唐古特大黃(Rheum tanguticum Maxim·ex Balf)醇提物對(duì)高脂血模型小鼠降血脂作用研究

摘要：目的研究唐古特大黃醇提物對(duì)小鼠降血脂的作用。方法將60只雄性昆明種小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、高、中、低劑量組，采用脂乳劑及飼料灌胃造模，連續(xù)喂養(yǎng)29d，分別測(cè)定小鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量。結(jié)果喂養(yǎng)29d后，大黃醇提物低劑量組、中劑量組、高劑量組都能極顯著的降低高脂模型血清中TC水平（P<0.01）。分別降低了約54%、62%和66%；并對(duì)高脂模型血清中TG水平分別降低了約40%、60%和71%；同時(shí)能夠極顯著的降低高脂模型血清中LDL水平（P<0.01）。分別降低了約、11%、28%和52%。結(jié)論唐古特大黃醇提物對(duì)小鼠高脂血癥有明顯的降血脂作用。

關(guān)鍵詞：橢葉花錨；醇提物；降血脂唐古特大黃多年生草本植物，是我國(guó)傳統(tǒng)中藥之一?，F(xiàn)代藥理及臨床研究表明：大黃具有瀉下、抗菌、抗腫瘤、抗高血脂、降低血壓及清除體內(nèi)氧自由基、調(diào)節(jié)免疫等諸多功效。高膽固醇血癥患者口服大黃莖纖維27g/d，連續(xù)4w，能夠有效的降低血清總膽固醇TG，尤其是低密度脂蛋白膽固醇LDL-C的濃度[1]。在對(duì)高血脂兔（高脂飼料誘導(dǎo)）的研究中發(fā)現(xiàn)，給予大黃醇提物連續(xù)10d，劑量分別為1.4，4.2，和12.6g/d，能夠降低血清TC和LDL-C的濃度，同時(shí)提升HDL-C的水平，病理切片表明大黃醇提物能夠降低肝脂肪變性并且具有保護(hù)肝細(xì)胞的功能。也有研究表明，大黃水提物可促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)從而抑制餐后脂肪負(fù)荷的積累[2]。本實(shí)驗(yàn)以橢葉花錨醇提物為研究對(duì)象，利用藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，探討其對(duì)降血脂的作用。為青藏高原藥用植物資源現(xiàn)代化開(kāi)發(fā)與利用提出新思路。

1資料與方法

1.1儀器LD4-2A低速離心機(jī)(香港興萬(wàn)電子儀器有限公司)、Rotavapor R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士步琪有限公司)、UV-1800紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(日本島津制造所)。

1.2試劑與藥品生化試劑盒:TC試劑盒(干粉型)、TG試劑盒(干粉型)、LDL試劑盒(干粉型)、HDL試劑盒(干粉型)，以上試劑均購(gòu)自中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)110311。

1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源實(shí)驗(yàn)用昆明種小白鼠60只(雄性，體重18g～22g)，清潔級(jí)，由青海省地方病防治研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證編號(hào)(青醫(yī)動(dòng)字01號(hào))。置于動(dòng)物飼養(yǎng)箱內(nèi)，室溫(21±1)℃飼養(yǎng)，適應(yīng)1w后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。

1.4實(shí)驗(yàn)藥物來(lái)源唐古特大黃，采自青海省玉樹(shù)州囊謙縣。由青海師范大學(xué)馬繼雄教授鑒定。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1大黃醇提物的制備將大黃根莖粉碎，75%乙醇浸泡10h，提取三次，濃縮乙醇提取物。

2.2高血脂藥物動(dòng)物模型建立及血清制備

2.2.1高血脂動(dòng)物模型制備將小鼠隨機(jī)分組，每組10只。分為正常對(duì)照組、高脂模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、高劑量給藥組、中劑量給藥組和低劑量給藥組。正常對(duì)照組灌胃給予蒸餾水。利用高脂乳劑造動(dòng)物模型，脂肪乳劑配方:20g豬油，10g膽固醇，1g丙硫氧嘧啶，吐溫-8020mL，丙二醇20mL，10％ 去氧膽酸鈉水溶液20mL，加蒸餾水至100mL。

2.2.2 給藥大黃醇提物的低、中、高給藥劑量分別為:137mg/kg、411mg/kg、1233mg/kg。對(duì)照組灌胃給予蒸餾水，陽(yáng)性對(duì)照組脂必妥的給藥劑量為:7mg/kg。

2.2.3樣品制取連續(xù)藥物及蒸餾水灌胃29d，1次/d， 第30d禁食16 h后采用摘眼法取血，8000r/min離心15min取血清測(cè)定。

2.3數(shù)據(jù)測(cè)定TC、TG、HDL、LDL含量參照ALLain.C.C的方法進(jìn)行測(cè)定[3]。

2.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理本數(shù)據(jù)用計(jì)算機(jī)SPSS17. 0統(tǒng)計(jì)軟件包中的ANOVA法進(jìn)行單因素方差分析處理，試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)處理，P>0. 05認(rèn)為無(wú)顯著性差異，P<0.05認(rèn)為有顯著性差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0. 01有極顯著性差異。

