• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    黃芪甲苷對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦組織中NO、SOD和MDA的影響

    2014-10-23 10:20:52隋璐劉坤沈薇趙春瑩李新新
    中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥 2014年26期
    關(guān)鍵詞:超氧化物歧化酶甲基苯丙胺丙二醛

    隋璐+劉坤+沈薇+趙春瑩+李新新

    [摘要] 目的 探討黃芪甲苷對(duì)甲基苯丙胺慢性染毒大鼠腦組織損傷的干預(yù)與保護(hù)作用。 方法 建立甲基苯丙胺(MA)慢性染毒大鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,灌胃給予不同劑量的黃芪甲苷(10 mg/kg,20 mg/kg),觀察各組大鼠腦組織海馬區(qū)和紋狀體區(qū)一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量的變化及相互關(guān)系。 結(jié)果 MA慢性染毒組腦組織海馬區(qū)NO、MDA含量顯著升高,SOD活力下降,與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組(20 mg/kg)與MA模型組相比,腦組織海馬區(qū)NO、MDA含量降低,SOD活力升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論 黃芪甲苷能夠降低MA慢性染毒大鼠腦組織海馬區(qū)NO、MDA含量,升高SOD活力,并通過(guò)抗氧化作用對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷有一定的干預(yù)與保護(hù)作用。

    [關(guān)鍵詞] 甲基苯丙胺;黃芪甲苷;一氧化氮;超氧化物歧化酶;丙二醛

    [中圖分類號(hào)] R965 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721(2014)09(b)-0016-03

    Influence of astragaloside Ⅳon NO,SOD and MDA in methamphetamine-dependence rat brain

    SUI Lu1 LIU Kun1 SHEN Wei1 ZHAO Chun-ying1 LI Xin-xin2

    1.College of Basic Medicine,Shenyang Medical College,Shenyang 110034,China;2.Forensic of Shenyang Medical College,Shenyang 110034,China

    [Abstract] Objective To explore the intervention and protective effects of astragaloside Ⅳ on brain tissue in chronic methamphetamine dependent rat model. Methods The chronic methamphetamine dependent rat model was established by intragastric administration of astragasloside Ⅳ.NO,MDA content and SOD activity in hippocampus were detected in different groups. Results In chronic methamphephetamine group,the expression level of NO and MDA was increased,SOD activity was decreased,compared with the control group,there was statistically significance(P<0.01).In astragaloside Ⅳ high dose group(20 mg/kg),the content level of MDA was decreased and SOD activity was increased,there was statistically significance,compared with chronic methamphephetamine group(P<0.01). Conclusion Astragaloside Ⅳ can reduce the NO and MDA content in the hippocampus MA chronic infected rats,increases SOD activity.On the central nervous system damage,Astragaloside Ⅳ has a certain role in the intervention and protection by antioxidant function,and has protective effect on brain tissue.

    [Key words] Methamphetamine;Astragaloside Ⅳ;Nitric oxide;Superoxide dimutase;Malondialdehyde

    甲基苯丙胺 (methamphetamine,MA)屬于一種苯丙胺類中樞興奮劑,可以興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng),誘導(dǎo)產(chǎn)生興奮感和欣快感。目前濫用勢(shì)頭增長(zhǎng)迅猛。MA的中毒機(jī)制、精神依賴性以及治療藥物的研發(fā)是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)[1]。MA能造成神經(jīng)毒性,引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)化學(xué)、神經(jīng)病理和行為的改變。大量實(shí)驗(yàn)研究表明,MA染毒可引起動(dòng)物及人類5-羥色胺系統(tǒng)或中樞邊緣多巴胺系統(tǒng)的損傷[2]。黃芪甲苷可通過(guò)抗自由基及抑制細(xì)胞凋亡對(duì)腦組織有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立MA慢性染毒動(dòng)物模型,觀察在黃芪甲苷干預(yù)下大鼠腦組織中一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量變化及相互關(guān)系,為進(jìn)一步研究MA藥物中毒機(jī)制、藥物控制及治療效果提供可靠的理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    健康Wistar大鼠(沈醫(yī)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào):0008180)80只,體重190~220 g,雌雄各半,購(gòu)自沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心,許可證號(hào)為SCXK(遼2010-0001)。

    1.2 藥品與試劑

    甲基苯丙胺(純度70%),由丹東市公安局提供;黃芪甲苷(純度98%)購(gòu)于成都康邦生物科技有限公司(批號(hào):120802);NO檢測(cè)試劑盒(批號(hào):2011 0709)、MDA檢測(cè)試劑盒(批號(hào):20111208)和SOD檢測(cè)試劑盒(批號(hào):20110818)均購(gòu)于南京建成生物工程研究所;其余試劑為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?,?yán)格按照說(shuō)明書操作。

    1.3 動(dòng)物分組、給藥與模型的建立[3]

    取Wistar大鼠40只,體重190~220 g,隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組(每日腹腔注射生理鹽水)、MA依賴組、黃芪甲苷小劑量組(10 mg/kg)、黃芪甲苷大劑量組(20 mg/kg)。參照文獻(xiàn)方法[2],MA依賴組采用逐日劑量遞增法腹腔注射給藥,按照0.5、1、2、8、10、15 和20 mg/kg 的劑量逐日遞增,2次/d(8:00,20:00),從第8天開始按照維持20 mg/kg 的劑量制造MA慢性染毒大鼠動(dòng)物模型。黃芪甲苷劑量組在逐日劑量遞增造模的基礎(chǔ)上,灌胃給予不同劑量的黃芪甲苷,1次/d,用以干預(yù)性治療;連續(xù)14 d用藥結(jié)束后,斷頭處死大鼠,快速開顱取腦,按文獻(xiàn)法將所取腦組織冰上分離海馬區(qū),用以制備腦組織勻漿。

