霞草中總皂苷含量的測(cè)定和去污能力的測(cè)試

董相軍　張彩霞　呂海金

摘要 [目的]測(cè)定霞草中總皂苷含量并對(duì)其去污能力進(jìn)行分析。

[方法]用分光光度法對(duì)霞草根的總皂苷含量進(jìn)行了測(cè)定，并對(duì)霞草根水提液的去污能力進(jìn)行了初步測(cè)試。[結(jié)果]經(jīng)過試驗(yàn)，確定可以用齊墩果酸作為標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)波長(zhǎng)為540 nm，標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸線性方程為Y=0.040X-0.048 （R2=0.996），穩(wěn)定性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.01%，重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.67%，樣品平均加標(biāo)回收率為99.99%，霞草中總皂苷含量為2.13 mg/g。同時(shí)得出霞草根水提取液的1∶3稀釋液有較強(qiáng)的去污能力。[結(jié)論]該研究可為霞草根洗滌用品的開發(fā)研制提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞 霞草；總皂苷；含量；去污能力

中圖分類號(hào) S184 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）11-03367-02

Abstract [Objective] To measure total saponin content in Gypsophila roots and analyze its decontamination ability. [Method] Using spectrophotometry to measure total saponin content in Gypsophila roots and test decontamination ability of aqueous extract of Gypsophila roots. [Results] The oleanolic acid can be used as standard product； the detection wavelength was 540 nm； the linear regression equation is Y=0.040X-0.048（R2=0.996）； relative standard deviation of stability is 1.01%； relative standard deviation of repeatability is 0.67%； the average recovery of standard addition is 99.99%； the total saponin content is 2.13 mg/g； 1∶3 dilution has the higher decontamination ability. [Conclusion] This study can provide certain reference for research and development of detergent containing Gypsophila roots.

Key words Gypsophila；Saponins； Content； Decontamination ability

霞草（Gypsophila oldhamiana Miq.）為石竹科石頭花屬植物，廣泛分布于我國(guó)華北、東北、山東、河南等地，生于山坡草叢，陽(yáng)坡、半陽(yáng)坡較多[1]?！吨袊?guó)植物志》記載：“根的水浸劑可洗滌毛、絲織品”。近年來研究發(fā)現(xiàn)，霞草根部含有大量的包含齊墩果酸在內(nèi)的三萜及其皂苷類化合物[2]。因霞草根含有大量的皂苷，可用作洗滌。筆者對(duì)霞草總皂苷含量進(jìn)行測(cè)定并對(duì)其去污能力進(jìn)行研究，以期為以后研制純天然霞草洗滌用品打下基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥材。霞草根采于青島市黃島區(qū)小珠山，2013年12月份采樣，用毛刷洗干凈，自然晾干，用高速粉碎機(jī)粉碎，過60目篩，放入烘箱中，70 ℃恒溫干燥至恒重。

1.1.2 儀器與試劑。主要儀器：UV1801型紫外-可見分光光度計(jì)，上海元析儀器有限公司；AL204電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司；SCQ5201型超聲波清洗器，上海聲彥超聲波儀器有限公司； DK981型數(shù)控恒溫水浴鍋，天津市泰斯特儀器有限公司；高速多功能粉碎機(jī)，永康市綠可食品機(jī)械有限公司。主要試劑：齊墩果酸對(duì)照品（110709201206），購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；高氯酸、冰乙酸等試劑均為分析純。

1.2 齊墩果酸貯備液的制備 齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)品在105 ℃干燥至恒重，精密稱取23 mg，用甲醇溶解，容量瓶定容至10 ml，得23 mg/ml貯備液。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)品及檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

因霞草根部含有齊墩果酸，選取齊墩果酸作為標(biāo)準(zhǔn)品。分別吸取0.3 ml齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（貯備液稀釋5倍）和0.6 ml樣品溶液于具塞比色管中， 水浴除去甲醇， 首先加5%香草醛-冰醋酸0.2 ml ， 然后加高氯酸0.8 ml， 60 ℃水浴中加熱15 min， 取出， 迅速流水冷卻（或放在冰水）5 min，再加入冰醋酸5.0 ml，搖勻， 在400～600 nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描[3]。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 將

