姜黃素對(duì)TPA誘導(dǎo)的銀屑病小鼠模型血清ASO和IL-8水平的影響研究

孫穎

（長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院皮膚科，吉林長春130021）

姜黃素對(duì)TPA誘導(dǎo)的銀屑病小鼠模型血清ASO和IL-8水平的影響研究

孫穎

（長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院皮膚科，吉林長春130021）

目的探究姜黃素對(duì)佛波酯(phorbol ester，TPA）誘導(dǎo)的銀屑病小鼠模型血清抗鏈球菌溶血素“O”(antistreptolysin“O”，ASO）和白細(xì)胞介素-8(Interleukin-8，IL-8）水平的影響。方法選取132只SCID小鼠，將其分為3組。正常組43只，模型組46只，干預(yù)組43只。采用佛波酯誘導(dǎo)，將模型組及干預(yù)組小鼠建立銀屑病模型。3組小鼠在相同環(huán)境下飼養(yǎng)，予干預(yù)組小鼠姜黃素，0.02 g/100 g溶于3mL雙蒸水中灌胃，每天1次，2周為1個(gè)療程。治療結(jié)束后，對(duì)3組小鼠進(jìn)行血清抗鏈球菌溶血素“O”(ASO）和白細(xì)胞介素-8(IL-8）水平進(jìn)行比較。結(jié)果治療前，與正常組小鼠血清抗鏈球菌溶血素“O”陽性率比較，干預(yù)組及模型組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）；治療后，干預(yù)組顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）；治療前，與正常組IL-8比較，干預(yù)組及模型組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）；治療后，干預(yù)組小鼠白細(xì)胞介素-8顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。結(jié)論姜黃素可有效降低銀屑病小鼠模型血清抗鏈球菌溶血素“O”(ASO）和白細(xì)胞介素-8(IL-8）水平，改善銀屑病小鼠的臨床不良癥狀，是治療銀屑病的有效藥物。

姜黃素；TPA誘導(dǎo)；銀屑?。恍∈竽Ｐ?；ASO；IL-8

銀屑病，又稱牛皮癬，由于先天遺傳、細(xì)菌真菌等感染、免疫系統(tǒng)功能下降以及內(nèi)分泌失調(diào)等多種原因，導(dǎo)致發(fā)生在皮膚表面的一種慢性炎性皮膚病。臨床表現(xiàn)為頭部、四肢側(cè)面皮膚出現(xiàn)紅斑、膿瘡、脫皮，可伴有關(guān)節(jié)部紅腫變形等癥狀。本病與氣候有關(guān)，冬季加重，多發(fā)于青壯年。有關(guān)數(shù)據(jù)顯示［1-2］，我國銀屑病患者高達(dá)450萬，全世界約有1.25億的銀屑病患者，我國銀屑病患者高達(dá)450萬，其發(fā)病率約占世界人口的1.3%～2.9%。銀屑病作為一類較為頑固的皮膚病，治愈率較低，且反復(fù)發(fā)作，影響美觀，對(duì)患者產(chǎn)生了嚴(yán)重的心理負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致部分患者出現(xiàn)心理問題。為了提高銀屑病的治療效果，降低由于皮膚紅腫、脫皮等不良反應(yīng)表現(xiàn)對(duì)患者造成的身心創(chuàng)傷，國內(nèi)外許多專家學(xué)者對(duì)銀屑病的發(fā)病及治療進(jìn)行了大量研究。有關(guān)研究顯示［3］，血清抗鏈球菌溶血素“O”，是指機(jī)體曾感染過鏈球菌，進(jìn)而產(chǎn)生了鏈球菌溶血素“O”抗體，其含量的升高，說明體內(nèi)鏈球菌的數(shù)量較多，說明炎癥反應(yīng)強(qiáng)烈；白細(xì)胞介素-8，是一種炎癥細(xì)胞的趨化因子，可調(diào)節(jié)細(xì)胞炎癥反應(yīng)，其含量升高提示患者體內(nèi)炎癥反應(yīng)強(qiáng)烈且炎癥持續(xù)。姜黃素，是從姜料等植物根莖中提取的一種二酮類化合物，廣泛用于醫(yī)療、工業(yè)等方面，有一定的抗炎、抗氧化作用。為了進(jìn)一步探究姜黃素對(duì)銀屑病患者血清抗鏈球菌溶血素“O”及白細(xì)胞介素-8水平的影響，筆者進(jìn)行了相關(guān)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 隨機(jī)選取132只重癥聯(lián)合免疫缺陷（severe combined immunodeficiency，SCID）小鼠，體質(zhì)量23.1～25.3 g，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)有限公司提供。將其隨機(jī)分為3組。正常組43只，雄性22只，雌性21只，模型組46只，其中雄性22只，雌性24只；干預(yù)組43只，其中雄性22只，雌性21只。采用佛波酯誘導(dǎo)，將模型組及干預(yù)組小鼠建立銀屑病模型。參照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》［4］，對(duì)小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，3組小鼠體重、飼養(yǎng)方式等一般資料相仿，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本實(shí)驗(yàn)遵循《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保護(hù)條例》。

