摘要:隨著國家的發(fā)展和社會的進(jìn)步,越來越多新的科學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到了應(yīng)用。測定重要成分和含量的方法也在逐漸的發(fā)展和改進(jìn)。本文中筆者根據(jù)自身的經(jīng)驗(yàn)以及對目前有關(guān)中藥成分含量測定的已有資料的研究,總結(jié)和歸納了目前常用的重要成分含量測定方法,以期能夠更好的對比和研究各個方法的優(yōu)缺點(diǎn),為業(yè)內(nèi)的研究和應(yīng)用者提供參考和借鑒。
關(guān)鍵詞:中藥;成分;含量;測定
中藥作為中華民族的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)內(nèi)容其獨(dú)特的理論體系已經(jīng)為我國的民族醫(yī)學(xué)發(fā)展和民眾健康生活做出了重要的貢獻(xiàn)。近些年來,隨著中藥的各種品種、制劑以及其他應(yīng)用在各個方面的飛速發(fā)展,中藥制品主要以復(fù)方制劑呈現(xiàn),由于其種類較多,生長環(huán)境和加工環(huán)境各不相同,產(chǎn)地和成分相對復(fù)雜,制作工藝存在差異等問題導(dǎo)致了中藥制劑的有效成分問題備受關(guān)注。對中藥制劑的質(zhì)量控制最關(guān)鍵的部分就是對其有效成分的控制,下文加針對這一問題進(jìn)行闡述,主要是對近些年來業(yè)內(nèi)的研究成果做一個總結(jié)和概括?,F(xiàn)有的有關(guān)中藥有效成分的測定方法主要有如下幾種:
1化學(xué)定量法
對中藥制劑成分測定的最原始的方法就是化學(xué)定量法,但這種方法只適用于對處方中的無機(jī)成分的測定,并且只適用于單味中藥制劑[1]。這一部分主要包括滴定法和重量法,一旦所測定的處方比較復(fù)雜就只能得到某類成分的總量,而不能找到專屬性特點(diǎn)。
2比色法
比色法是指將特定的顯色試劑與中藥的有效成分進(jìn)行呈色后進(jìn)行比對和測定的方法,這種方法可以用于分離中藥成分中的酚性化合物、生物堿、皂甙類、蒽醌類、黃酮類等常見成分。
3紫外分光光度法
紫外分光光度法主要是利用中藥中的有效成分對紫外分光有特定的吸收程度,在不添加顯色劑的情況下對各種波長的光進(jìn)行吸收,最后通過對吸收度的測量來計(jì)算成分含量的方法。這種方法在實(shí)際使用中比比色法運(yùn)用的更廣,可以用來測定二苯乙烯苷類、皂甙類、香豆素類、黃酮類等化合物的含量,進(jìn)行痕量和微量的組分分析,并且可以達(dá)到0.5%的精密度和10-4~10-7g/ml的靈敏度。
4紅外光譜法(FTIR)
FTIR是紅外光譜法(Frustrated Total Internal Reflection)的簡稱,該方法在使用過程中會在演示屏幕的夾層中加入LED光線,當(dāng)用戶按下屏幕時,便會使夾層的光線造成不同的反射效果,感應(yīng)器接收光線變化而捕捉用戶的施力點(diǎn),從而作出反應(yīng)[2]。這一方法具有很高的重現(xiàn)性和專屬性,并且操作相對簡便,可以對分子結(jié)構(gòu)信息進(jìn)行分析。近些年,紅外光譜儀的使用越來越廣泛,其在中藥成分測定中發(fā)揮的作用也被更多關(guān)注。
5薄層掃描法(TLCS)
TLCS是薄層掃描法(Thin Layer Chromatograph Scanning)的簡稱,該方法是以一定波長的光照射展開后的薄層色譜板,測定其對光的吸收或所發(fā)出的熒光,進(jìn)行定量分析的方法[3]。通常選擇斑點(diǎn)中化合物的吸收峰波長作為測定波長、選擇化合物吸收光譜的基線部分、即化合物無吸收的波長作為參比波長。薄層掃描法一般可分為吸收掃描法和熒光掃描法。對薄層進(jìn)行分離得到的直觀結(jié)果可以很好的提高中藥有效成分的檢測穩(wěn)定性和靈敏度,并且操作相對簡單,對靛玉紅、豬去氧膽酸、淫羊藿苷、綠原酸等成分的測定過程都有很好的效果。
6氣相色譜法(GC)
GC是氣相色譜法(Gas Chromatography)的簡稱,該方法的重現(xiàn)性也相對較好,可以通過很少的樣品用量實(shí)現(xiàn)快速的高靈敏高選擇性測定[4]。但是由于檢測方法的原理限制,受到樣品蒸汽壓的影響,只能測定出揮發(fā)性成分在樣品中的含量。對于具有重要揮發(fā)性成分的制劑,采用GC分析的方法可以說是目前最好的方法之一,能夠?qū)?nèi)酯類、冰片、生物堿、麝香酮、酚類、麻黃堿、蒎烯、斑鰲素、察香酮、丹皮酚、芳香醇等成分實(shí)現(xiàn)高效分析。
7高效液相色譜法(HPLC)
HPLC是高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography)的簡稱。高效液相色譜是色譜法的一個重要組成部分,采用高壓輸液系統(tǒng),以液體為流動相,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的緩沖液、混合溶劑等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測,從而實(shí)現(xiàn)對試樣的分析[5]。這一方法測定重要成分的時候也同樣具有靈敏度高和選擇性好的優(yōu)點(diǎn),并且重現(xiàn)性和分析速度都能夠達(dá)到一般測定要求。因此,高效液相色譜法已經(jīng)成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)界對重要含量測定所采用的最廣泛的做法。但是這一方法也有一定的弊端,就是其對儀器的基本要求相對較高,建立色譜的過程和條件也相對復(fù)雜。
本文中介紹了目前醫(yī)學(xué)界對中藥成分含量測定的常見方法,包括高效液相色譜法、氣相色譜法、薄層掃描法、紅外光譜法、紫外分光光度法、比色法和化學(xué)定量法,其中前四種是目前普遍使用的,而后三種的技術(shù)已經(jīng)逐漸在使用過程中淘汰。醫(yī)學(xué)界目前對重要成分的檢測已經(jīng)朝著更加全面和合理的方向的發(fā)展,色譜技術(shù)以其較多的優(yōu)勢在應(yīng)用中倍受青睞,發(fā)揮了較多的作用。相信隨著科技的進(jìn)步帶動醫(yī)學(xué)界的不斷發(fā)展,中藥成分含量測定的工作一定會開展的更加完善和合理,其測定效果也會越來越精確。
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編輯/王海靜