魔芋精粉對大鼠酒精性肝損傷保護作用的研究

杜茂波++鞏橋

[摘要] 目的 研究魔芋精粉對大鼠酒精性肝損傷的保護作用。 方法 將40只SD大鼠隨機分為正常對照組（10只）、模型組（14只）、魔芋精粉組（16只），用白酒灌胃的方式建立大鼠酒精性肝損傷模型，12周后，測定大鼠血液中丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST）及肝組織水平。 結果 魔芋精粉組中ALT、AST的含量均低于模型組（P<0.05），大鼠肝組織中丙二醛含量低于模型組（P<0.05），超氧化物歧化酶活性高于模型組（P<0.05）。 結論 魔芋精粉對酒精性肝損傷有一定的保護作用。

[關鍵詞] 魔芋精粉；酒精性肝損傷；保護作用

[中圖分類號] R285.5[文獻標識碼] A[文章編號] 1674-4721（2014）06（b）-0018-03

Protective effect study of konjac powder in rats with alcoholic liver injury

DU Mao-bo1 GONG Qiao2

1.Research Center of Chinese Materia Medica Preparation,Institute of Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100700,China;2.Research and Development Center of Moli Technology,Mianyang City in Sichuan Province,Mianyang 621000,China

[Abstract] Objective To study the protective effect of konjac powder in rats with alcoholic liver injury. Methods Forty SD rats were randomly divided into 3 groups: normal group (n=10),model group (n=14),and konjac powder group (n=16).The model of rat with alcoholic liver injury was created by liquor gavage.After 12 weeks,the levels of alanine transaminase (ALT),aspartate aminotransferase (AST),and hepatic tissues in rat′s blood were measured. Results In comparison with the model group,the content of ALT and AST in the konjac powder group were both lower (P<0.05).The content of methane dicarboxylic aldehyde from hepatic tissue in rat in the konjac powder group was lower than that in the model group (P<0.05).The activity of superoxide dismutase from hepatic tissue in konjac powder group was higher than that in the model group (P<0.05). Conclusion Konjac powder has a certain protective effect on alcoholic liver injury.

[Key words] Konjac powder;Alcoholic liver injury;Protective effect

魔芋精粉作為食品天然原料歷史較悠久，對于現今的技術等級和消費水平，其仍然是新的食品成分。傳統(tǒng)魔芋食品具有特殊彈性、口感和保健功能。由酒精性肝損傷而引起的酒精性肝病，發(fā)病率也出現不斷增加的趨勢，成為第二大類肝病[1]。目前人們對酒精的任意使用和相對酒精依賴已經成為當今社會關注的重大問題[2]。魔芋中的主要有效成分為魔芋葡甘露聚糖，約占85%。在我國醫(yī)藥領域范圍內，魔芋精粉具有調節(jié)脂肪正常代謝等作用。近年來，科學工作者潛心大量研究其在食品工業(yè)中的應用。本研究探討魔芋精粉對酒精性肝損傷的保護作用，以期為魔芋精粉防治酒精性肝病的實驗研究和臨床應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 動物

雄性Wistar大鼠40只，體重（240±25） g，由軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。

1.2 藥物

魔芋精粉由四川魔力科技有限公司提供，生產批號：130824-B。

1.3 試劑

無水乙醇（北京化工廠）；丙氨酸氨基轉移酶（ALT）試劑盒（20100827）；超氧化物歧化酶（SOD）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST）檢測試劑盒（南京建成生物工程研究所提供，批號130912）；丙二醛（MDA）檢測試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號13821）。

1.4 方法

1.4.1 魔芋精粉的制備魔芋片通過研磨粉碎成粉，粒度在80目。由于魔芋精粉和飛粉之間密度相差很大，因此采用旋風分離機分離提取魔芋精粉。過60目篩子，稱量40 g魔芋精粉于500 ml蒸餾水中溶解，每毫升約含葡甘露聚糖84%。

1.4.2 實驗分組、給藥購買40只大鼠，適當喂養(yǎng)5 d后，將其隨機分為3組。①模型組（14只）：白酒用蒸餾水調配成乙醇濃度45%的白酒，依據10 ml/kg，2次/d灌胃造模[3]，造模需12周[4]；②魔芋精粉組（16只）：除每天白酒灌胃外（方法同模型組），魔芋精粉灌胃12周；③正常對照組（10只）：采用鹽水（0.9%NaCl）灌胃（方法同模型組）灌胃12周，處死，解剖肝臟，觀察肝細胞脂肪變化和酒精性肝損傷程度。

