測(cè)定尼群地平片含量HPLC法的改進(jìn)

內(nèi)蒙古婦幼保健醫(yī)院藥劑科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020

測(cè)定尼群地平片含量HPLC法的改進(jìn)

聶世英

內(nèi)蒙古婦幼保健醫(yī)院藥劑科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020

目的對(duì)尼群地平片進(jìn)行含量測(cè)定的高效液相法；方法色譜柱為Diamonsil(TM)-C18(250mm×4.6mm,5μm)，流動(dòng)相為甲醇-水(70：30)，檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm，流速為1.0ml/min,進(jìn)樣量為10μl。結(jié)果再改條件下，尼群地平進(jìn)樣量在0～2.5μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9996)，平均回收率為100.16%(n=9)。結(jié)論本方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快捷，重復(fù)性良好，可用于尼群地平片劑的含量測(cè)定和質(zhì)量控制。

尼群地平； 高效液相色譜； 含量測(cè)定

尼群地平(商品名落普思)為鈣離子通道阻滯劑，屬短效抗高血壓藥。能選擇性地作用于外周血管，阻斷其鈣離子內(nèi)流，松弛其平滑肌，擴(kuò)張血管而降壓，能顯著擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，降低心肌耗氧量，保護(hù)缺血性心肌，用于各種類型的高血壓，特別是伴有冠心病的高血壓的治療。目前《中國(guó)藥典》2010年版收載尼群地平片的含量測(cè)定雖為高效液相色譜法，但操作較繁瑣，流動(dòng)相復(fù)雜，對(duì)儀器要求較高，為更簡(jiǎn)單有效控制尼群地平質(zhì)量特建立了用HPLC法測(cè)定其含量的方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent-1100高效液相色譜儀；島津UV-2450紫外分光光度計(jì)；Aiamonsil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色譜柱；Mettler ToledoAE-100電子天平(瑞士Mettler公司)。

1.2 試藥 尼群地平對(duì)照品來(lái)源 批號(hào)：100585-200602；中國(guó)藥品生物檢定所。

尼群地平原料藥來(lái)源 由赤峰萬(wàn)澤制藥有限公司提供。

尼群地平片來(lái)源 規(guī)格：10mg/片；天津太平洋制藥有限公司生產(chǎn)；產(chǎn)品批號(hào)：080704.

甲醇為色譜純；水為純化水，自制。

2 液的制備

2.1 對(duì)照品溶液 精密稱取尼群地平對(duì)照品25mg，置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。

2.2 原料藥溶液 精密稱取尼群地平原料藥25mg置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。

2.3 供試品溶液 取尼群地平片劑20片，準(zhǔn)確稱定，研成細(xì)粉，精密稱取尼群地平細(xì)粉適量(約相當(dāng)于尼群地平25mg),置25ml量瓶中，加甲醇溶解(超聲處理)并稀釋至刻度，搖勻，靜置即得。

1.5 患者管理 入院時(shí)注意對(duì)患者進(jìn)行護(hù)理告知及入院宣教，入院后應(yīng)有基本醫(yī)師管理和查房、溝通機(jī)制或渠道?？剖叶ㄆ陂_(kāi)展相應(yīng)講座，加強(qiáng)患者疾病認(rèn)識(shí)和自身管理。術(shù)后應(yīng)有基本監(jiān)護(hù)措施，建立隨訪本或隨訪檔案，進(jìn)行后續(xù)隨訪。

2.4 陰性溶液 精密稱取可溶性淀粉、羧甲基纖維素鈉(5∶1)0.19g(相當(dāng)于2.5片的尼群地平片重)，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。

3 實(shí)驗(yàn)方法的建立

3.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 精密稱取尼群地平原料藥0.050g置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；再精密量取該溶液2ml置100ml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻。制成每1ml中含20μg的溶液。掃描紫外圖譜，見(jiàn)圖-1.尼群地平在351nm、237nm、204nm有最大吸收，在351nm、204nm處的吸收值較小，用于高效液相色譜法測(cè)定時(shí)響應(yīng)值小，在237nm處吸收值大，靈敏度高。因此選擇237nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.2 流動(dòng)相的選擇 取1mg/ml的原料藥溶液作為供試品。根據(jù)尼群地平的溶解性，選用C18色譜柱，以甲醇-水(70：30)為流動(dòng)相[1]，237nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，柱溫30℃；流速為1.0ml/min，進(jìn)樣10μl,計(jì)錄色譜圖-2.結(jié)果：尼群地平的保留時(shí)間為12min左右且與雜質(zhì)峰的分離效果良好，因此選定甲醇-水(70∶30)為流動(dòng)相。