    1.4 腦組織海馬區(qū)NO、MDA和SOD含量的測(cè)定

    采用購(gòu)自南京建成生物工程研究所的試劑盒,NO含量的測(cè)定采用硝酸還原酶法測(cè)定其代謝產(chǎn)物;MDA含量的測(cè)定采用硫代巴比妥法;SOD活力的測(cè)定采用亞硝酸鹽顯色法。其中大鼠腦組織中NO和MDA含量的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成10%的勻漿;大鼠腦中SOD活力的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成1%的勻漿。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)量資料用x±s表示,采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量升高,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量顯著下降,與MA模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與鹽水對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

    表1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    2.2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量上升,SOD含量下降,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量升高較少,SOD活性下降,與鹽水對(duì)照組水平相近,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與MA模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表2)。

    表2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA的含量比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    3 討論

    NO是一種氣體自由基分子,由一氧化氮合酶催化L-精氨酸生成。過(guò)量的NO具有神經(jīng)毒性,可與其它的氧化物發(fā)生反應(yīng),生成有活性的氧氮化物,從而發(fā)揮復(fù)雜的作用,其中最常見(jiàn)的就是過(guò)氧亞硝酸酯。過(guò)氧亞硝酸酯的產(chǎn)物沒(méi)有氧化作用,卻具有硝基化的功能,可進(jìn)一步引起DNA斷裂、蛋白質(zhì)脂質(zhì)氧化、核苷酸修飾和硝基化作用而導(dǎo)致細(xì)胞死亡[4]。體內(nèi)NO含量升高可直接或間接地參與組織細(xì)胞的損傷,導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂,使機(jī)體的免疫功能降低。

    機(jī)體內(nèi)存在著氧化和抗氧化系統(tǒng),正常時(shí)保持動(dòng)態(tài)平衡。病理?xiàng)l件下,該系統(tǒng)失衡將導(dǎo)致大量自由基在體內(nèi)堆積,自由基攻擊生物膜中的多聚不飽和脂肪酸可引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),MDA是氧化反應(yīng)后的終末產(chǎn)物,可作為氧化反應(yīng)后的標(biāo)志物,MDA可反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的速率及強(qiáng)度,是體內(nèi)氧自由基代謝的重要指標(biāo)[5-6]。SOD是存在于生物體內(nèi)清除氧自由基的重要抗氧化酶,其功能是催化·O2-的歧化反應(yīng),即將·O2-歧化為過(guò)氧化氫和氧氣,從而降低機(jī)體的過(guò)氧化反應(yīng),對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用,維持機(jī)體氧化與抗氧化的平衡[7-9]。

    本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,MA模型組大鼠腦中海馬區(qū)NO和MDA含量增加,SOD活力降低,提示給予MA后,大鼠腦組織細(xì)胞抗氧化能力減弱,脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)升高,可見(jiàn)MA對(duì)大鼠腦細(xì)胞損傷較大。黃芪甲苷可能降低了大鼠腦組織中NO和MDA的含量,提高了SOD活力,從而減輕MA對(duì)抗氧化系統(tǒng)的損害,對(duì)MA慢性染毒組大鼠腦組織有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大劑量的黃芪甲苷(20 mg/kg)可顯著降低大鼠腦組織中NO和MDA含量,提高SOD活力,與MA模型組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。黃芪甲苷是黃芪的主要活性成分,近年來(lái)對(duì)黃芪甲苷藥理作用的研究顯示,其對(duì)腦組織有保護(hù)作用[10-13],周軍等[11]深入研究了黃芪甲苷對(duì)小鼠瞬間局灶性缺血所致的大腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制,推測(cè)其機(jī)制可能與抗自由基及抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。而本實(shí)驗(yàn)也提示,超氧化物參與了MA的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用。當(dāng)MA劑量達(dá)到一定水平時(shí),能引起大鼠腦組織的脂質(zhì)過(guò)氧化,這可能是MA引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要機(jī)制,而黃芪甲苷可以下調(diào)脂質(zhì)過(guò)氧化水平,能調(diào)節(jié)因MA導(dǎo)致的腦組織過(guò)氧化平衡失調(diào),對(duì)腦組織細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用,這為進(jìn)一步深入研究MA中毒機(jī)制及治療干預(yù)提供了一定的實(shí)驗(yàn)室材料和理論基礎(chǔ)。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 梁若冰,趙艷明,趙秀麗.苯丙胺類精神活性物質(zhì)依賴機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2009,18(6):452-456.

    [2] 李新新,楊秀麗,陳曉雷,等.Caspase-3抑制藥對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦組織中NO和SOD及MDA的影響[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2014,33(4):426-428.

    [3] 張麗華,張東,宣志恒,等.建立大鼠甲基苯丙胺的神經(jīng)精神毒性模型[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2013,22(2):95-97,106.

    [4] 陳漢,鄭世賢,席芳,等.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后大鼠腦組織中SOD、NO和MDA表達(dá)的影響[J].西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(6):435-437.