1.2 主要試劑 佛波酯TPA PMA（524400，上海歐偉達(dá)儀器科技有限公司）；姜黃素HPLC≥98%，20mg/支，JKB086a1，上海經(jīng)科化學(xué)科技有限公司；小鼠血清抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）（D80411，上海建成生物科技有限公司）；白細(xì)胞介素-8（IL-8）（J30511，上海建成生物科技有限公司）

1.3 制備模型 參照《銀屑病小鼠模型制備》［5］，對(duì)模型組與干預(yù)組SCID小鼠進(jìn)行一般飼養(yǎng)，在溫度、適度等環(huán)境事宜的情況下，飼養(yǎng)1周。待小鼠適應(yīng)環(huán)境，體內(nèi)各項(xiàng)激素基本穩(wěn)定后，對(duì)其進(jìn)行佛波酯（TPA）0.5μg/100 g皮下注射12 d，制備銀屑病的小鼠模型。隨機(jī)抓取模型組小鼠，進(jìn)行組織學(xué)檢測(cè)。參照2009年制定的《銀屑病小鼠模型標(biāo)準(zhǔn)》［5］受累皮膚與正常皮膚界限明顯，組織學(xué)顯示濾泡間上皮增厚，鱗片的角化不全，粒細(xì)胞層消失，上真皮層血管增生明顯，提示模型復(fù)制成功。

1.4 方法 正常組、模型組、干預(yù)組小鼠在相同環(huán)境下飼養(yǎng)，予干預(yù)組小鼠姜黃素0.02 g/100 g溶于3mL雙蒸水中灌胃，每日1次，2周為1個(gè)療程。治療前后，分別采小鼠空腹靜脈血2 mL，3 000 r/min離心10 min，取上層澄清液，-65℃保溫備用。采用ASO和IL-8試劑盒對(duì)和白細(xì)胞介素-8（IL-8）水平進(jìn)行檢測(cè)。

1.5 監(jiān)測(cè)指標(biāo) 對(duì)3組小鼠治療前后血清抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）和白細(xì)胞介素-8（IL-8）水平的變化情況進(jìn)行比較。血清抗鏈球菌溶血素“O”，采用膠乳凝聚法，其含量大于2×105KU/L為陽性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，正態(tài)計(jì)量數(shù)據(jù)用±s”表示，正態(tài)資料組間比較采用t檢驗(yàn)，樣本率的比較采用卡方檢驗(yàn)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組小鼠治療前后血清抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）水平比較 治療前，與正常組小鼠血清抗鏈球菌溶血素“O”陽性率比較，干預(yù)組及模型組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療后，干預(yù)組小鼠血清抗鏈球菌溶血素“O”陽性率顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表1）。

表1 3組小鼠治療前后血清抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）水平情況Tab.1 Comparison of ASO among three groups

2.2 3組小鼠治療前后白細(xì)胞介素-8（IL-8）水平比較 治療前，與正常組小鼠白細(xì)胞介素-8比較，干預(yù)組及模型組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療后，干預(yù)組小鼠白細(xì)胞介素-8顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表2）。