1.4.3 酒精性肝損傷模型大鼠血清ALT、AST活性測定取上述各組實驗大鼠，采用眼眶取血，經3500 r/min后，取上清液，測定ALT、AST活性。

1.4.4 酒精性肝損傷模型大鼠肝臟SOD活性、MDA含量測定各組大鼠取血后處死，立即取肝，生理鹽水清洗擦干，稱重，按比例重量與體積相比加入生理鹽水，制備成10%勻漿，分別測定SOD、MDA活性。

1.4.5 肝組織病理變化大鼠經處死后取肝左葉，用10%的甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋、切片（片厚0.4 μm），HE染色，光鏡下查看變化。

1.5 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數據分析，計量資料以x±s表示，采用方差齊性（t）分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST含量的影響

模型組ALT、AST的活性明顯高于正常對照組（P<0.05），說明酒精性肝損傷模型建立成功；魔芋精粉組ALT、AST活性高于正常對照組（P<0.05），低于模型組（P<0.05），說明魔芋精粉能夠減輕酒精性肝損傷，保護肝臟，在一定程度上抑制ALT和AST活性（表1）。

表1 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST含量的

影響（U/L，x±s）

與正常對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.2 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的影響

與正常對照組比較，模型組MDA含量顯著升高（P<0.05），肝細胞氧化受損；魔芋精粉組MDA含量高于正常對照組（P<0.05），低于模型組（P<0.05）。與正常對照組比較，模型組SOD活性顯著降低（P<0.05），是由于模型組大鼠長期攝入酒精，肝臟SOD清除大量自由基和脂質過氧化物而大量消耗；魔芋精粉組SOD活性顯著低于正常對照組（P<0.05），高于模型組（P<0.05）（表2）。

表2 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的

影響（mol/ml，x±s）

與正常對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.3 肝組織的病理變化

大鼠解剖后肉眼觀察可見，正常對照組大鼠肝臟結構正常，無肝細胞脂肪病變壞死；模型組的肝小葉結構受到破壞，肝細胞水腫發(fā)生變性，肝細胞脂肪出現病變；魔芋精粉組較模型組肝細胞水腫程度減輕，肝小葉結構也基本正常（圖1）。

正常對照組 模型組魔芋精粉組

圖1 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝組織的影響（HE，×400）

3 討論

中醫(yī)學書目中雖然沒有明確記錄“酒精性肝損傷”的病名，但長期飲酒會造成嚴重傷害[5]。根據病情在臨床上的突出表現，可以把它稱為醫(yī)學的“傷酒”“酒癖”“酒脹”“酒疸”等范疇。醫(yī)學領域中，科學家對酒精性肝損傷病已經早有研究[6]。

本次研究證實大鼠酒精性肝損傷模型有很好效果，通過魔芋精粉模型組大量的灌胃實驗，大鼠肝組織輕度脂肪變性[7]。ALT和AST存在肝細胞漿和線粒體轉氨酶，當肝細胞發(fā)生病變，ALT、AST會滲漏入血，所有血清中ALT、AST活性是大鼠肝損傷的定性指標[8]。MDA是機體進行脂質代謝產生的終產物，過多會導致細胞死亡，因此MDA是肝組織過氧化損傷程度的衡量指標[9-10]。本實驗顯示大鼠血清ALT、AST升高，研究中發(fā)現魔芋精粉可降低ALT、AST含量，對大鼠肝損傷有保護作用。模型組大鼠肝組織中SOD活性降低，MDA含量增加。機體長期攝入酒精，代謝產生自由基引起SOD耗盡，自身抗氧化受損，引起自由基堆積，脂質過氧化，因此MDA會增加[11]。本實驗由于灌胃魔芋精粉，肝組織SOD活性提高，MDA含量降低，說明魔芋精粉可提高肝臟抗氧化能力，減少體內自由基和脂質過氧化，對大鼠肝臟損傷起到保護作用。

本文通過魔芋精粉組模型對酒精性肝損傷模型的保護作用，評價了對肝損傷的修復作用，并初探保護的機制，為魔芋精粉功能性產品的開發(fā)奠定了實驗依據和理論基礎。

[參考文獻]

[1]鞠輝，魏良洲.酒精性肝病的流行病學現狀[J].肝臟，2006，2（11）：57.

