大鼠腎移植術(shù)中血管吻合技術(shù)的體會

摘要：大鼠腎移植模型是腎臟相關(guān)疾病研究中常用的動物模型，目前已有多種建模方式，但最主要的問題是術(shù)中血管吻合技術(shù)。目的 總結(jié)大鼠腎移植術(shù)后預(yù)防血栓形成的手術(shù)經(jīng)驗，減少術(shù)后血管并發(fā)癥的發(fā)生。方法 回顧性分析2010年1月~2013年12月60例大鼠腎移植手術(shù)，術(shù)中通過改進(jìn)血管游離等方面的手術(shù)技巧來預(yù)防移植腎血管并發(fā)癥的發(fā)生。結(jié)果60例大鼠腎移術(shù)后無1例出現(xiàn)吻合口狹窄及腎動脈血栓形成或栓塞。結(jié)論 采用適當(dāng)、熟練的手術(shù)技巧可以減少大鼠腎移植術(shù)后血管并發(fā)癥的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：大鼠腎移植；血栓形成；血管吻合；血管并發(fā)癥1資料與方法

1.1一般資料實驗手術(shù)過程中對動物的處置符合《貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物研究所倫理審查指南》。供受體均選用成年SD2大鼠各60只，鼠齡2~3個月，所有大鼠均為成年雄性，體重200~250g，由貴陽醫(yī)學(xué)院動物實驗研究所提供。

1.2藥品、器械肝素、生理鹽水（500/mL）、平衡液、自助置腎袋、8-0 無損傷縫線5-0 無損傷縫線、自制腹腔、血管拉鉤。

1.3方法供、受體大鼠均在移植前禁飲食6h，可以飲水，行（經(jīng)腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest）麻醉。

1.4供鼠移植行（經(jīng)腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest）麻醉。常規(guī)剔除腹部鼠毛并盡量不傷及皮膚，如果皮膚有傷口會會引起術(shù)后傷口感染。將大鼠除頭部以外，絡(luò)合碘消毒全身手術(shù)區(qū)域，鋪無菌巾，手術(shù)洞巾。取SD大鼠腹部皮膚正中作為手術(shù)切口。以回形針拉直后自制的腹腔拉鉤，將腹壁垂直傷口拉開，充分顯露腹部內(nèi)臟器官及左腎，避免周圍臟器（肝、脾）損傷，不損傷胸膜腔。以0.9%生理鹽水紗布將腹部腸管包裹推向右側(cè)以傷口減少大鼠體液喪失。供體大鼠在分離左腎及腎靜脈及周圍組織時要輕柔，避免損傷腎靜脈血管鞘。游離左腎動脈時，臨近腹主動脈一定要用5-0帶針縫合線逐一縫在、結(jié)扎各個分支血管，避免因出血而造成血管痙攣、大出血、血栓形成等不可逆性損傷導(dǎo)致大鼠死亡。游離腎臟時，應(yīng)緊貼腎臟避免周圍脂肪過度牽拉，操作粗暴會導(dǎo)致腎血管痙攣、大出血致腎缺血而壞死。處理腎上腺血管時，盡量帶一點腎上腺組織并作為其腎上的標(biāo)記，避免在受體腎移植時腎上極顛倒導(dǎo)致手術(shù)失敗。總的來講游離大鼠左側(cè)腎上腺動、靜脈、左側(cè)精索動、靜脈、應(yīng)逐個結(jié)扎、切斷。鈍性游離腎臟的背側(cè)、上極、下極； 游離腹主動脈，特別要注意其后方存在1-2根椎動脈，應(yīng)予以一并結(jié)扎切斷。將此段腹主動脈與下腔靜脈及左腎靜脈完全分離；左輸尿管應(yīng)從大鼠腹主動脈游離并切斷，以5-0帶針可吸收線結(jié)扎備用。輸尿管周圍的脂肪組織是維持輸尿管血供的主要來源，在游離輸尿管時這些脂肪組織應(yīng)盡量多保留，以免術(shù)后輸尿管壞死。用文氏鉗在左腎動脈上方（離腎動脈約0.5cm）阻斷大鼠腹主動脈，迅速以0℃~5℃肝素鈉生理鹽水2mL低壓、勻速灌洗大鼠左腎，可見左腎色澤逐漸轉(zhuǎn)為均勻的淺淡黃色時切斷左腎靜脈，再以0℃~5℃肝素鈉生理鹽水2mL低壓、勻速灌洗腎臟，以去除左腎靜脈內(nèi)殘留血液。于左腎動脈上方緊貼腹主動脈處5-0帶針可吸收線結(jié)扎、縫扎腎動脈，這時供腎切取完成。切取的腎臟立即放入0℃~5 ℃平衡液中。在取供體大鼠左腎時，冷缺血時間、熱缺血時間應(yīng)縮短。本組60例大鼠腎移植實驗表明，供體腎當(dāng)溫度大于5℃，冷藏時間在大于12h時，大鼠腎移植術(shù)后會產(chǎn)生少尿、腎功能衰竭；大于16 h 移植腎喪失功能，受體死亡。