    [5] 周峰.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后小鼠腦組織中脂質(zhì)過(guò)氧化的影響[J].江蘇醫(yī)藥,2014,40(1):13-15.

    [6] 高偉敏,任今今,楊永濱,等.清熱止瀉方治療急性放射性腸炎的作用機(jī)制[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,32(7):878-881.

    [7] 張歆薇,劉海強(qiáng),徐勝龍,等.次聲作用對(duì)大鼠血漿SOD、MDA、NO水平的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2012,12(18):3416-3419.

    [8] 楊健,劉曉偉,彭樹靈,等.維胃方對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠血清超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(8):1837-1839.

    [9] 高健,曲曉峰,劉洋,等.川芎生物堿對(duì)腦缺血-再灌注大鼠SOD、MDA、神經(jīng)功能及腦梗死容積的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2009,29(1):22-24.

    [10] 段立軍,孫博航.黃芪甲苷的研究進(jìn)展[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,28(5):410-416.

    [11] 周軍,劉軍.黃芪甲甙對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2008,25(5):814-816.

    [12] 李亮,陳立峰.中藥對(duì)腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué),2012,10(6):459-462.

    [13] 楊永飛,黃文東,朱邦豪.丹參素配伍川芎嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用[J].中南藥學(xué),2013,11(7):488-491.

    (收稿日期:2014-06-23 本文編輯:祁海文)

    1.3 動(dòng)物分組、給藥與模型的建立[3]

    取Wistar大鼠40只,體重190~220 g,隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組(每日腹腔注射生理鹽水)、MA依賴組、黃芪甲苷小劑量組(10 mg/kg)、黃芪甲苷大劑量組(20 mg/kg)。參照文獻(xiàn)方法[2],MA依賴組采用逐日劑量遞增法腹腔注射給藥,按照0.5、1、2、8、10、15 和20 mg/kg 的劑量逐日遞增,2次/d(8:00,20:00),從第8天開始按照維持20 mg/kg 的劑量制造MA慢性染毒大鼠動(dòng)物模型。黃芪甲苷劑量組在逐日劑量遞增造模的基礎(chǔ)上,灌胃給予不同劑量的黃芪甲苷,1次/d,用以干預(yù)性治療;連續(xù)14 d用藥結(jié)束后,斷頭處死大鼠,快速開顱取腦,按文獻(xiàn)法將所取腦組織冰上分離海馬區(qū),用以制備腦組織勻漿。

    1.4 腦組織海馬區(qū)NO、MDA和SOD含量的測(cè)定

    采用購(gòu)自南京建成生物工程研究所的試劑盒,NO含量的測(cè)定采用硝酸還原酶法測(cè)定其代謝產(chǎn)物;MDA含量的測(cè)定采用硫代巴比妥法;SOD活力的測(cè)定采用亞硝酸鹽顯色法。其中大鼠腦組織中NO和MDA含量的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成10%的勻漿;大鼠腦中SOD活力的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成1%的勻漿。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)量資料用x±s表示,采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量升高,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量顯著下降,與MA模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與鹽水對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

    表1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    2.2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量上升,SOD含量下降,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量升高較少,SOD活性下降,與鹽水對(duì)照組水平相近,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與MA模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表2)。

    表2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA的含量比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    3 討論

    NO是一種氣體自由基分子,由一氧化氮合酶催化L-精氨酸生成。過(guò)量的NO具有神經(jīng)毒性,可與其它的氧化物發(fā)生反應(yīng),生成有活性的氧氮化物,從而發(fā)揮復(fù)雜的作用,其中最常見(jiàn)的就是過(guò)氧亞硝酸酯。過(guò)氧亞硝酸酯的產(chǎn)物沒(méi)有氧化作用,卻具有硝基化的功能,可進(jìn)一步引起DNA斷裂、蛋白質(zhì)脂質(zhì)氧化、核苷酸修飾和硝基化作用而導(dǎo)致細(xì)胞死亡[4]。體內(nèi)NO含量升高可直接或間接地參與組織細(xì)胞的損傷,導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂,使機(jī)體的免疫功能降低。

    機(jī)體內(nèi)存在著氧化和抗氧化系統(tǒng),正常時(shí)保持動(dòng)態(tài)平衡。病理?xiàng)l件下,該系統(tǒng)失衡將導(dǎo)致大量自由基在體內(nèi)堆積,自由基攻擊生物膜中的多聚不飽和脂肪酸可引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),MDA是氧化反應(yīng)后的終末產(chǎn)物,可作為氧化反應(yīng)后的標(biāo)志物,MDA可反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的速率及強(qiáng)度,是體內(nèi)氧自由基代謝的重要指標(biāo)[5-6]。SOD是存在于生物體內(nèi)清除氧自由基的重要抗氧化酶,其功能是催化·O2-的歧化反應(yīng),即將·O2-歧化為過(guò)氧化氫和氧氣,從而降低機(jī)體的過(guò)氧化反應(yīng),對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用,維持機(jī)體氧化與抗氧化的平衡[7-9]。

