摘要:目的研究CD44和喉癌與喉癌侵襲、轉(zhuǎn)移及預后之間的相關(guān)性。方法選取我院2010年6月~2013年12月收治的喉癌患者50例,采用免疫組織化學法即ABC法對所有患者喉癌組織中的CD44進行檢測。結(jié)果高分化CD44的表達水平比低分子CD44低(P<0.05);無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CD44顯著也低于伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CD44(P<0.05);臨床T3、T4喉癌Cd44表達水平也顯著高于T1、T2(P<0.05);CD44高表達喉癌者2年生存率為80%(24/30),CD44低表達者2年生存率為90%(18/20),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論CD44和喉癌侵襲、轉(zhuǎn)移以及預后具有較強的相關(guān)性,高表達的CD44更易侵襲,轉(zhuǎn)移能力也較強。
關(guān)鍵詞:CD44;喉癌;轉(zhuǎn)移;預后早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷和治療是減輕喉癌危害的重要措施,在提高患者術(shù)后生存率的同時,也保留喉部的發(fā)音功能,減少并發(fā)癥[1]。近年來,相關(guān)學者發(fā)現(xiàn)喉癌組織中的CD44與喉癌的侵襲、轉(zhuǎn)移以及預后有著極為密切的關(guān)系,CD44是一種跨膜受體蛋白,是一項預測腫瘤轉(zhuǎn)移的重要指標[2]。對此,本文選取了50例喉癌患者,采用免疫組織化學法檢測其CD44,旨在分析CD44與喉癌侵襲、轉(zhuǎn)移和預后之間的相關(guān)性,具體如下。
1資料與方法
1.1一般資料 本組50例喉癌患者,均是我院2010年6月~2013年12月接受治療的患者,入院之后我們問詢了所有患者的基本資料和治療史。統(tǒng)計資料顯示,無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者28例,有頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者22例。其中男45例,女5例,年齡為36~78歲,平均年齡為(64±3.1)歲。
1.2方法 采用免疫組織化學法對喉癌患者的CD44進行檢測,ABC試劑盒選擇的是VECTOR公司生產(chǎn)的產(chǎn)品,CD44抗體是標準型CD44分子的單克隆抗體。4 um切片按照常規(guī)操作進行脫蠟至水,再采用0.05%胰蛋白酶進行為時30 min的消化。經(jīng)過PBS即磷酸鹽緩沖液洗滌之后,滴加1∶40的CD44單抗,然后將標本放置在冰箱中,冰箱溫度控制在4℃左右,放置時間控制在一夜。第2 d使用PBS將標本進行第2次洗滌,再滴加1∶200生物素化二抗。靜置40 min之后用PBS洗滌,滴加1∶100ABC試劑,等待1 h,將標本放置在0.04% DAB溶液中,這時可以顏色可以完全呈現(xiàn)。再用蘇木素染色,利用酒精進行有效脫水之后,二甲苯透明,最后用中性樹膠進行封裝即可[3]。
1.3效果判定 對于CD44陽性的判定依據(jù)是細胞膜染色之后呈現(xiàn)棕色,低表達和高表達則是通過染色的強度來判定。將切片放置在低倍鏡下進行觀察,陽性細胞統(tǒng)計數(shù)目如果在>70%,染色比較強,則判定是CD44高表達,反之則判定為CD44低表達,但是我們不會考慮染色的強度,只要陽性細胞數(shù)目少于70%即可[4]。結(jié)果顯示CD44高表達30例,低表達為20例。
1.4統(tǒng)計學處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計學軟件,P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。
2結(jié)果
2.1 CD44分布情況 喉癌CD44主要是分布于增生特別活躍的腫瘤細胞中,類似癌組織的浸潤周圍。
2.2 CD44和喉癌相關(guān)性 高分化CD44的表達水平比低分子CD44低(P<0.05);無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CD44顯著也低于伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CD44(P<0.05);臨床T3、T4喉癌Cd44表達水平也顯著高于T1、T2(P<0.05),見表1。
2.3 CD44高表達喉癌者 2年生存率為80%(24/30),CD44低表達者2年生存率為90%(18/20),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
3討論
影響喉癌預后情況的因素較多,主要是腫瘤臨床分期和腫瘤生長位置與形狀,以及治療方法等。本次研究結(jié)果提示,喉癌組織中的CD44和細胞轉(zhuǎn)移、預后均有較為密切的關(guān)系,CD44陽性細胞主要聚集在癌細胞增殖比較活躍的區(qū)域,這一結(jié)果和FOX的結(jié)果基本一致。除外,我們發(fā)現(xiàn)高分化CD44的表達水平比低分子CD44低,無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CD44顯著也低于伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CD44,臨床T3、T4喉癌Cd44表達水平也顯著高于T1、T2(P<0.05)。隨訪發(fā)現(xiàn),CD44表達水平的高低與生存率有很大的聯(lián)系,該結(jié)果與王敏等的報道結(jié)果基本一致。
總之,CD44與喉癌的侵襲、轉(zhuǎn)移和預后均有很大的相關(guān)性,可以作為提示、檢測喉癌的觀察指標,同時我們也要將注意力放在高表達的CD44上。
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編輯/肖慧