫抑制劑的免疫抑制機(jī)制。落新婦苷的該特性提示其更適用于慢性免疫性疾病的長(zhǎng)期治療，且毒副作用更少。如，落新婦苷治療組的胸腺和脾臟重量幾乎未受到影響，而地塞米松則顯著降低了器官的重量[11]。經(jīng)過該系列研究，徐強(qiáng)教授總結(jié)，落新婦苷選擇性免疫抑制作用的特點(diǎn)包括：選擇性地抑制疾病的效應(yīng)階段而不影響誘導(dǎo)階段；選擇性地抑制活化T細(xì)胞而不影響正常T細(xì)胞及其他組織細(xì)胞；選擇性抑制活化的Th1細(xì)胞而不影響Th2細(xì)胞[14]。

陳等在心臟移植術(shù)后的抗排異反應(yīng)的研究中，發(fā)現(xiàn)落新婦苷通過抑制IL-2、γ-IFN、IL-12、IL-18等Th1型細(xì)胞因子的表達(dá)，促進(jìn)Th2型細(xì)胞因子IL-4、IL-10的表達(dá)，使免疫反應(yīng)由Th1型向Th2型偏移，從而明顯延長(zhǎng)術(shù)后移植物的存活時(shí)間[15～16]。

對(duì)于自身免疫疾病及變態(tài)反應(yīng)疾病的治療，除上述提到的對(duì)Th細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子紊亂狀態(tài)有平衡調(diào)節(jié)作用以外，落新婦苷對(duì)樹突細(xì)胞、Treg細(xì)胞亦有影響，落新婦苷能劑量依賴性地抑制DC細(xì)胞表面MHC-Ⅰa和共刺激分子CD40、CD80和CD86的表達(dá)，抑制DC的成熟，明顯提高DC抗原吞噬能力，刺激DC分泌IL-10、TGF-β，抑制DC分泌IL-1β、IL-12 p40；同時(shí)下調(diào)DC刺激同種反應(yīng)性T細(xì)胞增殖的能力[17～19]。此外，落新婦苷還能上調(diào)CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞的數(shù)量，從而增強(qiáng)對(duì)T細(xì)胞活性的抑制效應(yīng)，調(diào)整過度免疫狀態(tài)[19]。endprint

3展望

現(xiàn)今，為治療自身免疫性疾病和變態(tài)反應(yīng)性疾病，臨床上廣泛應(yīng)用免疫抑制劑，如糖皮質(zhì)激素、環(huán)磷酰胺、環(huán)孢素A等，但由于其對(duì)免疫應(yīng)答的全面抑制，導(dǎo)致諸多毒副作用，如胃腸道反應(yīng)、免疫力下降、體液平衡紊亂等等，這就需要尋求選擇性高、毒副作用小的新型免疫抑制劑，而從目前研究現(xiàn)狀來看，土茯苓及其單體落新婦苷對(duì)此選擇條件的符合程度較高。但土茯苓及落新婦苷對(duì)免疫系統(tǒng)具體的調(diào)節(jié)機(jī)制，尤其是其選擇性免疫抑制機(jī)制，尚未得到全面的闡釋，仍需進(jìn)一步深入探究。在選擇性免疫調(diào)控的理念指導(dǎo)下，土茯苓及其單體落新婦苷在細(xì)胞免疫依賴的免疫疾病治療上擁有著廣闊的開發(fā)前景。

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（收稿日期：2014-06-28）endprint