[2]Moriarty KJ，Platt H，Crompton S，et al.Collaborative care alcohol related liver disease[J].Clin Med，2007，7（2）：125-128.

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[6]劉紅，王曉，周平，等.魔芋多糖對大鼠組織脂的影響[J].現代預防醫(yī)學，2009，36（17）：342-343.

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[8]吳偉青，陳靜，劉超群，等.綠茶多酚對小鼠肝損傷的保護作用[J].食品科學，2012，33（13）：22-23.

[9]Masalkar PD，Abhang SA.Oxidative stress and antioxidant srarus in patients with alcoholic liver disease[J].Clin Chim Acta，2009，345（3）：57-60.

[10]劉同剛，沙凱輝，王邦茂，等.三七對大鼠急性酒精肝損傷保護作用的實驗研究[J].山東醫(yī)藥，2010，48（6）：34-36.

[11] 龐杰，李斌，謝筆鈞，等.氧化魔芋葡甘聚糖結構研究[J].結構化學，2012，23（6）：103-104.

（收稿日期：2014-03-05本文編輯：郭靜娟）

表1 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST含量的

影響（U/L，x±s）

與正常對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.2 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的影響

與正常對照組比較，模型組MDA含量顯著升高（P<0.05），肝細胞氧化受損；魔芋精粉組MDA含量高于正常對照組（P<0.05），低于模型組（P<0.05）。與正常對照組比較，模型組SOD活性顯著降低（P<0.05），是由于模型組大鼠長期攝入酒精，肝臟SOD清除大量自由基和脂質過氧化物而大量消耗；魔芋精粉組SOD活性顯著低于正常對照組（P<0.05），高于模型組（P<0.05）（表2）。

表2 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的

影響（mol/ml，x±s）

與正常對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.3 肝組織的病理變化

大鼠解剖后肉眼觀察可見，正常對照組大鼠肝臟結構正常，無肝細胞脂肪病變壞死；模型組的肝小葉結構受到破壞，肝細胞水腫發(fā)生變性，肝細胞脂肪出現病變；魔芋精粉組較模型組肝細胞水腫程度減輕，肝小葉結構也基本正常（圖1）。

正常對照組 模型組魔芋精粉組

圖1 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝組織的影響（HE，×400）

3 討論

中醫(yī)學書目中雖然沒有明確記錄“酒精性肝損傷”的病名，但長期飲酒會造成嚴重傷害[5]。根據病情在臨床上的突出表現，可以把它稱為醫(yī)學的“傷酒”“酒癖”“酒脹”“酒疸”等范疇。醫(yī)學領域中，科學家對酒精性肝損傷病已經早有研究[6]。

本次研究證實大鼠酒精性肝損傷模型有很好效果，通過魔芋精粉模型組大量的灌胃實驗，大鼠肝組織輕度脂肪變性[7]。ALT和AST存在肝細胞漿和線粒體轉氨酶，當肝細胞發(fā)生病變，ALT、AST會滲漏入血，所有血清中ALT、AST活性是大鼠肝損傷的定性指標[8]。MDA是機體進行脂質代謝產生的終產物，過多會導致細胞死亡，因此MDA是肝組織過氧化損傷程度的衡量指標[9-10]。本實驗顯示大鼠血清ALT、AST升高，研究中發(fā)現魔芋精粉可降低ALT、AST含量，對大鼠肝損傷有保護作用。模型組大鼠肝組織中SOD活性降低，MDA含量增加。機體長期攝入酒精，代謝產生自由基引起SOD耗盡，自身抗氧化受損，引起自由基堆積，脂質過氧化，因此MDA會增加[11]。本實驗由于灌胃魔芋精粉，肝組織SOD活性提高，MDA含量降低，說明魔芋精粉可提高肝臟抗氧化能力，減少體內自由基和脂質過氧化，對大鼠肝臟損傷起到保護作用。

本文通過魔芋精粉組模型對酒精性肝損傷模型的保護作用，評價了對肝損傷的修復作用，并初探保護的機制，為魔芋精粉功能性產品的開發(fā)奠定了實驗依據和理論基礎。

[參考文獻]

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[10]劉同剛，沙凱輝，王邦茂，等.三七對大鼠急性酒精肝損傷保護作用的實驗研究[J].山東醫(yī)藥，2010，48（6）：34-36.