    本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,MA模型組大鼠腦中海馬區(qū)NO和MDA含量增加,SOD活力降低,提示給予MA后,大鼠腦組織細(xì)胞抗氧化能力減弱,脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)升高,可見(jiàn)MA對(duì)大鼠腦細(xì)胞損傷較大。黃芪甲苷可能降低了大鼠腦組織中NO和MDA的含量,提高了SOD活力,從而減輕MA對(duì)抗氧化系統(tǒng)的損害,對(duì)MA慢性染毒組大鼠腦組織有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大劑量的黃芪甲苷(20 mg/kg)可顯著降低大鼠腦組織中NO和MDA含量,提高SOD活力,與MA模型組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。黃芪甲苷是黃芪的主要活性成分,近年來(lái)對(duì)黃芪甲苷藥理作用的研究顯示,其對(duì)腦組織有保護(hù)作用[10-13],周軍等[11]深入研究了黃芪甲苷對(duì)小鼠瞬間局灶性缺血所致的大腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制,推測(cè)其機(jī)制可能與抗自由基及抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。而本實(shí)驗(yàn)也提示,超氧化物參與了MA的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用。當(dāng)MA劑量達(dá)到一定水平時(shí),能引起大鼠腦組織的脂質(zhì)過(guò)氧化,這可能是MA引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要機(jī)制,而黃芪甲苷可以下調(diào)脂質(zhì)過(guò)氧化水平,能調(diào)節(jié)因MA導(dǎo)致的腦組織過(guò)氧化平衡失調(diào),對(duì)腦組織細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用,這為進(jìn)一步深入研究MA中毒機(jī)制及治療干預(yù)提供了一定的實(shí)驗(yàn)室材料和理論基礎(chǔ)。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 梁若冰,趙艷明,趙秀麗.苯丙胺類精神活性物質(zhì)依賴機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2009,18(6):452-456.

    [2] 李新新,楊秀麗,陳曉雷,等.Caspase-3抑制藥對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦組織中NO和SOD及MDA的影響[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2014,33(4):426-428.

    [3] 張麗華,張東,宣志恒,等.建立大鼠甲基苯丙胺的神經(jīng)精神毒性模型[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2013,22(2):95-97,106.

    [4] 陳漢,鄭世賢,席芳,等.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后大鼠腦組織中SOD、NO和MDA表達(dá)的影響[J].西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(6):435-437.

    [5] 周峰.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后小鼠腦組織中脂質(zhì)過(guò)氧化的影響[J].江蘇醫(yī)藥,2014,40(1):13-15.

    [6] 高偉敏,任今今,楊永濱,等.清熱止瀉方治療急性放射性腸炎的作用機(jī)制[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,32(7):878-881.

    [7] 張歆薇,劉海強(qiáng),徐勝龍,等.次聲作用對(duì)大鼠血漿SOD、MDA、NO水平的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2012,12(18):3416-3419.

    [8] 楊健,劉曉偉,彭樹靈,等.維胃方對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠血清超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(8):1837-1839.

    [9] 高健,曲曉峰,劉洋,等.川芎生物堿對(duì)腦缺血-再灌注大鼠SOD、MDA、神經(jīng)功能及腦梗死容積的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2009,29(1):22-24.

    [10] 段立軍,孫博航.黃芪甲苷的研究進(jìn)展[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,28(5):410-416.

    [11] 周軍,劉軍.黃芪甲甙對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2008,25(5):814-816.

    [12] 李亮,陳立峰.中藥對(duì)腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué),2012,10(6):459-462.

    [13] 楊永飛,黃文東,朱邦豪.丹參素配伍川芎嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用[J].中南藥學(xué),2013,11(7):488-491.

    (收稿日期:2014-06-23 本文編輯:祁海文)

    1.3 動(dòng)物分組、給藥與模型的建立[3]

    取Wistar大鼠40只,體重190~220 g,隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組(每日腹腔注射生理鹽水)、MA依賴組、黃芪甲苷小劑量組(10 mg/kg)、黃芪甲苷大劑量組(20 mg/kg)。參照文獻(xiàn)方法[2],MA依賴組采用逐日劑量遞增法腹腔注射給藥,按照0.5、1、2、8、10、15 和20 mg/kg 的劑量逐日遞增,2次/d(8:00,20:00),從第8天開始按照維持20 mg/kg 的劑量制造MA慢性染毒大鼠動(dòng)物模型。黃芪甲苷劑量組在逐日劑量遞增造模的基礎(chǔ)上,灌胃給予不同劑量的黃芪甲苷,1次/d,用以干預(yù)性治療;連續(xù)14 d用藥結(jié)束后,斷頭處死大鼠,快速開顱取腦,按文獻(xiàn)法將所取腦組織冰上分離海馬區(qū),用以制備腦組織勻漿。

    1.4 腦組織海馬區(qū)NO、MDA和SOD含量的測(cè)定

    采用購(gòu)自南京建成生物工程研究所的試劑盒,NO含量的測(cè)定采用硝酸還原酶法測(cè)定其代謝產(chǎn)物;MDA含量的測(cè)定采用硫代巴比妥法;SOD活力的測(cè)定采用亞硝酸鹽顯色法。其中大鼠腦組織中NO和MDA含量的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成10%的勻漿;大鼠腦中SOD活力的測(cè)定,是將大鼠腦組織制成1%的勻漿。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)量資料用x±s表示,采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量升高,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)NO含量顯著下降,與MA模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與鹽水對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

    表1 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)NO含量的比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    2.2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA含量的比較

    MA模型組與黃芪甲苷小劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量上升,SOD含量下降,與鹽水對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);黃芪甲苷大劑量組腦組織海馬區(qū)MDA含量升高較少,SOD活性下降,與鹽水對(duì)照組水平相近,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與MA模型組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表2)。

