三種不同包衣材料對(duì)五種益生菌保存期的研究

劉慧+鄒玲+溫建新

摘 要：益生菌有益于機(jī)體健康，但在生產(chǎn)、保存過(guò)程中其活性常會(huì)降低；而包衣材料可以提高益生菌的穩(wěn)定性，從而更好地使其發(fā)揮益生作用。試驗(yàn)通過(guò)平板計(jì)數(shù)法來(lái)評(píng)價(jià)3種包衣材料對(duì)5種不同益生菌（糞腸球菌、雙歧桿菌、酵母菌、芽孢桿菌、乳酸菌）的保護(hù)作用。結(jié)果表明，3種包衣材料對(duì)糞腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌、酵母菌和芽孢桿菌均有一定保護(hù)作用，其中，20 d內(nèi)，包衣材料2對(duì)5種益生菌的保護(hù)作用較強(qiáng)；60 d內(nèi)，則是包衣材料1對(duì)5種益生菌的保護(hù)作用較強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：包衣材料；益生菌；保護(hù)作用

中圖分類號(hào)：TS201.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2017.02.019

Abstract： Probiotics can promote the health of the body， but they will reduce the activity in the process of production and preservation. The coating material can improve the stability of the probiotics， and thus better play its prebiotic effect. In this study， the protective effect of three coating materials on five probiotics （Enterococcus faecalis， Bifidobacterium， yeasts， Bacillus， Lactobacillus） was evaluated by plate counting method. The results showed that three kinds of coating materials had some protective effects on Enterococcus faecalis， Lactobacillus， Bifidobacterium， Saccharomyces and Bacillus. In 20 days， the protective effect of coating 2 on five probiotics was stronger； within 60 days， the protective effect of coating 1 on five probiotics was stronger.

Key words： coating materials； probiotics； protection

益生菌具有促進(jìn)機(jī)體健康的作用，同時(shí)還有抗癌作用，對(duì)腸炎類疾病也有抑制作用[1]。益生菌制劑沒有殘留，沒有副作用、不會(huì)產(chǎn)生抗藥性，其開發(fā)前景以及發(fā)展前景非常廣闊[2]。在加工、運(yùn)輸、貯存過(guò)程中，益生菌的活菌制劑容易失活，或者生物活性降低，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定[3]。在此方面包衣材料有著明顯的優(yōu)勢(shì)。

包衣技術(shù)是當(dāng)今世界發(fā)展最為迅速的新型細(xì)胞技術(shù)之一，且用途廣泛。包衣材料應(yīng)用于益生菌的生產(chǎn)中很好地解決了益生菌不易大量生產(chǎn)和儲(chǔ)存期短等問題。益生菌在防治疾病和抗生素替代等方面展現(xiàn)出非凡的潛力，國(guó)際營(yíng)養(yǎng)學(xué)界公認(rèn)，益生菌是一種可定植于人體腸道、生殖系統(tǒng)內(nèi)[4]，并可起到改善宿主健康和體內(nèi)微生態(tài)平衡的作用[4]。

1 材料和方法

1.1 材料及試劑

3種包衣材料（包衣液1，2，3）；5種益生菌（糞腸球菌、雙歧桿菌、酵母菌、芽孢桿菌、乳酸菌），由山東省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保藏；5種培養(yǎng)基（甘露醇卵黃多黏菌素瓊脂基礎(chǔ)；糞腸球菌瓊脂；TPY瓊脂培養(yǎng)基；KF鏈球菌肉湯；MRS肉湯），購(gòu)于青島海博生物科技有限公司。

1.2 方 法

F，R，S，J，Y這5種益生菌，各取0.5 mL，加入生理鹽水4.5 mL，進(jìn)行倍比稀釋，稀釋至107。對(duì)照組，5種菌均取5，6，7這3個(gè)梯度，每梯度各取900 μL，加入生理鹽水100 μL，混勻，備用；試驗(yàn)組，5種菌均取5，6，7這3個(gè)梯度，每梯度各取900 μL，分別加入包衣液100 μL，混勻，溫箱中作用6 h，備用。分別從第105，106 ，107 梯度中取出50 μL涂板，觀察各種菌的生長(zhǎng)情況。以F菌為例。分別從對(duì)照組、試驗(yàn)組取出50 μL涂板，觀察各種菌的生長(zhǎng)情況。將剩余菌液置于4 ℃冰箱中待用。放置0，20，60 d分別涂板，觀察對(duì)比各種菌的生長(zhǎng)情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 包衣材料對(duì)益生菌存活率第1次（0 d）試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，選取106，107稀釋度各50 μL進(jìn)行涂板計(jì)數(shù)，其結(jié)果如表2所示。

