穩(wěn)定和不穩(wěn)定冠心病紅細(xì)胞膽固醇與基質(zhì)金屬蛋白酶—9的關(guān)系研究

摘要：目的 研究不同類型冠心病患者紅細(xì)胞膽固醇的變化，從臨床角度分析紅細(xì)胞膽固醇（E-ch）與冠心病不穩(wěn)定性的關(guān)系；觀察紅細(xì)胞膽固醇與基質(zhì)金屬蛋白酶.9 （MMP-9）的相關(guān)性。方法 選擇住院患者59例，其中穩(wěn)定型心絞痛（SAP）28例，急性冠脈綜合征（ACS） 31例，另外選擇30例健康體檢者作為對(duì)照（Nor）。對(duì)三組病例的E-ch、MMP-9進(jìn)行對(duì)比分析及相關(guān)性分析。結(jié)果 ①E-ch及血清MMP-9水平：ACS組分別與SAP及N組比較均增高，差異具有顯著性。SAP與N組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②直線相關(guān)性分析：三組內(nèi)E-ch與MMP-9呈顯著正相關(guān)關(guān)系（r=0.78，P<0.01）； ACS組內(nèi)，E-ch與MMP-9呈更強(qiáng)的正相關(guān)關(guān)系（r=0.830，P<0.01=，而在SAP和兩組內(nèi)相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F0.206，P=0.121）。結(jié)論 ①ACS患者E-ch明顯升高。冠心病患者E-ch水平增高提示病情不穩(wěn)定。②E-ch水平增高促使炎癥反應(yīng)產(chǎn)物MMP-9分泌增加，可能是E-ch誘導(dǎo)斑塊不穩(wěn)定的一個(gè)機(jī)制。

關(guān)鍵詞：冠心病；穩(wěn)定型心絞痛；急性冠脈綜合癥；紅細(xì)胞膽固醇；基質(zhì)金屬蛋白酶一9

急性冠脈綜合癥（ acute coronary syndrome，ACS）是冠心病的急性過程，大多沒有先兆，難以預(yù)料。尋找預(yù)測(cè)ACS的簡(jiǎn)便指標(biāo)意義重大。ACS患者紅細(xì)胞膜總膽固醇含量（total cholesterol content of erythrocyte membrances，CEM）高于SAP患者和健康對(duì)照人群，即不同的冠心病臨床狀態(tài)其CEM明顯不同。紅細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇在脂核增大導(dǎo)致斑塊進(jìn)展方面已有研究，但CEM水平與代表粥樣斑塊易損性的炎癥指標(biāo)MMP-9之間的關(guān)系國(guó)內(nèi)外報(bào)道較少。

1資料與方法

1.1一般資料 選擇冠心病59例：其中穩(wěn)定性心絞痛（SAP）28例，急性冠脈綜合征（ACS）31例，在31例ACS中，不穩(wěn)定性心絞痛（UAP） 13例，急性心肌梗塞（AMI）18例。30例健康體檢者做對(duì)照組。除外入院前2月內(nèi)服用他汀類藥物，未控制的高血壓，合并周圍血管病，腦卒中，肝腎功能不全，甲狀腺疾病，腫瘤，免疫性和感染性疾病，急診介入治療和AMI發(fā)病超過12h，血常規(guī)中紅細(xì)胞計(jì)數(shù)異常者等。

1.2方法 E-ch：采用全血酶法測(cè)定。計(jì)算：全血TC（ mmol/L）=（Au-Ab）/（As-Ab）×5.46。E-ch（ mmol/L）=（全血TC-血漿TC）/壓積+血漿TC。MMP-9：采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理定量測(cè)定。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)資料采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)分布和方差齊性檢驗(yàn)；非正態(tài)分布數(shù)據(jù)經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后接近正態(tài)分布再行檢驗(yàn)。計(jì)量資料采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間差異顯著性檢驗(yàn)采用Bonferroni法，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用直線相關(guān)分析。P<0.05認(rèn)為有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1基本臨床資料 三組患者年齡、性別、傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素等基礎(chǔ)資料和紅細(xì)胞參數(shù)、血脂比較：各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具可比性。

2.2 E-ch和血清MMP-9水平比較 見表2。

3.1紅細(xì)胞膽固醇與ACS的關(guān)系 2003年Kolodgie等在猝死于冠脈疾患者群中發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈斑塊的壞死脂核中含有紅細(xì)胞膜，且抗血型糖蛋白A免疫染色的程度與壞死脂核的大小密切相關(guān)；同時(shí)發(fā)現(xiàn)：大量紅細(xì)胞膜膽同醇的聚集可以導(dǎo)致脂質(zhì)核心的迅速增大，引起斑塊進(jìn)展和破裂。說明紅細(xì)胞豐富的游離膽固醇是斑塊脂質(zhì)的來源，紅細(xì)胞膽固醇參與了粥樣斑塊脂核的快速增大和進(jìn)展。Tziakas等的前瞻性研究表明：ACS患者CEM顯著高于慢性SAP和健康人群，并且在慢性SAP和健康人群間無差異，進(jìn)一步支持CEM增加是冠心病活動(dòng)的標(biāo)志物，而不是存存冠狀動(dòng)脈硬化與否的標(biāo)志。本研究指標(biāo)E-ch在實(shí)驗(yàn)中顯示出相似的統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果，揭示了E-ch與不穩(wěn)定性冠心病相關(guān)，E-ch水平增高是粥樣斑塊易損性增加和斑塊破裂的促進(jìn)因素，提示E-ch可能是冠心病活動(dòng)的生化標(biāo)志。