    表2 不同組別大鼠腦組織海馬區(qū)SOD和MDA的含量比較(x±s)

    與鹽水對(duì)照組比較,*P<0.01;與模型組比較,#P<0.01

    3 討論

    NO是一種氣體自由基分子,由一氧化氮合酶催化L-精氨酸生成。過(guò)量的NO具有神經(jīng)毒性,可與其它的氧化物發(fā)生反應(yīng),生成有活性的氧氮化物,從而發(fā)揮復(fù)雜的作用,其中最常見(jiàn)的就是過(guò)氧亞硝酸酯。過(guò)氧亞硝酸酯的產(chǎn)物沒(méi)有氧化作用,卻具有硝基化的功能,可進(jìn)一步引起DNA斷裂、蛋白質(zhì)脂質(zhì)氧化、核苷酸修飾和硝基化作用而導(dǎo)致細(xì)胞死亡[4]。體內(nèi)NO含量升高可直接或間接地參與組織細(xì)胞的損傷,導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂,使機(jī)體的免疫功能降低。

    機(jī)體內(nèi)存在著氧化和抗氧化系統(tǒng),正常時(shí)保持動(dòng)態(tài)平衡。病理?xiàng)l件下,該系統(tǒng)失衡將導(dǎo)致大量自由基在體內(nèi)堆積,自由基攻擊生物膜中的多聚不飽和脂肪酸可引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),MDA是氧化反應(yīng)后的終末產(chǎn)物,可作為氧化反應(yīng)后的標(biāo)志物,MDA可反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的速率及強(qiáng)度,是體內(nèi)氧自由基代謝的重要指標(biāo)[5-6]。SOD是存在于生物體內(nèi)清除氧自由基的重要抗氧化酶,其功能是催化·O2-的歧化反應(yīng),即將·O2-歧化為過(guò)氧化氫和氧氣,從而降低機(jī)體的過(guò)氧化反應(yīng),對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用,維持機(jī)體氧化與抗氧化的平衡[7-9]。

    本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,MA模型組大鼠腦中海馬區(qū)NO和MDA含量增加,SOD活力降低,提示給予MA后,大鼠腦組織細(xì)胞抗氧化能力減弱,脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)升高,可見(jiàn)MA對(duì)大鼠腦細(xì)胞損傷較大。黃芪甲苷可能降低了大鼠腦組織中NO和MDA的含量,提高了SOD活力,從而減輕MA對(duì)抗氧化系統(tǒng)的損害,對(duì)MA慢性染毒組大鼠腦組織有一定的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大劑量的黃芪甲苷(20 mg/kg)可顯著降低大鼠腦組織中NO和MDA含量,提高SOD活力,與MA模型組相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。黃芪甲苷是黃芪的主要活性成分,近年來(lái)對(duì)黃芪甲苷藥理作用的研究顯示,其對(duì)腦組織有保護(hù)作用[10-13],周軍等[11]深入研究了黃芪甲苷對(duì)小鼠瞬間局灶性缺血所致的大腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制,推測(cè)其機(jī)制可能與抗自由基及抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。而本實(shí)驗(yàn)也提示,超氧化物參與了MA的神經(jīng)細(xì)胞毒性作用。當(dāng)MA劑量達(dá)到一定水平時(shí),能引起大鼠腦組織的脂質(zhì)過(guò)氧化,這可能是MA引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要機(jī)制,而黃芪甲苷可以下調(diào)脂質(zhì)過(guò)氧化水平,能調(diào)節(jié)因MA導(dǎo)致的腦組織過(guò)氧化平衡失調(diào),對(duì)腦組織細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用,這為進(jìn)一步深入研究MA中毒機(jī)制及治療干預(yù)提供了一定的實(shí)驗(yàn)室材料和理論基礎(chǔ)。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 梁若冰,趙艷明,趙秀麗.苯丙胺類精神活性物質(zhì)依賴機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2009,18(6):452-456.

    [2] 李新新,楊秀麗,陳曉雷,等.Caspase-3抑制藥對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦組織中NO和SOD及MDA的影響[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2014,33(4):426-428.

    [3] 張麗華,張東,宣志恒,等.建立大鼠甲基苯丙胺的神經(jīng)精神毒性模型[J].中國(guó)藥物依賴性雜志,2013,22(2):95-97,106.

    [4] 陳漢,鄭世賢,席芳,等.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后大鼠腦組織中SOD、NO和MDA表達(dá)的影響[J].西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(6):435-437.

    [5] 周峰.煙酰胺對(duì)甲基苯丙胺注射后小鼠腦組織中脂質(zhì)過(guò)氧化的影響[J].江蘇醫(yī)藥,2014,40(1):13-15.

    [6] 高偉敏,任今今,楊永濱,等.清熱止瀉方治療急性放射性腸炎的作用機(jī)制[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,32(7):878-881.

    [7] 張歆薇,劉海強(qiáng),徐勝龍,等.次聲作用對(duì)大鼠血漿SOD、MDA、NO水平的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2012,12(18):3416-3419.

    [8] 楊健,劉曉偉,彭樹靈,等.維胃方對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠血清超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(8):1837-1839.

    [9] 高健,曲曉峰,劉洋,等.川芎生物堿對(duì)腦缺血-再灌注大鼠SOD、MDA、神經(jīng)功能及腦梗死容積的影響[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2009,29(1):22-24.

    [10] 段立軍,孫博航.黃芪甲苷的研究進(jìn)展[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,28(5):410-416.