表2 3組小鼠治療前后白細(xì)胞介素-8（IL-8）水平情況Tab.2 Comparison of IL-8 among three groups

3 討論

有關(guān)研究顯示［6-9］，姜黃素，是從姜料等植物的根莖部位提取出的一類二酮類化合物，具有良好的抗炎作用，臨床上多用于反復(fù)發(fā)作的炎癥患者。由于其為植物性提取物，故廣泛用于工業(yè)及食品添加劑，含量控制在一定范圍對(duì)人體無不良的影響，目前作為銀屑病的治療藥物，逐漸被大家熟識(shí)。血清抗鏈球菌溶血素“O”，是機(jī)體經(jīng)過鏈球菌的感染，進(jìn)而產(chǎn)生的一種抗體，當(dāng)機(jī)體再次接觸鏈球菌后，可發(fā)生不同程度的炎癥反應(yīng)，其含量的高低，可提示機(jī)體炎癥反應(yīng)的程度；白介素-8，是機(jī)體炎癥細(xì)胞的趨化因子，對(duì)炎癥反應(yīng)有一定的調(diào)節(jié)作用。為了進(jìn)一步探究姜黃素對(duì)銀屑病的作用效果，筆者通過對(duì)既往文獻(xiàn)的研究分析，結(jié)合臨床試驗(yàn)，建立了銀屑病小鼠模型，對(duì)此進(jìn)行了相關(guān)研究。

本實(shí)驗(yàn)中，治療前，與正常組小鼠血清抗鏈球菌溶血素“O”陽性率比較，干預(yù)組及模型組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），趙京霞等［10］對(duì)193只小鼠進(jìn)行了銀屑病建模，并對(duì)建模后小鼠血清抗鏈球菌溶血素“O”進(jìn)行了相關(guān)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)銀屑病小鼠模型的血清抗鏈球菌溶血素“O”顯著升高，提示銀屑病模型有鏈球菌感染，這一結(jié)果與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致；治療后，干預(yù)組小鼠血清抗鏈球菌溶血素“O”陽性率顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），汪五清等［11］對(duì)78例銀屑病小鼠模型進(jìn)行了姜黃素的治療干預(yù)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療后小鼠體內(nèi)血清抗鏈球菌溶血素“O”的含量有所減少，提示小鼠體內(nèi)炎癥反應(yīng)減弱，銀屑病癥狀有所改善，說明姜黃素是治療銀屑病的有效藥物。治療前，與正常組小鼠白細(xì)胞介素-8比較，干預(yù)組及模型組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），李偉等［12］對(duì)109例小鼠進(jìn)行了銀屑病造模，并進(jìn)行了相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)造模后的小鼠體內(nèi)白細(xì)胞介素-8的含量顯著升高，白細(xì)胞介素-8是炎癥細(xì)胞的趨化因子，其含量的升高說明體內(nèi)發(fā)生明顯的炎癥反應(yīng)，提示免疫系統(tǒng)出現(xiàn)異常，說明銀屑病小鼠體內(nèi)有明顯的炎癥反應(yīng)，這與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致；治療后，干預(yù)組小鼠白細(xì)胞介素-8顯著低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），孫軍等［13］采用姜黃素對(duì)78例銀屑病小鼠模型進(jìn)行了治療，發(fā)現(xiàn)經(jīng)姜黃素治療后，小鼠體內(nèi)白細(xì)胞介素-8的含量逐漸下降，并趨近于正常范圍，提示小鼠體內(nèi)的炎癥反應(yīng)得到控制，自身免疫系統(tǒng)恢復(fù)正常，說明姜黃素是治療銀屑病的有效藥物。

綜上所述，姜黃素可顯著降低銀屑病小鼠模型血清抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）和白細(xì)胞介素-8（IL-8）水平，調(diào)節(jié)體內(nèi)炎癥反應(yīng)、控制細(xì)菌感染，是治療銀屑病的有效藥物，值得臨床廣泛推廣。

［1］ 趙一.姜黃素影響HaCaT細(xì)胞增殖的靶點(diǎn)及對(duì)TPA誘導(dǎo)的銀屑病小鼠模型的作用研究［D］.第二軍醫(yī)大學(xué)，2013.

［2］張穎鵬，劉志剛，任詩峰，等.姜黃素治療銀屑病臨床療效觀察及對(duì)NF-kappaB活化的影響［J］.江西醫(yī)藥，2012，47(11）：944-946.