貯備液稀釋5倍，分別吸取0、100、200、300、400和500 μl 置于具塞比色管中，同“1.3”試驗(yàn)方法，在UV1801型紫外-可見分光光度計(jì)上，選擇540 nm波長(zhǎng)測(cè)定上述溶液的吸光度。

1.5 樣品中總皂苷的提取及含量測(cè)定

精密稱量霞草根粉1 g，用石油醚索氏回流，脫脂完全后，取出樣品，揮干有機(jī)溶劑，樣品中加入20 ml 甲醇，40 min/次，超聲提取3次，合并提取液并減壓抽濾，水浴除去甲醇，用少量去離子水溶解提取物，離心，取上層清液，用20 ml水飽和正丁醇萃取3次，合并正丁醇層，用水浴除去正丁醇，用少量甲醇溶解提取物，并定容至10 ml，得到霞草根樣品溶液。吸取霞草根樣品溶液600 μl，放入具塞比色管中，水浴除去甲醇，按“1.3”試驗(yàn)操作方法，測(cè)得樣品溶液的吸光度。

1.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

吸取霞草樣品溶液600 μl，放入具塞比色管中，水浴除去甲醇，按“1.3”試驗(yàn)操作方法， 每隔10 min 測(cè)定1次吸光度。

1.7 重復(fù)性試驗(yàn)

精密吸取霞草樣品溶液600 μl，共5份，水浴除去甲醇， 按“1.3”試驗(yàn)操作方法，測(cè)定吸光度。

1.8 加樣回收率試驗(yàn)

分別量取1 ml樣品溶液，加入適量齊墩果酸， 按“1.3”試驗(yàn)操作，分別測(cè)定其濃度， 計(jì)算其回收率。

1.9 霞草提取液去污能力的初步測(cè)試

1.9.1 霞草根提取液制備。

稱取20 g干燥的霞草根樣品，放在100 ml去離子水中，用功率為100 W的超聲波提取40 min，離心，取上清液，獲得純天然的霞草提取原液。將霞草根提取原液按1∶1、1∶3、1∶5、1∶10稀釋。

1.9.2 去污力測(cè)試。將1 ml花生油（魯花）放入盛有3 ml去離子水的比色管中，各取上述稀釋的霞草提取液1 ml，分別加入比色管中，用力振搖2 min，觀察溶液的乳化起泡程度，以此判斷霞草各提取液的去污力。

2 結(jié)果與分析

2.1 最佳檢測(cè)波長(zhǎng) 由圖1可見，齊墩果酸標(biāo)準(zhǔn)溶液在540 nm處有最大吸收， 樣品溶液在530 nm處有最大吸收，經(jīng)過比較，選擇540 nm波長(zhǎng)為宜。3 結(jié)論

該試驗(yàn)對(duì)霞草根中總皂苷含量進(jìn)行測(cè)定并對(duì)其水浸液的去污能力進(jìn)行了分析，以期為以后霞草根洗滌用品的開發(fā)研制提供參考依據(jù)。試驗(yàn)確定可用齊墩果酸作為標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)波長(zhǎng)確定為540 nm，標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為Y=0.040X-0.048（R2=0.996），穩(wěn)定性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.01%，重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.67%，樣品中總皂苷含量為2.13 mg/g，平均加標(biāo)回收率99.99%。對(duì)霞草水提取液的去污能力進(jìn)行初步測(cè)試，得出1∶3的稀釋液有較強(qiáng)的去污能力。

參考文獻(xiàn)

[1]

馬成亮. 霞草的利用價(jià)值[J]. 特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)植物，2003，6（7）：41.

[2] 武海艷，安琨，李海波，等. 霞草化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J].食品與藥品，2011，13（5）：213-216.

[3] 覃勇榮，劉欣，黃光兵，等.無(wú)患子總皂苷提取工藝條件優(yōu)化及天然洗滌劑研制[J]. 北方園藝，2013（16）：143-148.