    [11] 周軍,劉軍.黃芪甲甙對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2008,25(5):814-816.

    [12] 李亮,陳立峰.中藥對(duì)腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué),2012,10(6):459-462.

    [13] 楊永飛,黃文東,朱邦豪.丹參素配伍川芎嗪對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用[J].中南藥學(xué),2013,11(7):488-491.

    (收稿日期:2014-06-23 本文編輯:祁海文)

    猜你喜歡
    超氧化物歧化酶甲基苯丙胺丙二醛
    甲基苯丙胺改變成癮小鼠突觸可塑性基因的甲基化修飾
    甲基苯丙胺神經(jīng)毒性作用及機(jī)制的研究進(jìn)展
    甲基苯丙胺對(duì)大鼠心臟血管通透性的影響初探
    不同施肥對(duì)岷山紅三葉中丙二醛(MDA)含量的影響
    利培酮和氯氮平對(duì)精神分裂癥患者PRL和SOD的影響探討
    白花敗醬草乙醇提取物對(duì)小鼠抗氧化作用的影響
    婦科腹腔鏡手術(shù)不同氣腹壓力時(shí)超氧化物歧化酶、TNF—α的動(dòng)態(tài)變化及意義
    精喹禾靈對(duì)板藍(lán)根SOD、POD酶活性的影響
    丙二醛對(duì)離體草魚腸道黏膜細(xì)胞的損傷作用
    z-DEVD-fmk對(duì)甲基苯丙胺依賴大鼠腦海馬組織caspase-3活性及其蛋白表達(dá)的影響
    丝袜在线中文字幕| 99re在线观看精品视频| 久久精品影院6| 男女下面插进去视频免费观看| 欧美日韩一级在线毛片| 成人欧美大片| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美日本中文国产一区发布| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 在线播放国产精品三级| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 好男人电影高清在线观看| 亚洲激情在线av| cao死你这个sao货| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美黄色淫秽网站| 最新在线观看一区二区三区| 一区在线观看完整版| 久久九九热精品免费| 两个人视频免费观看高清| 久久久精品欧美日韩精品| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 看免费av毛片| 精品国产乱子伦一区二区三区| svipshipincom国产片| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 色尼玛亚洲综合影院| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| √禁漫天堂资源中文www| 9191精品国产免费久久| 亚洲少妇的诱惑av| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 十八禁人妻一区二区| 又大又爽又粗| 欧美日韩一级在线毛片| 免费在线观看日本一区| 午夜两性在线视频| 在线观看66精品国产| 韩国av一区二区三区四区| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲精品久久国产高清桃花| 午夜免费激情av| 首页视频小说图片口味搜索| 又黄又粗又硬又大视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 叶爱在线成人免费视频播放| 色av中文字幕| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久久伊人香网站| 亚洲色图av天堂| 99re在线观看精品视频| 大型av网站在线播放| 国产成人欧美在线观看| 欧美激情久久久久久爽电影 | 久久人妻av系列| 国产精品免费视频内射| 亚洲,欧美精品.| 亚洲人成电影观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 在线观看66精品国产| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 妹子高潮喷水视频| 婷婷精品国产亚洲av在线| 久久久精品欧美日韩精品| av片东京热男人的天堂| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 乱人伦中国视频| 午夜福利免费观看在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 91精品国产国语对白视频| 久久久久久人人人人人| 一区福利在线观看| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 叶爱在线成人免费视频播放| 麻豆av在线久日| 精品熟女少妇八av免费久了| 久9热在线精品视频| e午夜精品久久久久久久| 国产亚洲欧美精品永久| 国产成人av激情在线播放| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产精品99久久99久久久不卡| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产精品久久久av美女十八| 天堂动漫精品| 亚洲精华国产精华精| 精品欧美国产一区二区三| 很黄的视频免费| 欧美日韩一级在线毛片| 中文字幕人妻熟女乱码| 狂野欧美激情性xxxx| 国产成人av激情在线播放| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 色在线成人网| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 久久狼人影院| 亚洲国产精品999在线| 欧美成人午夜精品| 久久国产精品影院| 久久香蕉精品热| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 天堂√8在线中文| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产在线观看jvid| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 给我免费播放毛片高清在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 一本大道久久a久久精品| 美女大奶头视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 午夜久久久久精精品| 欧美成人午夜精品| 黑丝袜美女国产一区| 桃色一区二区三区在线观看| 国产免费男女视频| 丁香欧美五月| 久久中文字幕一级| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 极品人妻少妇av视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 老司机靠b影院| 久久人人97超碰香蕉20202| 免费av毛片视频| 久久久久久国产a免费观看| 久久久久久久午夜电影| av有码第一页| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品av久久久久免费| 国产精品 国内视频| 午夜福利成人在线免费观看| 91av网站免费观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 男女下面插进去视频免费观看| 青草久久国产| 十八禁人妻一区二区| 精品久久蜜臀av无| 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲色图综合在线观看| 曰老女人黄片| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲第一av免费看| 亚洲av电影在线进入| 一a级毛片在线观看| 一级黄色大片毛片| 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久久国产欧美日韩av| 国产黄a三级三级三级人| 欧美成狂野欧美在线观看| 两人在一起打扑克的视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 9色porny在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 超碰成人久久| 亚洲一区二区三区不卡视频| 免费无遮挡裸体视频| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 一进一出抽搐动态| www.