人參總皂苷對(duì)心理應(yīng)激高血壓大鼠心肌缺血再灌注損傷的作用

摘要：目的 探討人參總皂苷預(yù)適應(yīng)對(duì)慢性心理應(yīng)激高血壓大鼠I/R損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。方法 將50只SHR大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只：①SHR組；②假手術(shù)組；③ I/R組；④～⑤ GS100mg/kg、200mg/kg組。各組于束縛應(yīng)激的同時(shí)灌胃給藥，SHR組給予等量生理鹽水。①I/R組:行冠脈結(jié)扎缺血40 min，再灌30 min；②GS預(yù)適應(yīng)組：冠脈結(jié)扎缺血40min，再灌30min；分別記錄實(shí)驗(yàn)前，缺血10，20min，再灌10，20，30min心功能變化；③假手術(shù)組：手術(shù)步驟同上，以BL-420+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄上述指標(biāo)。結(jié)果 各組術(shù)后各時(shí)段LVP、± dp/dt max均隨時(shí)間延長(zhǎng)而下降，顯著低于SHR對(duì)照組和假手術(shù)組， I/R組大鼠LVP，±dp/dtmax均顯著低于SHR組和假手術(shù)組。與對(duì)照組比較，束縛應(yīng)激后GS組心肌NO活性上升最大幅度分別較I/R組提高1.27、1.66倍; GS組心MT的升高幅度均超過(guò)SHR對(duì)照組的變化，明顯高于I/R組 (P<0.05-0.01)。結(jié)論 應(yīng)用人參總皂苷預(yù)適應(yīng)可以激發(fā)機(jī)體內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制，有益于防治心肌缺血再灌注損傷。

關(guān)鍵詞：人參總皂苷；心理應(yīng)激；缺血再灌注損傷；心肌保護(hù)近年來(lái)，心理應(yīng)激因素作為誘發(fā)高血壓的重要因素得到廣泛關(guān)注 [1]。心理應(yīng)激可以興奮交感神經(jīng)系統(tǒng)，刺激機(jī)體釋放多種升血壓活性物質(zhì)，誘發(fā)和加重高血壓的發(fā)生。應(yīng)用中藥藥物預(yù)適應(yīng)可以激發(fā)機(jī)體內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制，有益于防治心肌缺血再灌注損傷。本文研究人參總皂苷預(yù)適應(yīng)對(duì)慢性心理應(yīng)激高血壓大鼠I/R損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。

1資料與方法

1.1一般資料 藥品:人參總皂苷，黃色粉末，總皂苷含量為90.2%，購(gòu)自吉林省撫松縣大自然生物工程有限公司， 批號(hào)20050615。動(dòng)物: 自發(fā)性高血壓大鼠，SPF級(jí)，體重200～250g， 雌雄兼用，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。合格證號(hào)2005803。試劑：NO檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程公司。牛血紅蛋白購(gòu)自Sigma公司。其余試劑均為市售分析純產(chǎn)品。儀器：BL-420+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，四川省成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品；動(dòng)物人工呼吸機(jī)，DH-150型，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器廠；RM－6000型四道生理多導(dǎo)儀，日本光電公司產(chǎn)品。

1.2實(shí)驗(yàn)分組和給藥方法將50只SHR大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只：①SHR組；②假手術(shù)組；③I/R組；④~⑤GS100mg/kg、200mg/kg組。各組于束縛應(yīng)激的同時(shí)灌胃給藥，SHR組給予等量生理鹽水。

1.3心理應(yīng)激大鼠模型的建立參照文獻(xiàn)方法進(jìn)行[2]。每天上午9:00~下午15:00將各組大鼠束縛1次，持續(xù)3w。

1.4 I/R方法將大鼠全身麻醉，切開(kāi)氣管，右側(cè)頸總動(dòng)脈插管與壓力換能器相連，經(jīng)放大器測(cè)量外周動(dòng)脈血壓。標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)程導(dǎo)聯(lián)生物電放大器相連，記錄心電圖。①I/R組:行冠脈結(jié)扎缺血40min，再灌30min；②GS預(yù)適應(yīng)組：冠脈結(jié)扎缺血40min，再灌30min；分別記錄實(shí)驗(yàn)前，缺血10、20min，再灌10、20、30min心功能變化；③假手術(shù)組：手術(shù)步驟同上，以BL-420+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄上述指標(biāo)。

1.5心功能與心臟血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)測(cè)定于缺血前10、20、30、40min和再灌注后10、20、30min分別記錄左室內(nèi)壓峰值（LVP）、左室內(nèi)壓上升、下降最大速率（±dp/dtmax）。

