PCR檢驗(yàn)法用于細(xì)菌檢驗(yàn)的效果評(píng)價(jià)

摘要：目的探討PCR檢驗(yàn)法用于細(xì)菌檢驗(yàn)的臨床效果。方法疑似陰道炎患者110例，分別用革蘭染色檢驗(yàn)法、PCR 檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法做陰道細(xì)菌檢查。結(jié)果細(xì)菌培養(yǎng)法陽性檢出率高于革蘭染色檢驗(yàn)法陽性檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。PCR 檢驗(yàn)法陽性檢出率高于革蘭染色檢驗(yàn)法陽性檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論P(yáng)CR 檢驗(yàn)法用于細(xì)菌檢驗(yàn)敏感性及特異性高，且操作過程簡(jiǎn)便、快捷，臨床意義顯著。

關(guān)鍵詞：PCR檢驗(yàn)法；細(xì)菌檢驗(yàn)；革蘭染色檢驗(yàn)法；細(xì)菌培養(yǎng)法

The Evaluation of the Effect of the PCR Inspection Method for Bacterial Inspection

LIU Xi-ping

(Promotion of Family Planning Technical Guidance Station in Kuitun City， Kuitun 883200， Xinjiang，China)

Abstract：ObjectiveTo evaluation of the effect of the PCR inspection method for bacterial inspection. Methods110 suspected patients with vaginitis， vaginal bacteria were examined， using gram stain test， PCR test， bacterial culture method. ResultsThe positive detection rate， bacterial culture method is higher than that of Gram staining method， the difference was statistically significant (P<0.01). The positive detection rate， PCR test method is higher than that of Gram stain test， the difference was statistically significant (P<0.01). ConclusionPCR test method for bacteria detection， high sensitivity and specificity， and the operating process is simple， fast， clinical significance.

Key words：Method of test for PCR;Bacteriological examination;Gram stain test; Germiculture陰道炎為婦科疾病中最為常見、多發(fā)的一種炎癥感染性疾病[1]。可導(dǎo)致患者發(fā)生急慢性盆腔炎、異位妊娠或不孕等[2]。陰道炎患者常常由于不能及時(shí)和對(duì)癥治療而反復(fù)發(fā)作，因此早期明確致病菌對(duì)患者的康復(fù)尤為重要。為此，本研究觀察了PCR檢驗(yàn)法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)的效果。現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2010年3月~2013年8月在我單位就診的疑似陰道炎患者110例為研究對(duì)象，年齡18~48歲。

1.2方法革蘭染色檢驗(yàn)法及細(xì)菌培養(yǎng)法，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行[3]。PCR 檢驗(yàn)法：取陰道分泌物 500μl 于生理鹽水中，12 000 r/min 離心 10 min，棄上清液后加入堿性裂解液， 98℃下加熱 10min， 12 000 r/min 離心 5 min， 取部分上清液做模板。取包含緩沖液 、 引物、 無菌去離子水和模板等總體積為25 μl， 以無菌石蠟油 30ul 覆蓋后進(jìn)入 PCR循環(huán)。循環(huán)參數(shù)為：95℃ 下 5 min， 94℃下1 min，58℃下1min，72℃ 下 1 min，共 32 個(gè)循環(huán)，最后 72℃ 下延伸 5 min。設(shè)置PCR 檢測(cè)細(xì)菌的陽性及陰性對(duì)照：在進(jìn)行陰道分泌物樣本DNA 擴(kuò)同時(shí)，采用同一批 PCR 反應(yīng)試劑， 將不加模板DNA 的作為陰性對(duì)照。將加入分離提純的標(biāo)準(zhǔn)菌株 DNA 模板的PCR 擴(kuò)增作為陽性對(duì)照。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理研究數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理。組間比較，采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR 檢驗(yàn)法檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。細(xì)菌培養(yǎng)法陽性檢出率高于革蘭染色檢驗(yàn)法陽性檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表2。PCR 檢驗(yàn)法陽性檢出率96.43%高于革蘭染色檢驗(yàn)法陽性檢出率40.48%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表3。

3討論

陰道炎臨床上以白帶的性狀發(fā)生改變以及外陰瘙癢灼痛為主要臨床特點(diǎn)[4]，其主要是由于陰道內(nèi)寄生菌群的失衡引起[5]。正常情況下，陰道內(nèi)寄居的各種菌群相互平衡，分泌各種物質(zhì)共同維護(hù)著陰道內(nèi)的菌群穩(wěn)定，特別是陰道桿菌以及陰道上皮細(xì)胞在其中起到關(guān)鍵性的作用[6]。陰道分泌物檢查是臨床婦科醫(yī)生診斷婦科炎癥最常用的輔助檢查方法之一[7]。該檢查能直接地反應(yīng)陰道內(nèi)是不是存在菌群失調(diào)，是否存在炎性感染以及所受感染的嚴(yán)重程度如何。

革蘭染色檢驗(yàn)法在陰道細(xì)菌檢驗(yàn)中，曾被多數(shù)學(xué)者人為其是首選方法[8]。不過由于多種因素的存在，革蘭染色法檢驗(yàn)過程中也存在很大的誤差。細(xì)菌培養(yǎng)檢驗(yàn)是臨床診斷細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，不過其檢驗(yàn)過程復(fù)雜、費(fèi)力，特別是很難在基層醫(yī)院開展。在本次研究中，筆者分別用革蘭染色檢驗(yàn)法、PCR 檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法做陰道細(xì)菌檢查。結(jié)果細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR 檢驗(yàn)法檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；PCR 檢驗(yàn)法檢出率高于革蘭染色檢驗(yàn)法檢出率；而細(xì)菌培養(yǎng)法檢出率高于革蘭染色檢驗(yàn)法檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示PCR 檢驗(yàn)法檢驗(yàn)敏感性及特異性高。

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編輯/申磊