大便培養(yǎng)方法的研究與改進

摘要：目的 通過對人的大便進行培養(yǎng)，了解其身體健康狀況。方法 78例從業(yè)人員大便進行培養(yǎng)，將樣本糞便劃線接種于SS瓊脂平板上，將培養(yǎng)箱溫度調(diào)整為37℃，把樣本糞便置入其中，詳細記錄培養(yǎng)結(jié)果，并做出分析。結(jié)果 經(jīng)研究得知，陽性患者大便中的主要菌種為表皮葡萄球菌，共檢出13株，所占比例為39.4%。檢出率最少的是致病性大腸桿菌，為2株，所占比例為6.1%，兩種病原菌檢出情況對比差異顯著，具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論 在本次研究中我們了解到，傷寒桿菌要注重疾病的預(yù)防。

關(guān)鍵詞：大便培養(yǎng)；方法；研究：改進

Study of Fecal Culture Method and Improvement

CHEN Wen-sheng，ZHANG Yi

(Department of Outpatient ，Hunan Province Center for Disease Prevention，Changsha410005，Hunan，China)

Abstract：ObjectiveTo cultivate the human excrement， understand their physical health. Methods78 cases of practitioners in the stool samples were cultured， the faeces inoculated on SS agar plates， the temperature of the incubator was adjusted to 37 degrees Celsius， the sample with the results of fecal， detailed records of training， and make analysis. Results Through the research that， the main strain in patients with positive stool for Staphylococcus aureus， 13 strains were found， accounting for 39.4%. The detection rate of at least is the pathogenic Escherichia coli， 2 strains， the proportion of 6.1%， two kinds of pathogen detection conditions had significant differences， with statistical significance (P<0.05). ConclusionWe learned in this study， the prevention of typhoid bacilli should pay attention to the disease.

Key words：Fecal culture; Method; Research:Improving傷寒、副傷寒、痢疾等均是因傷寒桿菌（或其他菌）經(jīng)由人體消化道傳播后所導致的一種急性傳染病。特別是在夏季與秋季，腹瀉患者數(shù)量非常多，部分患者經(jīng)臨床診斷，被確診為細菌腹瀉，以往主要認為菌痢腹瀉的產(chǎn)生是因受到痢疾桿菌感染所致[1]。不過有相關(guān)資料表明，通過對這部分患者大便進行研究后得知，痢疾桿菌檢出率并不高[2]。本文主要通過對人的大便進行培養(yǎng)，了解其傷寒和菌痢發(fā)生情況，現(xiàn)將研究情況報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料以78例從業(yè)人員為研究對象，男性42例、女性36例，年齡在10個月~78歲，平均年齡（35.75±3.21）歲。所有從業(yè)人員都于門診部進行體檢，患者起病急，大便次數(shù)明顯增加，且大便形狀產(chǎn)生變化，行鏡檢后了解到到大便中半酣紅細胞或吞噬細胞、白細胞等特征。

1.2方法

1.2.1采集標本患者進入醫(yī)院后，檢驗人員需收集患者排出的大便，取約2~3g即可，將其放置在無菌塑料盒內(nèi)。

1.2.2細菌培養(yǎng)方法取患者樣品糞便，劃線接種于SS瓊脂平板上，調(diào)整培養(yǎng)箱溫度，將其控制在37℃左右，把標本置于培養(yǎng)箱中。培養(yǎng)時間達到24h后，可對SS瓊脂平板進行觀察，了解平板上是否存在菌落生長。對于疑似菌落，可通過涂片、染色與鏡檢等操作，對球菌與桿菌進行分析，并行藥敏試驗和生化檢測，通常情況下，細菌培養(yǎng)達到3d后，可得知培養(yǎng)結(jié)果。如果大便標本觀察2~3d后，依舊不存在病菌生長，則表明培養(yǎng)結(jié)果呈現(xiàn)為陰性。

1.2.3細菌鑒定方法常規(guī)鑒定的實驗步驟非常簡單，我門診部主要通過利用細菌鑒定法鑒定。以形態(tài)染色作為基礎(chǔ)，通過不同鑒定方式（例如血清凝集試驗、微量生化發(fā)酵）鑒定菌型與菌屬的血清學。

1.3統(tǒng)計學方法對本組研究的數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示，采用t檢驗，對計數(shù)資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1陽性率通過對78例腹瀉患者大便進行研究后了解到，有32例患者呈現(xiàn)為陽性，陽性率為41.0%。

2.2病菌分布具體情況經(jīng)研究得知，陽性患者大便中的主要菌種為表皮葡萄球菌，共檢出13株，所占比例為39.4%。檢出率最少的是傷寒桿菌，為10株，所占比例為6.1%，兩種病原菌檢出情況對比差異顯著，具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。菌種檢出數(shù)量從高到低依次為表皮葡萄球菌、傷寒桿菌、其他菌種、致病大腸桿菌。見表1。