1.5受體移植大鼠麻醉行經(jīng)腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest， 常規(guī)剔除腹部鼠毛并盡量不傷及皮膚，如果皮膚有傷口會會引起術(shù)后傷口感染。將大鼠除頭部以外，絡(luò)合碘消毒全身手術(shù)區(qū)域，鋪無菌巾，手術(shù)洞巾。取SD大鼠腹部皮膚正中作為手術(shù)切口。以回形針拉直后自制的腹腔拉鉤，將腹壁垂直傷口拉開，充分顯露腹部內(nèi)臟器官及左腎，避免周圍臟器（肝、脾）損傷，不損傷胸膜腔。以0.9%生理鹽水紗布將腹部腸管包裹推向右側(cè)以傷口減少大鼠體液喪失。游離大鼠左腎及腎臟周圍組織，游離左側(cè)輸尿管，游離暴露左腎靜脈下方的腹主動脈和下腔靜脈，血管鉗阻斷約1.5cm的該段動靜脈取出供腎，置于自制腎袋內(nèi)。以往手術(shù)證明，端側(cè)吻合腎動脈時，手術(shù)時間會明顯延長，大鼠腹主動脈和下腔靜脈被夾閉，會導(dǎo)致受體器官缺血再灌注損傷。夾閉時間越長會導(dǎo)致供腎缺血再灌注損傷增大。相反，腎動脈血管的端端吻合對受體器官的損傷較小，明顯縮短手術(shù)時間。本人認(rèn)為使用保留盡可能長的供腎動脈于腹主動脈端端吻合、供腎靜脈與受體大鼠腔靜脈端側(cè)的吻合，術(shù)后效果最好，是一種最穩(wěn)定的腎移植模型。

1.6吻合方法在雙人顯微鏡下，用8-0無損傷縫線縫合供腎動脈兩個點(3，9點），助手牽拉兩條縫合線，前后面8-0無損傷縫線連續(xù)縫合行腎動脈和腹主動脈殘端，端端吻合。縫合時血管夾夾閉腹主動脈防止管腔狹窄，漏血形成血栓。 然后用0℃~5℃肝素鈉生理鹽水沖洗供腎腎靜脈，使腎靜脈置入自然位置再行吻合，以免誤縫前后壁。剪開受體大鼠腔靜脈，盡量離供腎腎靜脈位置旁邊，8-0無損傷縫線縫合腎靜脈兩個點(3，9點）和腔靜脈端側(cè)吻合。吻合靜脈時助手牽拉兩點鋒線，不要牽拉過猛。牽拉過猛會導(dǎo)致縫線滑脫造成手術(shù)和腎缺血時間過長影響腎功能的恢復(fù)。不要反復(fù)牽拉血管以免內(nèi)膜損傷造成術(shù)后血栓形成。牽拉兩點血管后，8-0無損傷縫線連續(xù)縫合牽拉點的前后血管。吻合血管時不要將血管前后壁夾閉導(dǎo)致手術(shù)失敗。

1.7尿路重建使用5-0 無損傷縫線輸尿管端端吻合，間斷吻合4～6針。

1.8摘除受體原右側(cè)腎臟方法同供體左腎切除術(shù)，游離受者右腎時5-0 無損傷縫線結(jié)扎腎蒂，不用考慮輸尿管的血供及腎臟周圍血管的分離。較為簡單，切除時間較短。

2結(jié)果

60例大鼠腎移植術(shù)后均未出現(xiàn)血管吻合口處狹窄及腎動脈血栓形成，腎動脈栓塞等血管并發(fā)癥。術(shù)后每天監(jiān)測大鼠受體腎功均在正常范圍。受體及供體傷口按時換藥1次/d，均未出現(xiàn)傷口感染。采用適當(dāng)?shù)氖中g(shù)技巧和熟練的外科手術(shù)技能，可以大大減少大鼠腎移植術(shù)后血管并發(fā)癥的發(fā)生。

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編輯/哈濤