3.3 進(jìn)樣量的選擇 分別以不同體積不同濃度進(jìn)樣4次，記錄色譜圖結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 尼群地平進(jìn)樣量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

由表得出：進(jìn)樣量選擇為10μl(濃度為0.1mg/ml)

3.4 綜上所述，色譜條件為：流動(dòng)相為甲醇-水(70；30)；檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm；柱溫：30℃；流速為1.0ml/min，進(jìn)樣量為10μl(1μg)。

4 方法學(xué)考證

4.1 線性關(guān)系的考察 精密稱取尼群地平對(duì)照品25mg置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻作為儲(chǔ)備液。

表2 尼群地平線性關(guān)系實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

以尼群地平的濃度(X)為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見(jiàn)下圖。

結(jié)果表明:尼群地平濃度在0～247μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

4.2 精密度試驗(yàn) 精密量取濃度為1mg/ml的儲(chǔ)備液1ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。在上述色譜條件下，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄色譜圖，計(jì)算尼群地平峰面積的RSD為0.09﹪。結(jié)果見(jiàn)表3.

表3 尼群地平精密度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

結(jié)果表明：采用此方法測(cè)定尼群地平片的含量精密度良好。

4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取濃度為1mg/ml的儲(chǔ)備液1ml置10ml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻作為供試品。在0h、4h、8h、24h分別進(jìn)樣10μl，在上述色譜條件下，記錄色譜圖，結(jié)果見(jiàn)表4.計(jì)算尼群地平峰面積的RSD為0.94﹪。結(jié)果表明尼群地平在24h內(nèi)穩(wěn)定。

表4 尼群地平穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

4.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取尼群地平片劑20片，準(zhǔn)確稱定，研成細(xì)粉，精密稱取尼群地平細(xì)粉適量(約相當(dāng)于尼群地平25mg)置25ml量瓶中用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻靜置。精密量取該溶液的上清液1ml，置10ml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻。制備5份，作為供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定其峰面積，結(jié)果見(jiàn)表5.

表5 尼群地平重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

結(jié)果表明:采用此方法測(cè)定尼群地平的重現(xiàn)性良好。

4.5 加樣回收試驗(yàn) 以可溶性淀粉、羧甲基纖維素鈉為輔料，配制9份尼群地平片的供試品溶液，每3份為一組，分別精密加入尼群地平原料藥20mg、25mg、30mg，配制成含量約為2.5片尼群地平片的80﹪、100﹪、120﹪的模擬處方溶液，加甲醇溶解并稀釋至刻度，尼群地平的濃度分別為80、100、120μg/ml，分別進(jìn)樣10μl，測(cè)定其回收率。結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 尼群地平回收率實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

上述結(jié)果表明，采用此方法測(cè)定尼群地平的回收率良好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

5 樣品含量測(cè)定

采用高效液相法測(cè)定天津太平洋制藥有限公司生產(chǎn)的批號(hào)為080704的尼群地平片的含量。把尼群地平片配成每1ml中含0.1mg的尼群地平溶液，制備2份(各進(jìn)樣2次)，在上述色譜條件下測(cè)定其含量，采用外標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 尼群地平片含量測(cè)定數(shù)據(jù)

6 討論

HPLC 法與化學(xué)法測(cè)得尼群地平結(jié)果基本一致,但本方法具有簡(jiǎn)便、靈敏、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn),專屬性高,可有效的控制尼群地平片的質(zhì)量[2]。本方法與藥典方法相比易掌握,避免了因終點(diǎn)不明確造成的結(jié)果誤差。

[1] 《中國(guó)藥典》2010 年版(二部)；《歐洲藥典》2008年版；《英國(guó)藥典》2005.

[2]米振清，劉芹.HPLC法測(cè)定尼群地平片的含量[S].泰安市藥品檢驗(yàn)所 泰安 271000.

DeterminethecontentsofnitrendipinetabletsbyRP-HPLC

Nie Shi-ying

Maternal and child health hospital of Inner Mongolia,Hohhot 010020,China

ObjecticeTo determine the contents of nitrendipine tablets by RP-HPLC .MethodsThe chromatographic column was Diamonsil TM-C18 (250mm×4.6mm,5μm)with methyl alcohol - water(70:30)as the mobile phase, the detection wavelength was 237nm and the rate was 1.0ml/min ,the amount of injection was 10μl.ResultsThe calibration curves of nitrendipine were linear in the rang of 0～2.5μg, the average recoverg was 100.16﹪(n=9).ConclusionThe method is simple and accurate ,sensible and reproducible ,which can be used for the determination both the raw material and preparations and of the quatity control of nitrendipine tablets .

nitrendipin; RP-HPLC ; determination

R284.1

A

1007-8517(2014)06-0018-03

2014.02.12)