天等縣471例地貧基因診斷結(jié)果分析

摘要：地中海貧血（簡(jiǎn)稱地貧）是一組高度異質(zhì)性的遺傳性溶血性疾病。它是由于珠蛋白基因突變，生物合成受阻、產(chǎn)量不足或缺如所致。我院從2012年6月開(kāi)始對(duì)471 例地貧攜帶的孕夫婦進(jìn)行基因分型，了解我縣地貧分布類(lèi)型情況，更好的指導(dǎo)地貧治工作，為實(shí)施優(yōu)生優(yōu)育提供醫(yī)學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：地中海貧血；基因；診斷

1資料與方法

1.1一般資料 天等縣2012年6月～2013年6月由區(qū)婦幼行地貧基因檢測(cè)報(bào)告陽(yáng)性的已孕夫婦。

1.2方法 天等縣婦幼保健院與廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院合作開(kāi)展地中海貧血基因診斷項(xiàng)目，天等縣婦幼保健院和縣人民醫(yī)院孕產(chǎn)期門(mén)診對(duì)地貧初篩均為陽(yáng)性的已孕夫婦，由天等縣婦幼保健院負(fù)責(zé)抽血標(biāo)本后按要求運(yùn)送標(biāo)本到區(qū)婦幼進(jìn)行地貧基因診斷，診斷技術(shù)為通過(guò)PCR-RDB法檢測(cè)β-地貧基因17種較為常見(jiàn)的突變和采用GaP-PCR法檢測(cè)α-地貧基因常見(jiàn)3種缺失型及PCR-RDB法檢測(cè)3點(diǎn)突變，診斷準(zhǔn)確率約為98%。

2基因診斷結(jié)果

國(guó)際衛(wèi)生組織對(duì)血紅蛋白基因非常重視，據(jù)其統(tǒng)計(jì)，全球攜帶血紅蛋白基因的人群大約占總?cè)藬?shù)的5%，范圍非常之廣，影響范圍非常巨大，每年全球出生的地中海貧血患兒大約有20萬(wàn)人。地中海貧血在中國(guó)的分布主要是南多北少，地中海貧血在中國(guó)南方是發(fā)病率最高、影響較大的一種遺傳性疾病。人體血紅蛋白基因的突變或缺失是發(fā)病的主要機(jī)制，進(jìn)而導(dǎo)致α與β球蛋白肽鏈合稱速度的不一致，如果長(zhǎng)期不注意保養(yǎng)和治療，會(huì)導(dǎo)致融血性貧血的發(fā)生。雖然地中海貧血的危害較大，但當(dāng)前的治愈方案大多治標(biāo)不治本，目前的醫(yī)療水平也難以預(yù)防該病的發(fā)生，而監(jiān)控就成為降低地中海貧血的有效手段之一，其主要方法是男女婚前進(jìn)行檢查，如果胎兒攜帶地中海貧血性疾病，通過(guò)阻斷該胎兒的出生，來(lái)達(dá)到抑制地中海貧血的目的。天等縣地處廣西西南部，屬于完全意義上的中國(guó)南方，故而地中海貧血發(fā)生率較高，嚴(yán)重影響了當(dāng)?shù)厝说慕】担o當(dāng)?shù)氐募彝?lái)了巨大的財(cái)產(chǎn)損失和精神傷害。本文對(duì)天等縣471例地中海貧血患者的基因進(jìn)行分析，以期對(duì)地中海貧血的預(yù)防和控制提供自己的一點(diǎn)思考，其分析結(jié)果如下。

在471例地貧攜帶者中，α地貧302例，占64.12%，β地貧134例，占28.45%，α地貧復(fù)合β地貧35例，占7.43%?；蛐图捌漕l率見(jiàn)表1、2、3。

3討論

地中海貧血是廣東、廣西、海南等南方省份影響最大、發(fā)病率最高的一類(lèi)血紅蛋白疾病，在上述地區(qū)中，又以廣西最為嚴(yán)重，天等縣作為廣西的一個(gè)縣，自然也是重災(zāi)區(qū)。上述3省人群中α地中海貧血的發(fā)生率約為1.7%～9.3%，其中，重型α地貧的發(fā)生率也是不可忽視的，達(dá)到了0.4‰。地中海貧血在目前的治療方法主要是預(yù)防，并沒(méi)有特別有效的藥物，其中HbBart's患兒在畜生后幾十分鐘內(nèi)一般都會(huì)死亡，很難有幸免，更嚴(yán)重過(guò)的水腫胎兒常在晚期妊娠中死于母腹之中。對(duì)于重癥的β地中海貧血患兒，其治療方法一般考頻繁的輸血，初次之外無(wú)其它有效方法維持患兒的生命，這對(duì)于一般的家庭是難以承受的，通過(guò)給家庭造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，很多家庭因此走向破敗。綜上，筆者認(rèn)為，目前預(yù)防地中海貧血的最有效的途徑就是阻止患兒的出生，這在法律上也是合理的途徑之一。