［3］ 彭立新，李新宇，宋莎莎，等.姜黃素對(duì)THP-1細(xì)胞NF-κB、TNF-α、IL-1βmRNA表達(dá)的影響及體內(nèi)抗炎作用的研究［C］.第十屆全國抗炎免疫藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集.2010：80.

［4］董育強(qiáng).姜黃素治療銀屑病的研究進(jìn)展［J］.湖北中醫(yī)雜志，2014，36(6）：77-78.

［5］余美榮，蔣福升，丁志山，等.姜黃素的研究進(jìn)展［J］.中草藥，2009，40(5）：828-831.

［6］趙珍東.姜黃素抗肝纖維化作用及機(jī)理研究［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16(3）：122-125.

［7］涂永元，徐先祥，邱飛，等.姜黃素前藥的研究進(jìn)展［J］.有機(jī)化學(xué)，2012，32(5）：852-859.

［8］曹雁平，矯慶澤.超聲功率、頻率對(duì)姜黃素浸取的影響與動(dòng)力學(xué)模型［J］.高校化學(xué)工程學(xué)報(bào)，2011，25(2）：212-218.

［9］劉麗紅，夏志寬，趙志力，等.血卟啉單甲醚在銀屑病免疫缺陷小鼠模型的體內(nèi)分布［J］.實(shí)用皮膚病學(xué)雜志，2011，04(3）：133-135.

［10］趙京霞，底婷婷，王燕，等.IL-23/IL-17炎癥軸在咪喹莫特誘導(dǎo)的小鼠銀屑病樣皮膚損害中的作用［J］.中國病理生理雜志，2013，29(6）：1086-1094.

［11］汪五清，顧軍.銀屑病動(dòng)物模型［J］.中國麻風(fēng)皮膚病雜志，2009，25(7）：523-525.

［12］ 李偉.銀屑病表皮角質(zhì)形成細(xì)胞糖皮質(zhì)激素受體核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)障礙的機(jī)制與功能研究［D］.浙江大學(xué)，2012.

［13］孫軍.閏黃素促HaCaT細(xì)胞調(diào)亡機(jī)理及對(duì)小鼠銀屑病治療研究［D］.第二軍醫(yī)大學(xué)，2013.

（編校：譚玲）

Im pact study of curcum in on ASO and IL-8 level changes in serum of psoriatic m icemodel induced by TPA

SUN Ying

（Department of Skin，The Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine，Changchun 130021，China）

ObjectiveTo explore the impact of curcumin on antistreptolysin“O”（ASO）and interleukin 8（IL-8）level changes in serum of psoriatic micemodel induced by phorbol ester（TPA）.Methods132 SCID mice were selected and divided into three groups.43 mice in normal group，46mice inmodelgroup，and 43mice in intervention group.Themice ofmodelgroup and intervention group were setup psoriasismodel induced by TPA. Mice of the three groupswere bred in the same environment，curcumin was injected in the intervention group mice，0.02 g/100 g，once a day，twoweeks for a period of treatment.ASO and IL-8 levelwere compared amorg the three groups ofmice after treatment.ResultsBefore the treatment，compared with the normal group，positive rate of ASO inmodelgroup and intervention group increased significantly，and the differencewas statistically significant（P＜0.05）；after treatment，the level of intervention group was significantly lower than model group，and the difference was statistically significant（P＜0.05）；before the treatment，compared with the normal group，IL-8 level in intervention group and model group increased significantly，and the difference was statistically significant（P＜0.05）；after treatment，level of the intervention group was significantly lower than model group，and the difference was statistically significant（P＜0.05）.ConclusionCurcumin could effectively reduce ASO and IL-8 level in serum of psoriaticmicemodel，improve the clinical symptoms of psoriasismice，it is an effective drug for treatment of psoriasis.

curcumin；TPA induce；psoriatic mousemodel；ASO；IL-8

R656.6

A

1005-1678(2014）07-0046-03

吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（20130727016yy）

孫穎，女，碩士，副教授，主治醫(yī)師，研究方向：中西醫(yī)結(jié)合治療皮膚病，E-mail：drsunying@126.com。