精华液| 9191精品国产免费久久| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 99精品久久久久人妻精品| 久久影院123| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲成人久久性| 在线免费观看的www视频| 久久中文字幕一级| 久久香蕉激情| 欧美中文日本在线观看视频| 我的亚洲天堂| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲国产看品久久| 69精品国产乱码久久久| 欧美日韩精品网址| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美黄色淫秽网站| 悠悠久久av| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产xxxxx性猛交| 十八禁人妻一区二区| 亚洲国产欧美网| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 日韩欧美一区二区三区在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 久久久久久久久久久久大奶| 国产成人啪精品午夜网站| 精品不卡国产一区二区三区| av在线天堂中文字幕| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲成人精品中文字幕电影| 一区二区三区精品91| 午夜日韩欧美国产| 国产精品免费一区二区三区在线| av片东京热男人的天堂| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久 成人 亚洲| 午夜精品久久久久久毛片777| tocl精华| 亚洲av片天天在线观看| 亚洲美女黄片视频| 亚洲熟妇熟女久久| 桃红色精品国产亚洲av| 首页视频小说图片口味搜索| 国内精品久久久久精免费| 曰老女人黄片| 一进一出好大好爽视频| 免费搜索国产男女视频| 久久久国产成人免费| 国产精品一区二区在线不卡| netflix在线观看网站| 久久国产精品影院| 亚洲成av片中文字幕在线观看| cao死你这个sao货| 欧美丝袜亚洲另类 | 日本免费a在线| 亚洲国产精品久久男人天堂| 成人三级黄色视频| 女警被强在线播放| 日韩中文字幕欧美一区二区| 夜夜爽天天搞| 国产激情欧美一区二区| 国产亚洲精品一区二区www| 久久性视频一级片| 国产精品亚洲av一区麻豆| 婷婷丁香在线五月| 男男h啪啪无遮挡| 9热在线视频观看99| 国产亚洲精品第一综合不卡| 99在线人妻在线中文字幕| 99在线视频只有这里精品首页| 精品一区二区三区av网在线观看| 色老头精品视频在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 黄频高清免费视频| 桃色一区二区三区在线观看| 9色porny在线观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 久久狼人影院| 99久久精品国产亚洲精品| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产高清有码在线观看视频 | 在线永久观看黄色视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 午夜福利高清视频| 欧美色视频一区免费| 女性被躁到高潮视频| 免费高清视频大片| 国产伦人伦偷精品视频| 青草久久国产| 亚洲色图综合在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 亚洲专区中文字幕在线| 婷婷六月久久综合丁香| 国产精品免费一区二区三区在线| 午夜福利在线观看吧| 操美女的视频在线观看| 精品高清国产在线一区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 黄片小视频在线播放| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产av一区二区精品久久| 在线免费观看的www视频| av超薄肉色丝袜交足视频| 日本三级黄在线观看| 精品高清国产在线一区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 一边摸一边抽搐一进一小说| 色婷婷久久久亚洲欧美| 精品免费久久久久久久清纯| 美国免费a级毛片| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产在线观看jvid| 国内精品久久久久久久电影| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 精品国产亚洲在线| 最近最新免费中文字幕在线| 曰老女人黄片| 两个人视频免费观看高清| 亚洲国产欧美网| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产av一区在线观看免费| 午夜福利18| 99香蕉大伊视频| 女同久久另类99精品国产91| 久久精品成人免费网站| 国语自产精品视频在线第100页| 淫秽高清视频在线观看| 99国产精品99久久久久| 亚洲中文av在线| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 男女午夜视频在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 青草久久国产| 不卡一级毛片| 国产色视频综合| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 女人精品久久久久毛片| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产一区二区三区视频了| www.www免费av| 精品福利观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 极品教师在线免费播放| 美国免费a级毛片| 国产成人精品在线电影| 91精品国产国语对白视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 人人澡人人妻人| av视频免费观看在线观看| 91麻豆av在线| 国产又爽黄色视频| 久久九九热精品免费| svipshipincom国产片| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 久久天堂一区二区三区四区| 最近最新免费中文字幕在线| 久久伊人香网站| 亚洲精品在线美女| 露出奶头的视频| 久久久久久久久免费视频了| 欧美黄色片欧美黄色片| 我的亚洲天堂| 亚洲熟妇熟女久久| 看片在线看免费视频| 在线天堂中文资源库| 高潮久久久久久久久久久不卡| 免费少妇av软件| 一本久久中文字幕| 丁香六月欧美| 国产在线观看jvid| 久久久久久久久久久久大奶| 脱女人内裤的视频| 男女下面进入的视频免费午夜 | 婷婷六月久久综合丁香| 一级作爱视频免费观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产精品,欧美在线| 欧美日韩一级在线毛片| 久久人人97超碰香蕉20202| 日韩有码中文字幕| 悠悠久久av| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 日本一区二区免费在线视频| 黄色成人免费大全| 中亚洲国语对白在线视频| 九色亚洲精品在线播放| 99国产精品一区二区蜜桃av| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲国产精品合色在线| 人成视频在线观看免费观看| 老司机在亚洲福利影院| 一级,二级,三级黄色视频| 国产精品免费视频内射| 91国产中文字幕| 国产午夜福利久久久久久| 欧美成狂野欧美在线观看| 不卡一级毛片| bbb黄色大片| www.