1.6心肌NO、MT測(cè)定按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理全部數(shù)據(jù)均以（x±s）表示，作兩樣本均數(shù)差異的t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1對(duì)大鼠心功能、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的影響表1~表2可見(jiàn)，各組術(shù)后各時(shí)段LVP、± dp/dt max均隨時(shí)間延長(zhǎng)而下降，顯著低于SHR對(duì)照組和假手術(shù)組， I/R組大鼠LVP，±dp/dtmax均顯著低于SHR組和假手術(shù)組。GS組在缺血期間雖略有降低，但再灌注末時(shí)各項(xiàng)指標(biāo)均顯著高于I/R組(P<0.05-0.01)， 在再灌注20、30min時(shí)GS理組的保護(hù)作用顯著，說(shuō)明GS顯著促進(jìn)大鼠心功能、心臟血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的恢復(fù)。

與對(duì)照組比較，束縛應(yīng)激后GS組心肌NO活性上升最大幅度分別較I/R組提高1.27、1.66倍; GS組心MT的升高幅度均超過(guò)SHR對(duì)照組的變化，明顯高于I/R組 (P<0.05~0.01)。見(jiàn)表3。

3討論

本研究證實(shí)了人參總皂苷對(duì)慢性心理應(yīng)激高血壓大鼠心肌缺血再灌注損傷的改善作用，文獻(xiàn)報(bào)道人參可提高機(jī)體抗應(yīng)激反應(yīng)能力，減少大鼠缺血再灌注損傷所致的氧化損傷，降低MDA含量，升高心肌酶活性，均是其心肌保護(hù)作用的重要作用機(jī)制[3]。有研究表明NO/NOS系統(tǒng)功能低下可能參與了自發(fā)性高血壓與慢性應(yīng)激性高血壓的發(fā)生和發(fā)展以及SHR心肌肥厚的發(fā)生和發(fā)展，本文結(jié)果可見(jiàn)人參總皂苷組能顯著增加NO含量說(shuō)明GS增加NO是其減輕I/R損傷作用的機(jī)理之一。研究表明，急性或慢性心理應(yīng)激可誘發(fā)或促進(jìn)高血壓的形成和發(fā)展，通過(guò)心理應(yīng)激引出心血管系統(tǒng)的軀體癥狀以及植物神經(jīng)功能紊亂與內(nèi)皮系統(tǒng)功能障礙。研究證實(shí)，在束縛實(shí)驗(yàn)中MT含量明顯升高，推測(cè)可能與皮質(zhì)醇發(fā)揮的誘導(dǎo)作用以及MT對(duì)鋅代謝穩(wěn)態(tài)的調(diào)控有重要關(guān)系[4]，而鋅與NO、MT、糖皮質(zhì)激素之間也有密切關(guān)系，可直接誘導(dǎo)MT的表達(dá)[5]。本文結(jié)果同時(shí)說(shuō)明了人參總皂苷預(yù)適應(yīng)對(duì)束縛應(yīng)激大鼠I/R損傷的保護(hù)作用與金屬硫蛋白含量的升高有密切關(guān)系。已知人參總皂苷具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)[3]，因此推測(cè)GS預(yù)適應(yīng)抗應(yīng)激SHR大鼠I/R損傷作用可能是復(fù)雜而多途徑的，而人參總皂苷的抗應(yīng)激、抗心肌缺血的適應(yīng)性反應(yīng)機(jī)制與其心臟保護(hù)作用的關(guān)系尚需進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]Stiefelhagen P. Psychosocial aspects in patients with coronary heart disease［J］. Heart health also depends on the psyche]. MMW Fortschr Med，2010，152(44):14.

[2]鄭麗芳，明亮.抑郁癥動(dòng)物模型的研究與應(yīng)用[J].安徽醫(yī)藥，2005，35(11)：801-804.

[3]咸云淑，熊文.人參總皂苷對(duì)興奮性損傷的保護(hù)作用的研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷， 2003 ，7(2): 132-134.

[4]Katakai K，Liu J，Nakajima K， et al．Ni-tric oxide induces metallothioneinMTgene expression apparently by displacingzinc bound to MT［J］．Toxicol Lett， 2001，119（2）∶103-108．

[5]晨陽(yáng)，薛康，李春躍. 原發(fā)性高血壓與應(yīng)激性高血壓大鼠NO/NOS、ET的變化[J]. 中國(guó)醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志，2006，23(1):35-39.編輯/哈濤