3結(jié)果

分別測(cè)定各組小鼠血清中的TC、TG、HDL、LDL濃度，結(jié)果見(jiàn)表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大黃醇提物低劑量組、中劑量組、高劑量組都能極顯著的降低高脂模型血清中TC水平（P<0.01）。分別降低了約54%、62%和66%；并對(duì)高脂模型血清中TG水平分別降低了約40%、60%和71%；同時(shí)能夠極顯著的降低高脂模型血清中LDL水平（P<0.01）。分別降低了約、11%、28%和52%。說(shuō)明唐古特大黃醇提物對(duì)小鼠高脂血癥有明顯的降血脂作用。

4討論

高血脂的特點(diǎn)是總膽固醇，甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇含量的升高及高密度脂蛋白膽固醇水平的降低。血脂異常是心血管疾病的重大隱患。高血脂可通過(guò)改變飲食習(xí)慣和服用影響脂質(zhì)代謝藥物的途徑得到緩解[4]。他汀類(lèi)藥物能夠通過(guò)抑制3-羥基-3-甲基戊二酰基-輔酶A（HMG-CoA）還原酶的作用來(lái)降低血清中LDL-C的含量。然而，他汀類(lèi)藥物具有引起肌肉肌病和導(dǎo)致肝功能紊亂的毒副作用[5]。貝特類(lèi)藥物經(jīng)常被用于降低血清中的TG水平，其機(jī)制是通過(guò)激活過(guò)氧化物酶體增殖物來(lái)激活α受體(PPARα)。然而在降低血脂的同時(shí)，貝特類(lèi)藥物增加了血清肌酐的濃度[6]，并伴隨有胰臟炎，靜脈血栓形成等副作用[7]。依澤替米貝和膽汁酸螯合劑，能夠有效降低LDL-C水平，減少腸道對(duì)膽固醇的吸收。然而，這些藥物對(duì)胃腸道同樣產(chǎn)生不利因素，包括影響其它藥物的吸收[8]。因此，對(duì)于這些降血脂傳統(tǒng)藥物的使用，解決副作用是一個(gè)重大的挑戰(zhàn)。

本研究表明，大黃醇提物低劑量組、中劑量組、高劑量組都能極顯著的降低高脂模型血清中TC水平（P<0.01）。分別降低了約54%、62%和66%；并對(duì)高脂模型血清中TG水平分別降低了約40%、60%和71%；同時(shí)能夠極顯著的降低高脂模型血清中LDL水平（P<0.01）。分別降低了約、11%、28%和52%。唐古特大黃醇提物具有顯著的降血脂和調(diào)節(jié)脂肪代謝或運(yùn)轉(zhuǎn)紊亂的作用。本研究為臨床提供了實(shí)驗(yàn)參考。同時(shí)，也為青藏高原中草藥的開(kāi)發(fā)及利用提供新的途徑。

參考文獻(xiàn):

[1]Goel，V，Ooraikul，B.，Basu，T.K.，1997.Cholesterol lowering effects of rhubarb stalk fiber in hypercholesterolemic men[J].Journal of the American College of Nutrition，16:600-604.

[2]Xie，W.，Gu，D.，Li，J.，Cui，K.，Zhang，Y.，2011.Effects and action mechanisms of berberine and rhizoma coptidis on gut microbes and obesity in high-fat diet-fed C57BL/6J mice[J].PLoS One 6，e24520.

[3]Allain C.C，Poon L.C，Chan C.S.G，et al.Enzymatic determination of total cholesterol[J].Clinical Chemistry，1974，20:470-473.

[4]Toth，P.P.，Drug treatment of hyperlipidaemia:a guide to the rational use of lipid-lowering drugs[J].Drugs，2010，70:1363-1379.

[5]Maggo，S.D.，Kennedy，M.A.，Clark，D.W.Clinical implications of pharmacogenetic variation on the effects of statins[J].Drug Safety，2011，34:1-19.

[6]Jun，M.，F(xiàn)oote，C.，Lv，J.，et al.Effects of fibrates on cardiovascular outcomes: a systematic review and meta-analysis[J].Lancet，2010，375:1875-1884.

[7]Wierzbicki， A.S.Fibrates in the treatment of cardiovascular risk and atherogenic dyslipidaemia[J].Current Opinion in Cardiology，2009，24:372-379.

[8]Filippatos，T.D.，Mikhailidis，D.P.Lipid-lowering drugs acting at the level of the gastrointestinal tract[J].Current Pharmaceutical Design，2009，15:490-516.

編輯/申磊