3.2紅細(xì)胞膽固醇促使斑塊不穩(wěn)定的可能機(jī)制 影響斑塊迅速增大的因素是出血和炎癥。Kolodgie及2004年Moreno等指出：斑塊內(nèi)出血在進(jìn)展的動(dòng)脈粥樣斑塊中很常見，新生血管和斑塊內(nèi)出血是導(dǎo)致斑塊易損、不穩(wěn)定的重要因素。2007年Kolodgie等又旨出，進(jìn)入斑塊內(nèi)的紅細(xì)胞主要來源于外膜血管中的滋養(yǎng)血管向內(nèi)膜層發(fā)展的幼稚易漏的新生血管網(wǎng)。斑塊內(nèi)急性炎癥是導(dǎo)致ACS發(fā)生的關(guān)鍵因素。 紅細(xì)胞進(jìn)入斑塊可能觸發(fā)及促進(jìn)斑塊內(nèi)炎癥反應(yīng)，可能與紅細(xì)胞膜有很多炎癥趨化因子受體有關(guān)。還可能涉及紅細(xì)胞膜膽固醇和紅細(xì)胞降解物，如血紅蛋白或血紅素，鐵和磷脂，尤其血紅素，是強(qiáng)的前氧化物，可觸發(fā)過氧化反應(yīng)，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，尤其當(dāng)膽固醇和氧化物同時(shí)大量聚集于斑塊時(shí)，產(chǎn)生氧化LDL-c，后者是促進(jìn)粥樣硬化進(jìn)展的一種關(guān)鍵物質(zhì)，可致巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)和炎癥因子表達(dá)進(jìn)一一步增高。炎性反應(yīng)導(dǎo)致了斑塊破裂和血栓形成：①巨噬細(xì)胞分泌的MMPs可以降解纖維帽中的膠原和細(xì)胞外基質(zhì)，T淋巴細(xì)胞分泌的INF-Y抑制血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)膠原蛋白，使纖維帽變薄，易破裂：②細(xì)胞因子如TNF、IL-1等可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞凋亡，使脂核變大，纖維帽變??；③細(xì)胞因子可以促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌內(nèi)皮素，導(dǎo)致血管收縮，擠壓斑塊，促使其破裂：④斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞分泌組織因子，促進(jìn)血栓形成。E-ch在冠心病臨床過程中呈一過性或暫時(shí)性增高，與慢性病變迅速進(jìn)入ACS急性過程相一致，從以上論述說明E-ch可能通過炎癥和出血兩個(gè)機(jī)制促使斑塊快速進(jìn)展為易損斑塊。

3.3紅細(xì)胞膽固醇與基質(zhì)金屬蛋白酶9的關(guān)系 AS是個(gè)慢性炎癥過程，而AS斑塊的急性炎癥是導(dǎo)致ACS發(fā)生的關(guān)鍵因素。斑塊纖維帽中侵入的巨噬細(xì)胞越多，炎性反應(yīng)越活躍，斑塊就越脆弱，這與巨噬細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶MMPs，降解細(xì)胞外基質(zhì)導(dǎo)致纖維帽變薄有關(guān)，其中MMP-9與斑塊不穩(wěn)定性尤為相關(guān)。劉啟明等發(fā)現(xiàn)ACS組冠脈丌口處血漿MMP-9水平明顯高于SAP組和對(duì)照組，與\"犯罪血管\"密切相關(guān)。之后許多學(xué)者發(fā)現(xiàn)，ACS血清MMP-9水平明顯增高，MMP-9與AS斑塊破裂密切相關(guān)，是ACS發(fā)生的分子機(jī)制，MMP9作為斑塊易損性或斑塊破裂的炎癥指標(biāo)被很多實(shí)驗(yàn)所證實(shí)。Blankenber等近來報(bào)道，血漿MMP-9水平與1 127例冠心病4.1年來發(fā)生致命心血管事件的危險(xiǎn)性之問具有較強(qiáng)且獨(dú)立的相關(guān)性，證實(shí)了MMP-9水平與心血管事件之間的前瞻性關(guān)系。

本研究重要的是我們首次研究了E-ch與血清MMP-9兩者在冠心病中的關(guān)系，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)兩者在三組患者中呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，從斑塊破裂的炎癥因素方面表明E-ch與易損斑塊有密切的關(guān)系。更有意義的發(fā)現(xiàn)是，在ACS組內(nèi)，兩者的『F相關(guān)關(guān)系更強(qiáng)，這一點(diǎn)強(qiáng)烈提示E-ch誘導(dǎo)的MMP-9分泌增加可能是導(dǎo)致ACS發(fā)生的重要原因。而SAP組和對(duì)照組內(nèi)E-ch與血清MMP-9無相關(guān)性，說明在穩(wěn)定性冠心病和健康人群中，E-ch與血清MMP-9并無密切關(guān)系。林暉莉、張運(yùn)2007年在斑塊內(nèi)出血兔模型中發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞斑塊中紅細(xì)胞膜的痕跡、鐵沉積的水平和斑塊MMP-9，血管問粘附分子一1、單核細(xì)胞趨化蛋白.1、核轉(zhuǎn)錄因子-kB、會(huì)屬蛋白酶組織抑制齊一l的mRNA表達(dá)有劑量依賴性關(guān)聯(lián)，也與斑塊巨噬細(xì)胞染色、抗-MMP-9和抗一核轉(zhuǎn)錄因子-kB免疫組化染色的水平相平行。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與之吻合，表明斑塊內(nèi)紅細(xì)胞與炎癥密切相關(guān)，提示在斑塊局部，直接接觸紅細(xì)胞脂質(zhì)的巨噬細(xì)胞可能通過足夠的信號(hào)傳遞，大量合成分泌MMP-9等，使斑塊快速進(jìn)展，甚至破裂。

編輯/許言