α地中海貧血主要是因?yàn)棣林榈鞍谆虻娜笔Щ蛘咦儺悺Ｄ壳澳軌虿槊鞯摩恋刂泻Ｘ氀蛲蛔冾?lèi)型資料有限，一般研究者認(rèn)為有87種，其中35種為確實(shí)性基因突變?cè)斐傻模?3種是點(diǎn)缺失造成的，這是目前醫(yī)學(xué)界能夠得出的最確切的成果。中國(guó)的地中海貧血的基因突變類(lèi)型主要有3種，其中①α+突變，其有又可以細(xì)分成兩種類(lèi)型，具體情形在此不作討論，②，α0突變，即突變確實(shí)了一條染色體上的部分蛋白。本研究中的477例患者中，α地中海貧血有302例，占了到總比例的64.12%。

β地中海貧血一般是有β珠蛋白基因點(diǎn)突變?cè)斐傻摩骆渕R-NA的生成逐漸減少，進(jìn)而是相應(yīng)的蛋白質(zhì)的合稱逐漸減少，致使HbA明顯全無(wú)或者顯著缺乏。國(guó)外對(duì)于β珠球蛋白的研究比較深入，根據(jù)國(guó)外最新的研究成果，我們可以發(fā)現(xiàn)β珠球蛋白的基因突變類(lèi)型非常廣泛，其類(lèi)型之多達(dá)到了罕見(jiàn)的地步，至少在400種以上，但是這些突變并不是均勻分布的，在不同的種族或者地區(qū)的人群中各自的類(lèi)型都有很大的差異。本文對(duì)于134例β多患者共檢測(cè)到11中β珠球蛋白蛋白突變位點(diǎn)。

目前，能夠用來(lái)帥查珠蛋白生成障礙的手段有限，中國(guó)主要采用MCV進(jìn)行篩查，但是有個(gè)MCV降低和其它一些原因，缺鐵性貧血患者也比較多，除了常見(jiàn)輕型珠蛋白生成翟愛(ài)性貧血外，一般這種診斷效果缺乏特異性，并不能取得較好的效果。用紅細(xì)胞脆性一管的方法檢測(cè)珠蛋白生成問(wèn)題是另一些醫(yī)院的做法，這種做法能達(dá)到一般效果，但是靈敏度低，部分珠蛋白生成問(wèn)題難以檢測(cè)，從而加重了檢測(cè)的不確定性。另外一些方法如利用血紅蛋白電泳技術(shù)來(lái)診斷珠蛋白生成問(wèn)題，同樣能起到良好效果，但是這種方法一樣具有不可客服的弱點(diǎn)，即其對(duì)靜止型珠蛋白生成翟愛(ài)性貧血的診斷效果比較差。有條件的醫(yī)院可以適用PCR結(jié)合反向斑點(diǎn)雜交法或者Gap-PCR法，此種檢驗(yàn)方法特異性強(qiáng)，技術(shù)比較成熟，可以在有限的范圍內(nèi)推廣應(yīng)用。但是此種方法容易漏掉對(duì)非缺失型地中海貧血的檢測(cè)。近年來(lái)，國(guó)外的多重鏈接酶依賴探針擴(kuò)增技術(shù)發(fā)展較為成熟，能夠有效對(duì)地中海貧血的疑似病例進(jìn)行檢、測(cè)，在此基礎(chǔ)上還可以發(fā)現(xiàn)新的突變點(diǎn)。目前傳統(tǒng)的地中海貧血診斷方法存在很大的漏洞，這是因?yàn)榈刂泻Ｘ氀蜃V十分復(fù)雜。MLPA技術(shù)針對(duì)覆蓋了檢測(cè)的整個(gè)目的序列，針對(duì)不同的檢測(cè)序列設(shè)計(jì)有針對(duì)性的探測(cè)組，檢測(cè)效果大大提高，有針對(duì)性的檢測(cè)數(shù)目的序列幾乎所有的基因缺陷。能夠正確運(yùn)用基因測(cè)序技術(shù)和MLPA技術(shù)，建立一個(gè)優(yōu)化、全面的篩查和診測(cè)平臺(tái)，并在臨床中合理的應(yīng)用，將能檢測(cè)出更多缺陷基因的疑似患者，切實(shí)提高地中海貧血基因缺陷的檢測(cè)能力，有效控制地中海貧畜生缺陷，更好的指導(dǎo)婚配和生育，都有著重要的意義。

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編輯/肖慧