子宮內(nèi)膜樣腺癌中COX—2和PTEN蛋白表達(dá)及臨床意義

摘要：目的 檢測COX-2蛋白、PTEN蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)，探討二者與組織分級和臨床分期的關(guān)系以及在子宮內(nèi)膜樣腺癌轉(zhuǎn)移浸潤中的意義。方法 用免疫組織化學(xué)技術(shù)和圖像分析法檢測150例子宮內(nèi)膜樣腺癌、150例正常子宮內(nèi)膜組織中COX-2蛋白和PTEN蛋白表達(dá)。結(jié)果 PTEN蛋自在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的陽性表達(dá)率為32.7%，與正常子宮內(nèi)膜組織（86.0%）比較差異顯著（P<0.05）；COX-2蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的陽性表達(dá)率為74.7%，與正常子宮內(nèi)膜組織（27.3%）相比差異顯著（P<0.05）；PTEN蛋白與子宮內(nèi)膜樣腺癌的組織學(xué)分級及肌層浸潤深度有關(guān)（P<0.05）；COX-2蛋白與子宮內(nèi)膜樣腺癌的組織學(xué)分級及淋巴轉(zhuǎn)移度有關(guān)（P<0.05）。COX-2蛋白陽性表達(dá)與COX-2蛋白陽性表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.742，P<0.01）。結(jié)論 COX-2蛋白、PTEN蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中均異常表達(dá)，結(jié)合臨床病理參數(shù)可作為預(yù)測子宮內(nèi)膜樣腺癌惡性程度及預(yù)后判定的客觀指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：子宮內(nèi)膜樣腺癌；COX-2；PTEN；免疫組織化學(xué)

環(huán)氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）是花生四烯酸轉(zhuǎn)化成前列腺素過程中的重要限速酶。研究表明COX-2在包括惡性血液病在內(nèi)的多種腫瘤中表達(dá)增加，并認(rèn)為其與腫瘤細(xì)胞的增殖、黏附及腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[1]。PTEN基因位于染色體10q23.3，是迄今發(fā)現(xiàn)的第一個具有磷酸酶活性的抑癌基因。目前研究發(fā)現(xiàn)PTEN參與了細(xì)胞增殖、周期進(jìn)程和信號傳導(dǎo)通路的調(diào)控，在腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移中起非常重要的作用[2]。子宮內(nèi)膜癌是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤，以來源于子宮內(nèi)膜腺體的腺癌最常見，其致癌機(jī)制與癌基因、抑癌基因和DNA損傷修復(fù)基因的異常表達(dá)有關(guān)。近年來有關(guān)COX-2、PTEN在某些腫瘤發(fā)生發(fā)展中起到的作用已引起人們注意，但在子宮內(nèi)膜癌中研究較少。本研究檢測COX-2、PTEN在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的表達(dá)情況，分析其與臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性，探討兩者表達(dá)狀況與病情進(jìn)展及預(yù)后等的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 150例子宮內(nèi)膜樣腺癌組織來自 本院2008年1月～2010年12月進(jìn)行手術(shù)治療并經(jīng)病理組織學(xué)檢查確診的手術(shù)標(biāo)本。參照國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟分期標(biāo)準(zhǔn)：I期69例，Ⅱ期35例，Ⅲ期46例；其中高分化（G1）48例，中分化（G2）53例，低分化（G3）49例。所有標(biāo)本均為原發(fā)性腫瘤，術(shù)前未接受放化療或激素治療。患者年齡29.4～65.1歲，平均53.9歲。同時選取本院經(jīng)手術(shù)切除的病理診斷為子宮內(nèi)膜單純性增生的30例子宮內(nèi)膜組織進(jìn)行對照研究。

1.2免疫組織化學(xué)染色 組織蠟塊行4μm厚連續(xù)切片，石蠟切片常規(guī)脫蠟。采用鏈霉素抗生素蛋白-過氧化物酶（SP）法檢測COX-2及PTEN蛋白表達(dá)，以PBS代替一抗作為陰性對照。按照說明書進(jìn)行操作。采用雙盲閱片法進(jìn)行結(jié)果判定。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSSl 8.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行分析。各組間計數(shù)資料采用χ2檢驗，不滿足χ2檢驗應(yīng)用條件的采用Fisher精確概率計算法。計量資料兩組比較采用t檢驗，多組比較采用方差分析，兩兩比較采用snk-q檢驗。相關(guān)分析采用Spearman等級相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 COX-2和 PTEN蛋白在不同子宮內(nèi)膜組織中表達(dá) COX-2蛋白在正常子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中陽性表達(dá)率分別為27.3%（41/150）、74.7%（112/150），呈下降趨勢，兩組間差異顯著（P<0.05）。PTEN蛋白在正常子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中陽性表達(dá)率分別為86.0%（129/150）、32.7%（39/150），呈升高趨勢，兩組間差異顯著（P<0.05）。

