封閉抗體陰性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的淋巴細(xì)胞免疫治療研究

摘要：目的 探討淋巴細(xì)胞免疫治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的方法與效果。方法 將2012年7月~2014年4月在筆者所在醫(yī)院就診的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者106例隨機分為觀察組53例（淋巴細(xì)胞免疫治療）和對照組53例（傳統(tǒng)保胎治療），對兩組的妊娠情況進行對比。 結(jié)果觀察組與對照組的妊娠成功率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05)。封閉抗體陽性與陰性的妊娠成功率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P <0.05)。結(jié)論 淋巴細(xì)胞免疫治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)可以提高妊娠成功率，減少流產(chǎn)率，值得臨床推廣運用。

關(guān)鍵詞：淋巴細(xì)胞；免疫治療；復(fù)發(fā)性流產(chǎn)連續(xù)自然流產(chǎn)達到2次或2次以上，就可以診斷復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(RSA)，RSA屬于婦產(chǎn)科中發(fā)病率較高的并發(fā)癥，發(fā)生率約5%。其病因復(fù)雜，主要有遺傳因素、內(nèi)分泌因素、生殖器官異常、感染因素[1]。還有約40%左右的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)目前病因還沒有明確，其中約有30%病因不清的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者與自身抗體有關(guān)，即可能為自身免疫疾病，稱為自身免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)；另外，約70%的患者可能與胎兒父系抗原低反應(yīng)有關(guān)，稱為同種免疫性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，其中封閉抗體不足就是導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)鍵免疫因素。近年來，選擇淋巴細(xì)胞免疫治療該疾病已經(jīng)成為關(guān)注的焦點?，F(xiàn)對2012年7月~2014年4月在筆者所在醫(yī)院就診的封閉抗體陰性的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者應(yīng)用淋巴細(xì)胞免疫治療取得的良好效果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料本組資料共計106例，均為2012年7月~2014年4月在筆者所在醫(yī)院就診的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者，年齡22~35歲，平均(23.31±3.50)歲。流產(chǎn)次數(shù)：2次38例，3次59例，4次以上9例。排除染色體異常、生殖道感染、內(nèi)分泌失衡、生殖道畸形、宮頸松弛等患者。經(jīng)篩查后確診為封閉抗體陰性的RSA。隨機分為觀察組53例(淋巴細(xì)胞免疫治療)和對照組53例(傳統(tǒng)保胎治療)，兩組患者年齡及流產(chǎn)次數(shù)等方面比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入標(biāo)準(zhǔn)全部患者在開始研究前都訂立了知情同意書，全部RSA患者滿足下面這些條件：①夫妻染色體核型分析正常；②無生殖道畸形；③TORCH試驗陰性；④通過白帶檢驗宮頸衣原體以及支原體，結(jié)果顯示生殖道未出現(xiàn)感染；⑤通過對LH、PRL、P、FSH、T以及E，等生殖內(nèi)分泌激素進行檢驗，結(jié)果顯示內(nèi)分泌以及空腹血糖均未出現(xiàn)異常；⑥自身抗體檢查陰性：包括抗心磷脂抗體、抗精子抗體、抗子宮內(nèi)膜抗體、抗核抗體等檢查均陰性；⑦檢測封閉抗體檢測陰性。⑧治療開始前的3個月沒有接受過免疫治療或者是接種，也沒有服用改善免疫功能的相關(guān)藥物；⑨男方精液沒有異常現(xiàn)象[2]。

