加替沙星中加替沙星的含量測定技術(shù)分析

李鍇權(quán)

【摘要】 目的 測定注射用加替沙星中加替沙星的含量。方法 采用反相高效液相色譜法，色譜柱為C18，ψ（乙腈∶甲醇∶醋酸-三乙胺緩沖液∶十二烷基磺酸鈉）=30∶40∶30∶0.25 g為流動相。流速為1.0 mL/min，檢測波長為290 nm。結(jié)果 加替沙星在8.05～161.0 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9996），平均回收率為99.9%，RSD為0.4%。結(jié)論 本法準(zhǔn)確、靈敏、可靠，能有效地控制該制劑的質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】 加替沙星 相高效液相色譜法

【中圖分類號】R927.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1004-4949(2014)06-0182-02

注射用加替沙星(gatifloxacin)為氟喹諾酮類抗菌藥，具有抗菌譜廣、抗菌作用強的特點。臨床用于治療由敏感細(xì)菌引起的呼吸道感染、急性副鼻竇炎、泌尿道感染、淋病。本文在文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上建立了反相高效液相色譜法，具有操作簡便，分離效果好、靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點，可用于該產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

1儀器與試藥

1.1儀器

Shimadzu Lc10A高效液相色譜儀（日本島津），SPD5A紫外-可見分光光度檢測器，OSDC18柱（大連儀器設(shè)備有限公司）。

1.2試藥

加替沙星對照品（長沙市華美醫(yī)藥研究所提供），注射用加替沙星（海南三葉制藥廠有限公司，批號為000402，000408，000412），乙腈、甲醇為色譜純，冰醋酸、三乙胺、十二烷基磺酸鈉為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

以十八烷基硅烷合硅膠為填充劑，以ψ［乙腈∶甲醇∶醋酸三乙胺緩沖液（量取醋酸0.8 mL，三乙胺0.4 mL，加水稀釋至500 mL，即得）∶十二烷基磺酸鈉］=30∶40∶30∶0.25 g為流動相，流速為1.0 mL/min，檢測波長為290 nm；理論塔板數(shù)按加替沙星峰計算應(yīng)不低于3 000，加替沙星與相鄰主雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于1.5。

2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線

精密稱取經(jīng)105 ℃干燥至恒重的加替沙星對照品16.1 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取0.5、2.0、4.0、6.0、8.0 mL，分別置10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積，計算回歸方程，得回歸方程A=26812.9C＋133076.5，相關(guān)系數(shù)r=0.9996。結(jié)果表明加替沙星濃度在8.05～161.0 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3回收率試驗

取經(jīng)105 ℃干燥至恒重的加替沙星對照品適量，加入按處方比例的輔料，分別置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置10 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，按外標(biāo)法計算回收率。

2.4穩(wěn)定性試驗

取回收率項下的溶液，置室溫下放置2 d，分別于0、2、4、8、12、24 h分別取樣測定，結(jié)果平均峰面積為1873108.8，RSD=1.9%，表明供試品溶液在室溫下放置24 h穩(wěn)定。

2.5精密度試驗

精密稱取經(jīng)105 ℃干燥至恒重的加替沙星對照品33.4 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積，重復(fù)測定6次，結(jié)果平均峰面積為1956241，RSD=0.48%，表明供試品含量測定方法精密度良好。

2.6供試品的測定

對照品溶液制備：精密稱取經(jīng)105 ℃干燥至恒重的加替沙星對照品適量，加水溶解并稀釋制成每1 mL中含80 μg的溶液，作為對照品溶液。

供試品溶液制備：精密稱取供試品適量（約相當(dāng)于加替沙星80 mg），置100 mL量瓶中加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，按外標(biāo)法以峰面積計算加替沙星含量。

HPLC法測定注射用加替沙星中加替沙星的含量取3批樣品進(jìn)行測定

3討 論

采用反相高效液相色譜法測定注射用加替沙星的含量，經(jīng)空白試驗，結(jié)果表明空白輔料對測定結(jié)果無干擾。本方法靈敏度高，專屬性強，線性關(guān)系良好，制備出來的溶液24 h內(nèi)均穩(wěn)定，回收率高，具有快速、簡便、可靠的特點，可作為該制劑含量測定的檢測方法。

參考文獻(xiàn)

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