如表2可知，這5種菌在3種包衣液中作用0 d，其數(shù)量級(jí)均可達(dá)到109。

2.2 包衣材料對(duì)益生菌存活率第2次（20 d）試驗(yàn)結(jié)果

放置4 ℃冰箱中20 d，取106梯度50 μL進(jìn)行涂板計(jì)數(shù)，其結(jié)果如表3所示。

由表3可知，這5種菌在3種包衣液中作用20 d，數(shù)量略有下降，但數(shù)量級(jí)仍可達(dá)到109；3種包衣液對(duì)各菌均有保護(hù)作用，包衣液3相對(duì)保護(hù)能力較弱。

2.3 包衣材料對(duì)益生菌存活率第3次（60 d）試驗(yàn)結(jié)果

放置4 ℃冰箱中60 d，取106梯度50 μL進(jìn)行涂板計(jì)數(shù)，鑒定結(jié)果如圖3～7所示。

由圖3～7所示，5種菌在3種包衣液中作用60 d，數(shù)量均有下降，約下降了2個(gè)數(shù)量級(jí)；但包衣液3保護(hù)能力較弱，其中包衣液3對(duì)乳酸菌的保護(hù)能力尤弱。

2.4 3種包衣材料對(duì)5種益生菌存活量結(jié)果

從圖8～14可以看出，3種包衣液對(duì)各菌均具有保護(hù)作用，其中，包衣1和包衣2保護(hù)作用相當(dāng)；包衣液3保護(hù)能力呈現(xiàn)較弱，包衣液3對(duì)R菌的保護(hù)能力尤弱。

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果表明，3種包衣材料對(duì)糞腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌、酵母菌和芽孢桿菌均有保護(hù)作用，其中，包衣材料3的保護(hù)作用最弱，且對(duì)糞腸球菌和酵母的保護(hù)作用最低。20 d內(nèi)，包衣2對(duì)5種益生菌的保護(hù)作用較強(qiáng)；60 d內(nèi)，包衣1 對(duì)5種益生菌的保護(hù)作用較強(qiáng)。糞腸球菌在20～60 d內(nèi)包衣1 的保護(hù)作用較強(qiáng)；乳酸桿菌在20～60 d內(nèi)3種包衣保護(hù)作用相當(dāng)；雙歧桿菌在20～60 d內(nèi)包衣3的保護(hù)作用較強(qiáng)；酵母菌在20 d內(nèi)包衣3的保護(hù)作用較強(qiáng)，在60 d內(nèi)則包衣1的保護(hù)作用較強(qiáng)；芽孢桿菌在20～60 d內(nèi)包衣1 的保護(hù)作用較強(qiáng)。

隨著益生菌的廣泛使用，有效保護(hù)益生菌的生理活性成為當(dāng)前益生菌研究的重點(diǎn)[6]。益生菌在加工過(guò)程中，其活性還有可能受到溫度、濕度和壓力等外界環(huán)鏡的影響，其活性便會(huì)大幅度損失[7]。對(duì)于一個(gè)益生菌產(chǎn)品而言，在使用及保存期間保持強(qiáng)效的活力，是評(píng)價(jià)產(chǎn)品好壞最有效的準(zhǔn)則[8]。就目前來(lái)說(shuō)，多數(shù)益生菌產(chǎn)品在規(guī)定期限內(nèi)活菌的活力降低，致使大多數(shù)情況下益生菌往往達(dá)不到我國(guó)保健食品中對(duì)益生菌活菌數(shù)的要求[9]。如何提高益生菌的活力，提高益生作用，一直是人們關(guān)注和研究的熱點(diǎn)[10]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，3種包衣材料對(duì)5種益生菌具有不同的保護(hù)作用，為今后對(duì)這5種益生菌的保護(hù)和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。益生菌的發(fā)展和應(yīng)用將會(huì)越來(lái)越多地得到人們的關(guān)注，隨之包衣液的發(fā)展也會(huì)越來(lái)越成熟。

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