自偷自拍.com| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 乱人伦中国视频| 性少妇av在线| 一级a爱片免费观看的视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲第一av免费看| 色av中文字幕| 亚洲视频免费观看视频| 国产精品一区二区免费欧美| 国产私拍福利视频在线观看| 两人在一起打扑克的视频| 一级a爱视频在线免费观看| 国产午夜精品久久久久久| 99久久综合精品五月天人人| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美大码av| 亚洲男人天堂网一区| 欧美久久黑人一区二区| 国产一区二区在线av高清观看| 99国产精品99久久久久| 免费观看人在逋| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 免费搜索国产男女视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 69精品国产乱码久久久| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 最新在线观看一区二区三区| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品永久免费网站| 亚洲av美国av| 99精品在免费线老司机午夜| 极品教师在线免费播放| 欧美不卡视频在线免费观看 | 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲最大成人中文| 又大又爽又粗| 欧美一区二区精品小视频在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 午夜影院日韩av| 老司机福利观看| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美大码av| 久久精品影院6| 丝袜美足系列| 性色av乱码一区二区三区2| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产精品 国内视频| 亚洲熟女毛片儿| 久久香蕉激情| 午夜福利18| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产91精品成人一区二区三区| 中文字幕久久专区| 黄色视频,在线免费观看| 日韩国内少妇激情av| 国产精品 国内视频| 亚洲精品在线美女| 亚洲人成伊人成综合网2020| 一a级毛片在线观看| 国产人伦9x9x在线观看| 久久香蕉国产精品| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 97碰自拍视频| 国产单亲对白刺激| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 制服人妻中文乱码| 国产一区二区在线av高清观看| 男人的好看免费观看在线视频 | 国产激情久久老熟女| 丝袜在线中文字幕| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 日本a在线网址| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲美女黄片视频| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲中文字幕日韩| 18禁美女被吸乳视频| 怎么达到女性高潮| 神马国产精品三级电影在线观看 | 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产成人精品久久二区二区免费| 日本a在线网址| 久热爱精品视频在线9| 禁无遮挡网站| 免费看a级黄色片| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲av成人av| 无限看片的www在线观看| 欧美在线一区亚洲| 久久久久久免费高清国产稀缺| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 久久影院123| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲av五月六月丁香网| 久久久国产成人免费| 亚洲成人精品中文字幕电影| av天堂久久9| 视频区欧美日本亚洲| 女性被躁到高潮视频| 91国产中文字幕| 日本五十路高清| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美乱色亚洲激情| 男人的好看免费观看在线视频 | 身体一侧抽搐| x7x7x7水蜜桃| 国产免费av片在线观看野外av| 窝窝影院91人妻| 亚洲av第一区精品v没综合| 一二三四在线观看免费中文在| 午夜精品在线福利| 91成人精品电影| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 99在线人妻在线中文字幕| 欧美乱色亚洲激情| 91国产中文字幕| 最好的美女福利视频网| 亚洲第一电影网av| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲专区字幕在线| 在线观看免费日韩欧美大片| 午夜影院日韩av| 中文字幕最新亚洲高清| 久久久国产精品麻豆| 女性被躁到高潮视频| tocl精华| 啦啦啦免费观看视频1| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲五月色婷婷综合| 精品国产一区二区久久| avwww免费| 可以在线观看毛片的网站| 日本免费a在线| 亚洲电影在线观看av| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 亚洲,欧美精品.| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 久久精品91无色码中文字幕| 久久欧美精品欧美久久欧美| 伦理电影免费视频| 90打野战视频偷拍视频| 女同久久另类99精品国产91| 两人在一起打扑克的视频| 1024香蕉在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| 1024视频免费在线观看| 国产av在哪里看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 午夜a级毛片| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 午夜免费鲁丝| 亚洲精品美女久久av网站| 国产精品野战在线观看| 久久久久久大精品| 香蕉久久夜色| 亚洲七黄色美女视频| 成年版毛片免费区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 一进一出抽搐gif免费好疼| 老司机午夜福利在线观看视频| 午夜福利,免费看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产免费av片在线观看野外av| 看黄色毛片网站| 久久精品成人免费网站| 国产野战对白在线观看| 我的亚洲天堂| 久久久久久久精品吃奶| 韩国精品一区二区三区| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲五月色婷婷综合| 女人精品久久久久毛片| 国产精品二区激情视频| 色老头精品视频在线观看| 女警被强在线播放| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美乱色亚洲激情| 久久久国产成人免费| 久久亚洲精品不卡| 麻豆一二三区av精品| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产野战对白在线观看| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 成人av一区二区三区在线看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 搡老岳熟女国产| 亚洲色图综合在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 村上凉子中文字幕在线| 欧美最黄视频在线播放免费| 色精品久久人妻99蜜桃| 村上凉子中文字幕在线| 99精品在免费线老司机午夜| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲在线自拍视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 精品电影一区二区在线| 正在播放国产对白刺激| 精品免费久久久久久久清纯| 999久久久国产精品视频| 午夜久久久久精精品| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 悠悠久久av| 国产片内射在线| 制服丝袜大香蕉在线| 丝袜在线中文字幕| www.熟女人妻精品国产| 日本免费a在线| 亚洲全国av大片| 日韩欧美在线二视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲成人免费电影在线观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 在线观看一区二区三区| 国产亚洲精品av在线| 青草久久国产| 国产主播在线观看一区二区| 美国免费a级毛片| 操出白浆在线播放| 欧美激情 高清一区二区三区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲专区中文字幕在线|