三種肺炎支原體血清學檢測方法比較

摘要：目的通過微量顆粒凝集法、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法及冷凝集試驗（CAT）對呼吸道感染患兒血清肺炎支原體（MP）的檢測，評估三種方法的應用價值。方法對216例呼吸道患兒同時作冷凝集試驗及顆粒凝集法、ELISA法檢測其肺炎支原體的抗體IgM。結(jié)果在172例臨床診斷為MP感染的患兒中，顆粒凝集法陽性160例，敏感性93.0%，ELISA法陽性164例，敏感性95.3%，CAT陽性116例，敏感性67.4%。結(jié)論顆粒凝集法與ELISA法敏感性較高，特異性較強，而CAT較差。

關(guān)鍵詞：肺炎支原體;顆粒凝集法肺炎支原體（Myocoplasima pneumonia，MP）是急性呼吸道感染的常見病原體之一。近年來，已成為小兒肺炎常見的病原體[1]，由其引起的呼吸感染日趨增多[2]。目前，實驗室診斷方法主要依靠血清學。我們對2002年9月～2003年4月分院收治住院的呼吸道感染患兒進行微量顆粒凝集法（PA）和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）進行肺炎支原體抗體IgM的測試，并且同時檢測冷凝集試驗，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料標本來源2010年10月～2013年4月就診的呼吸道感染癥狀的分院兒科病房呼吸道感染患者216例。每例均于入院2d內(nèi)抽血。同時用間接血凝法和酶聯(lián)免疫法檢測MP-IgM抗體及冷凝集試驗。

1.2方法

1.2.1微量顆粒凝集法（PA）測MP-IgM抗體，試劑盒SERODIAS MYCO-H由FUJI REBIO INC提供。嚴格按說明書進行操作，每次均設陰、陽性對照，滴度≥1:80為陽性。

1.2.2 ELISA法試劑由美國診斷自動化公司生產(chǎn)，上海領(lǐng)檢 科技 公司提供，操作嚴格按說明書進行。

1.2.3冷凝集試驗（CAT） 按《臨床醫(yī)學檢驗》\"冷凝集試驗\"進行操作，滴度≥1:64為陽性。

2結(jié)果

2.1治療結(jié)果216例受檢樣品中，MP感染和非MP感染患兒MP三種結(jié)果比較172例疑為MP感染的病例中，PA法陽性占93.0%，ELISA法占95.3%，CAT法占67.4%。在44例非MP感染中，PA法陽性占9.0%，ELISA法占11.3%，CAT法占13.6%。

2.2 PA法、ELISA法、CAT三種檢測方法比較PA法敏感性93.0%，特異性90.9%，ELISA法敏感性95.3%，特異性88.6%，冷凝集試驗敏感性67.4%，特異性86.3%。

3討論

小兒肺炎支原體感染的臨床表現(xiàn)多種多樣，可引起全身各臟器損害，但以呼吸道感染最為多見[3]。目前，支原體肺炎的實驗室診斷方法有支原體分離培養(yǎng)、特異性抗體檢測、冷凝集試驗及PCR等[4]。其中，這些試驗中最為可靠的方法是取呼吸道分泌物做支原體培養(yǎng)，培養(yǎng)基上見煎蛋狀菌落生長，即可確診。但所需時間長，陽性率低，臨床上不能快速診斷。PCR方法特異高，但需昂貴設備，不易普及。冷凝集試驗雖然方法簡單、易行，長期被認為診斷肺炎支原體的傳統(tǒng)方法，但其敏感性和特異性均較差，是一種非特異方法，本文敏感性為67.4%，漏診率較高，抗MP-IgM抗體是機體受MP感染最早出現(xiàn)的抗體，于發(fā)病1w左右開始升高，這對于1w的病程易造成漏診。ELISA法檢測MP-IgM敏感性和特異性分別為95.3%和88.6%，敏感性和特異性與微量顆粒凝集法接近，且重復性好，但操作較繁瑣，且需要酶標儀等。顆粒凝集法用日本富士提供的試劑盒，運用表面吸附支原體抗原的明膠顆粒代替動物紅細胞，消除了非特異性反應，且3h即能出報告。靈敏度和特異性分別為93.0%和90.0%，無需特殊儀器設備，即可操作，可作為支原體肺炎實驗室診斷的常規(guī)檢測，以利于早期做出診斷。

參考文獻:

[1]Davis SF.Concurrent outbreaks of pertussis and Mycoplasma pneumonia infection[J].Clin Infect Dis，1995，20:621.

[2]王學枋，王曉紅，趙國呂.小兒肺炎支原體96例臨床分析[J].上海醫(yī)科大學學報，19997，24（6）:523.

[3]張蓓，余曉剛，沈立崧.小兒肺炎支原體感染的血清學檢測及臨床應用[J].上海醫(yī)學檢驗雜志，2001，16:35-36.

[4]劉東旭.肺炎支原體感染檢測診斷技術(shù)究近況[J].國外醫(yī)學·內(nèi)科學分冊，1994，21（2）:50-53.

編輯/孫杰