1.3封閉抗體檢測方法對患者夫妻雙方各2ml的外周血進行血清分離，通過流式細(xì)胞儀實施檢測，所有操作嚴(yán)格遵照試劑盒說明書進行。

1.4方法對照組采用傳統(tǒng)保胎治療（黃體酮）觀察組采用淋巴細(xì)胞免疫治療：先抽男方15ml的外周血(傳染病或者是病毒性疾病除外)，加入肝素抗凝，在無菌情況下進行分離，通過淋巴細(xì)胞分離液將淋巴細(xì)胞提取出來，通過生理鹽水對其進行洗滌，共3次，最終達到（2~3)×107/ml濃度的淋巴細(xì)胞液，將約2ml的細(xì)胞懸液通過皮內(nèi)注射，將其注入妻子前臂內(nèi)側(cè)，注射大約6~8個點即可。需免疫治療4次，間隔時間3w。先采取1個療程，在該療程結(jié)束后2w內(nèi)盡早對封閉抗體進行復(fù)查，如果封閉抗體顯示陰性，則接著下一個療程，總共是兩個療程，如果顯示的陽性，則最好讓患者在6個月內(nèi)進行妊娠，在妊娠成功后要立即接受3w一次的鞏固治療，一直到懷孕14w時為止。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件處理所得數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用x2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組妊娠成功率對比觀察組的妊娠成功率達86.79%（46/53），對照組為52.83%（28/53），兩組的妊娠成功率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2觀察組封閉抗體陽性與陰性的妊娠成功率對比免疫治療后，封閉抗體陽性的妊娠成功率達92.5%（37/40），陰性的為61.54%（8/13），兩者的妊娠成功率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3討論

當(dāng)今免疫學(xué)普遍存在這樣的看法，即人類胚胎的發(fā)展以及最終形成這整個過程，都屬于同種半移植，胎兒身體內(nèi)來源于男方的那50％的基因抗原，對女方來說，是外界異物，所以母體極力排斥，如果妊娠不出現(xiàn)異常的話，則為了與該排斥相爭斗，確保胚胎完好，母體便會形成封閉抗體，若該種抗體不足，則母體內(nèi)的血殺傷細(xì)胞就會攻擊胚胎，進而引起流產(chǎn)。淋巴細(xì)胞免疫治療實是將男方的淋巴細(xì)胞當(dāng)作同類異體抗原，對母體進行刺激，使其形成各類封閉抗體，該抗體會和胚胎來源于男方的抗原進行結(jié)合，使母體無法有效識別或者是對胚胎有一種激烈的反應(yīng)，進而確保母體免疫系統(tǒng)不排斥胚胎。使胚胎可以在宮內(nèi)良好生長。淋巴細(xì)胞生動免疫治療后，觀察組的妊娠成功率達86.79%（46/53），對照組為52.83%(28/53)，兩組的妊娠成功率相比差異具有顯著性（P<0.05）。這意味著免疫治療結(jié)束后，會形成更多的封閉抗體，進而母體免疫耐受出現(xiàn)，這樣，胎兒就得以生存，最終確保妊娠的成功。

主動免疫療法可能存在的副作用：一般說來，主動免疫是比較安全的，無明顯嚴(yán)重副反應(yīng)。Tanaka等報道了1例主動免疫治療患者所分娩的嬰兒患有新生兒血小板減少癥。淋巴細(xì)胞毒試驗顯示母親血清而不是嬰兒血清含有HLA抗體，可以與父親和嬰兒的淋巴細(xì)胞反應(yīng)，而且母親血清含有針對父親和嬰兒血小板抗原的HLAIgG抗體，而主動免疫可誘導(dǎo)增強母血中HLA抗體水平，HLA抗體進而進入嬰兒體內(nèi)所致。Dupont等自1985年用主動免疫治療UHA患者117例，有兩例出現(xiàn)紅細(xì)胞抗體（抗-c和抗-JKb+C）；兩例出現(xiàn)蕁麻疹過敏反應(yīng)。同時也有患者治療后不能產(chǎn)生保護性抗體而再次流產(chǎn)。我院治療組未出現(xiàn)嚴(yán)重副反應(yīng)。

總之，通過丈夫血清內(nèi)的淋巴細(xì)胞免疫治療方式對封閉抗體缺乏引起的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)進行治療，不僅免疫反應(yīng)劇烈，而且快速有效，沒有副作用，提高妊娠成功率，減少治療費用，可以稱得上是對復(fù)發(fā)性流產(chǎn)進行治療的一種經(jīng)濟而又行之有效的好方法，因此應(yīng)該在臨床上大力推廣。

參考文獻:

[1]梁寶珠，譚忠偉.淋巴細(xì)胞主動免疫治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的臨床研究[J].中國婦幼保健雜志，2007，22（25）：3561-3562.

[2] 秦衛(wèi)兵，楊寧，崔蓉，等.淋巴細(xì)胞主動免疫治療對原因不明復(fù)性流產(chǎn)機體免疫功能的影響[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2010，26（12）：940-942.編輯/許言