2.2 COX-2和PTEN蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜樣腺癌臨床病理特征的關(guān)系 COX-2蛋白與子宮內(nèi)膜樣腺癌的手術(shù)-病理分期、組織學(xué)分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05）；PTEN蛋白與子宮內(nèi)膜樣腺癌的手術(shù)一病理分期、組織學(xué)分級及肌層浸潤深度有關(guān)（P<0.05），

2.3 COX2和PTEN蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中表達(dá)的相關(guān)性 在150例子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中COX2蛋白陽性表達(dá)率為74.7%，而PTEN陽性表達(dá)率為32.7%，COX2蛋白陽性表達(dá)而PTEN陽性表達(dá)者占21例，二者同為陽性表達(dá)者占4例，二者同為陰性表達(dá)者占4例。經(jīng)非參數(shù)Spearman等級相關(guān)分析表明，二者呈負(fù)相關(guān)（r= -0.742，P<0.05）。

3 討論

PTEN作為抑癌基因，其編碼的蛋白具有脂質(zhì)磷酸酶和蛋白磷酸酶活性，發(fā)揮腫瘤抑制功能[3]，PTEN蛋白表達(dá)降低及缺失會影響其抑制腫瘤生長的功能。包括子宮內(nèi)膜樣腺癌在內(nèi)的多種腫瘤中PTEN基因存在不同程度的突變、缺失，導(dǎo)致PTEN蛋白的表達(dá)減低。

本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜樣腺癌患者中PTEN陽性表達(dá)明顯低于正常增殖期子宮內(nèi)膜中的表達(dá)，且病理分級越高PTEN表達(dá)越低。PTEN在淺肌層中的表達(dá)也明顯高于深肌層表達(dá)，預(yù)示可能與子宮內(nèi)膜樣腺癌進(jìn)展及預(yù)后不良密切相關(guān)。

COX-2作為一種誘導(dǎo)型酶，在包括子宮內(nèi)膜樣腺癌在內(nèi)的多種腫瘤中表達(dá)增加，具有如下作用：①刺激腫瘤細(xì)胞的增殖、抑制腫瘤細(xì)胞凋亡。COX-2過表達(dá)可上調(diào)細(xì)胞內(nèi)抗凋亡蛋白Bcl-2及Bcl-xL的表達(dá)，降低凋亡蛋白caspase-3/9活性；②促進(jìn)腫瘤內(nèi)血管形成；③促黏附和轉(zhuǎn)移：COX-2過表達(dá)可促進(jìn)金屬基質(zhì)蛋白酶-2表達(dá)增加，提高細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白黏附能力，增加腫瘤細(xì)胞的侵襲力[4]。

本研究結(jié)果表明，子宮內(nèi)膜樣腺癌患者中COX-2陽性表達(dá)明顯高于正常增殖期子宮內(nèi)膜中的表達(dá)，且COX-2陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜樣腺癌患者病理分級及是否轉(zhuǎn)移相關(guān)。病理分級越高，有淋巴轉(zhuǎn)移的患者COX-2表達(dá)明顯增加。

有關(guān)COX-2蛋白和 PTEN蛋白在腫瘤組織中表達(dá)的相關(guān)性已有文獻(xiàn)對其進(jìn)行報道。研究發(fā)現(xiàn)大腸癌細(xì)胞中COX-2蛋白表達(dá)與PTEN蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。成志勇等[6]對白血病相關(guān)特異基因的研究顯示PTEN可能通過抑制COX-2表達(dá)從而抑制白血病細(xì)胞增殖、黏附功能。COX-2蛋白陽性表達(dá)與PTEN蛋白陽性表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。本研究結(jié)果提示兩者與子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)生、發(fā)展轉(zhuǎn)移過程有關(guān)。其可能機(jī)制如下：①腫瘤發(fā)展依靠血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）促進(jìn)腫瘤新生血管生成，COX-2原癌基因的激活能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞分泌VEGF[5]， PTEN則通過血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、成纖維細(xì)胞因子（bFGF）抑制腫瘤生成血管。② PTEN蛋白通過其細(xì)胞表面作用靶點（PIP3/FAK）表達(dá)特性可直接作用于COX-2蛋白受體，阻斷COX-2蛋白的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，減少VEGF釋放。③COX-2蛋白擴(kuò)增和過度表達(dá)會導(dǎo)致正常細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，PTEN蛋白抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，調(diào)節(jié)細(xì)胞對促凋亡因子的敏感性。因此，聯(lián)合檢測COX-2蛋白和 PTEN蛋白可作為預(yù)測子宮內(nèi)膜樣腺癌的惡性程度的指標(biāo)。

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編輯/王敏