[11] 龐杰，李斌，謝筆鈞，等.氧化魔芋葡甘聚糖結構研究[J].結構化學，2012，23（6）：103-104.

（收稿日期：2014-03-05本文編輯：郭靜娟）

表1 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠血清ALT、AST含量的

影響（U/L，x±s）

與正常對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.2 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的影響

與正常對照組比較，模型組MDA含量顯著升高（P<0.05），肝細胞氧化受損；魔芋精粉組MDA含量高于正常對照組（P<0.05），低于模型組（P<0.05）。與正常對照組比較，模型組SOD活性顯著降低（P<0.05），是由于模型組大鼠長期攝入酒精，肝臟SOD清除大量自由基和脂質過氧化物而大量消耗；魔芋精粉組SOD活性顯著低于正常對照組（P<0.05），高于模型組（P<0.05）（表2）。

表2 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝臟MDA含量、SOD活性的

影響（mol/ml，x±s）

與正常對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，#P<0.05

2.3 肝組織的病理變化

大鼠解剖后肉眼觀察可見，正常對照組大鼠肝臟結構正常，無肝細胞脂肪病變壞死；模型組的肝小葉結構受到破壞，肝細胞水腫發(fā)生變性，肝細胞脂肪出現病變；魔芋精粉組較模型組肝細胞水腫程度減輕，肝小葉結構也基本正常（圖1）。

正常對照組 模型組魔芋精粉組

圖1 魔芋精粉對酒精性肝損傷大鼠肝組織的影響（HE，×400）

3 討論

中醫(yī)學書目中雖然沒有明確記錄“酒精性肝損傷”的病名，但長期飲酒會造成嚴重傷害[5]。根據病情在臨床上的突出表現，可以把它稱為醫(yī)學的“傷酒”“酒癖”“酒脹”“酒疸”等范疇。醫(yī)學領域中，科學家對酒精性肝損傷病已經早有研究[6]。

本次研究證實大鼠酒精性肝損傷模型有很好效果，通過魔芋精粉模型組大量的灌胃實驗，大鼠肝組織輕度脂肪變性[7]。ALT和AST存在肝細胞漿和線粒體轉氨酶，當肝細胞發(fā)生病變，ALT、AST會滲漏入血，所有血清中ALT、AST活性是大鼠肝損傷的定性指標[8]。MDA是機體進行脂質代謝產生的終產物，過多會導致細胞死亡，因此MDA是肝組織過氧化損傷程度的衡量指標[9-10]。本實驗顯示大鼠血清ALT、AST升高，研究中發(fā)現魔芋精粉可降低ALT、AST含量，對大鼠肝損傷有保護作用。模型組大鼠肝組織中SOD活性降低，MDA含量增加。機體長期攝入酒精，代謝產生自由基引起SOD耗盡，自身抗氧化受損，引起自由基堆積，脂質過氧化，因此MDA會增加[11]。本實驗由于灌胃魔芋精粉，肝組織SOD活性提高，MDA含量降低，說明魔芋精粉可提高肝臟抗氧化能力，減少體內自由基和脂質過氧化，對大鼠肝臟損傷起到保護作用。

本文通過魔芋精粉組模型對酒精性肝損傷模型的保護作用，評價了對肝損傷的修復作用，并初探保護的機制，為魔芋精粉功能性產品的開發(fā)奠定了實驗依據和理論基礎。

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[5] 黃訓端，何家慶.我國酒精性肝病的流行病學現狀[J].肝組織，2006，2（12）：56-57.

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[7]張茂玉，黃承玨，沈君蓉，等.魔芋食品對人體脂質代謝影響的研究[J].營養(yǎng)學報，1989，11（2）：22-24.

[8]吳偉青，陳靜，劉超群，等.綠茶多酚對小鼠肝損傷的保護作用[J].食品科學，2012，33（13）：22-23.

[9]Masalkar PD，Abhang SA.Oxidative stress and antioxidant srarus in patients with alcoholic liver disease[J].Clin Chim Acta，2009，345（3）：57-60.

[10]劉同剛，沙凱輝，王邦茂，等.三七對大鼠急性酒精肝損傷保護作用的實驗研究[J].山東醫(yī)藥，2010，48（6）：34-36.

[11] 龐杰，李斌，謝筆鈞，等.氧化魔芋葡甘聚糖結構研究[J].結構化學，2012，23（6）：103-104.

（收稿日期：2014-03-05本文編輯：郭靜娟）