其中10個月~5歲患者20例、6~20歲25例、21~40歲18例、41~78歲15例。

3討論

細菌性感染性腹瀉發(fā)病率較高，臨床表現(xiàn)主要為腹瀉，它是一種腸道傳染疾病，本門診通過對自愿受檢的78例腹瀉患者大便進行培養(yǎng)，通過研究發(fā)現(xiàn)，有32例患者顯示為陽性，陽性率為41.0%，主要菌種類型為傷寒桿菌。

傷寒、副傷寒、痢疾等疾病癥狀表現(xiàn)非常明顯，且患者病程較短，疾病可在短期內(nèi)治愈，即便患者被檢測出有傷寒、痢疾與帶菌者，因傳染源易被控制，可將傳播途徑切斷，降低感染發(fā)生率[3]。不過傷寒、痢疾與帶菌者經(jīng)糞尿?qū)⑵渑懦龊螅钣闷?、水等均會受到嚴重污染。因此，必須做好社會公共衛(wèi)生工作，培養(yǎng)良好的生活習慣，降低疾病發(fā)生率。

以往主要通過對志賀氏菌、大腸埃希菌、沙門氏菌行培養(yǎng)基分離，不過致病大腸桿菌分離因存在各種限制因素，只能夠分離其中的一兩種，因此，部分大腸埃希菌并未被檢出，出現(xiàn)了漏檢的情況。以往對大腸埃希菌的檢出率并不高，因此，大便培養(yǎng)方法需要做出相應(yīng)改進。①送檢化驗單的填寫。首先，我門診需要有癥狀欄、鏡檢欄的設(shè)置，在癥狀欄中，根據(jù)醫(yī)生要求，在里急后重、腹痛欄目下填寫有或無；②實現(xiàn)采集標本的規(guī)范化。采集標本規(guī)范化對于培養(yǎng)陽性率的提升具有重要意義，必須在服藥前采集患者標本，利用無菌棉簽，將含有膿液、黏液的大便取出，將其置于無菌容器中并送檢，水樣便需留取于無菌容器內(nèi)；③接種培養(yǎng)前，注重觀察大便的性質(zhì)與形狀，并行涂片鏡檢，且于化驗單上對涂片鏡檢結(jié)果與大便性質(zhì)進行填寫。有相關(guān)資料顯示，大便病菌的檢出與黏液膿血便存在較大關(guān)聯(lián)。涂片鏡檢在細菌分離鑒定中起著指導作用，在鏡檢過程中，如果觀察到有真菌的存在，則需培養(yǎng)真菌;若觀察到有桿菌（細長且表現(xiàn)為螺旋狀運動），則表明可能有空腸彎曲菌。有資料表明，彎曲菌會誘發(fā)感染，它的檢出株數(shù)大于志賀氏菌，因此，在有條件的情況下，必須檢測大便中有無空腸彎曲菌的存在[4]。如果觀察到粗大的革蘭陽性桿菌，例如如梭菌，鑒定與分離難度便會加大，這種菌易誘發(fā)偽膜性腸炎;若為水便，則需壓片，并對細菌動力進行觀察，同時要注重分離鑒定孤菌。

值得注意的是，在分離鑒定致病菌時，首先需常規(guī)細菌培養(yǎng)，然后對培養(yǎng)基進行選擇；如果觀察到真菌，要加種沙氏培養(yǎng)基；典型致病菌就是傷寒桿菌，在檢出過程中，必須注重觀察病原菌情況[5]。

從這次研究中可得知，在本次研究的78例腹瀉患者大便培養(yǎng)中，菌種檢出數(shù)量從高到低依次為表皮葡萄球菌、致病大腸桿菌、其他菌種、傷寒桿菌。病菌檢出者主要以青壯年為主，產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因為大部分青壯年活動范圍較廣，也在日常生活中接觸的食物種類多，未能更好的關(guān)注自身健康。

在疾病治療過程中，要注重合理應(yīng)用抗生素，預(yù)防與治療痢疾病原菌，有效控制疾病傳播?，F(xiàn)階段的大便培養(yǎng)方法與過去相較已經(jīng)產(chǎn)生了很大變化，在送檢階段，要對送檢時間進行控制，若檢測結(jié)果出現(xiàn)的陽性率并不高，這可能是因為患者在檢測前服用了藥物所致。

隨著目前人們生活水平的不斷提升，大家也越來越具備疾病預(yù)防意識，為了有效控制菌痢發(fā)病率，人們必須培養(yǎng)良好的生活習慣，尤其在夏季與秋季，做好疾病預(yù)防工作。

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編輯/哈濤