NT—proBNP與BNP測(cè)定結(jié)果的關(guān)系

摘要：目的 以Triage BNP為參照，確定NT-proBNP與BNP之間測(cè)定結(jié)果的關(guān)系。方法 37份標(biāo)本同時(shí)測(cè)定BNP和NT-proBNP，做相關(guān)性分析。結(jié)果 ①BNP（x）與NT-proBNP（y）的直線回歸方程為y=3.3128x + 83.031，r=0.9685。② 按照BNP的參考值<100 pg/mL，計(jì)算相應(yīng)的NT-proBNP為<414.31 pg/mL。結(jié)論 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)自己建立NT-proBNP不同方法的參考值。

關(guān)鍵詞：B型鈉尿肽， N末端B型鈉尿肽原

B型鈉尿肽（BNP）及N末端B型鈉尿肽原（NT-proBNP）是由心臟分泌的兩種肽激素。N末端腦鈉肽（NT-proBNP）是腦鈉肽原被酶切后的N 端片段，它是由76個(gè)氨基酸組成的肽類(lèi)激素，分子量為8 500；是由心肌細(xì)胞合成和釋放的，可作為早期心功能損害的標(biāo)志物。人的心肌細(xì)胞首先合成含 108個(gè)氨基酸的B型鈉尿肽原（pro-B.typnatriuretic peptide，proBNP），之后在 內(nèi)切酶的作用下切割為含 76個(gè)氨基酸的 N末端 B型鈉尿肽原（MW8 500）和含 32個(gè)氨基酸的c端多肽 BNP（MW 3 500），二者來(lái)源相同并且等摩爾分泌。因此從理論上講，無(wú)論是檢測(cè) BNP還是 NT-proBNP，都可以反映體內(nèi)心肌細(xì)胞受到的容量負(fù)荷和壓力負(fù)荷的大小。目前國(guó)內(nèi)BNP和NT-proBNP主要應(yīng)用于心衰的診斷、鑒別診斷及預(yù)后分析，在這些方面的臨床應(yīng)用研究及文獻(xiàn)報(bào)道[1，2]已有很多，大家普遍認(rèn)識(shí)到BNP和NT-proBNP是較好的心衰診斷標(biāo)志物，可以對(duì)慢性心衰患者進(jìn)行危險(xiǎn)分層[3]和預(yù)后評(píng)估[4，5]，能夠?qū)粑щy的病因是心源性還是肺源性進(jìn)行鑒別[6，7]。我單位于2005年引進(jìn)了由Biosite公司生產(chǎn)的Triage BNP檢測(cè)板，它是美國(guó)FDA第一個(gè)批準(zhǔn)的BNP檢測(cè)方法。但由于人體內(nèi)BNP的半衰期為22 min，體外穩(wěn)定性差；NT-proBNP的半衰期為120 min，在體外穩(wěn)定，有利于實(shí)驗(yàn)室測(cè)定，近年來(lái)我單位又引進(jìn)了美國(guó)PRINSTON公司生產(chǎn)的StatusFirst？ CHF，NT-proBNP檢測(cè)板。由于NT-proBNP在心衰患者中的濃度遠(yuǎn)高于BNP，測(cè)定結(jié)果也遠(yuǎn)高于BNP，臨床醫(yī)生已習(xí)慣了用BNP的測(cè)定結(jié)果判斷患者的病情，面對(duì)NT-proBNP的測(cè)定結(jié)果不能很好地判斷患者的病情。本文就以Triage BNP為參照，確定NT-proBNP與BNP之間測(cè)定結(jié)果的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料 我院住院患者送檢的排除了肌酐異常的標(biāo)本，需要檢測(cè)BNP的EDTA抗凝全血共37份。男21例，女16例，年齡47～82歲。

1.2方法 對(duì)收到的標(biāo)本立即同時(shí)檢測(cè)BNP和NT-proBNP。BNP使用Biosite公司的Triage測(cè)試板，方法為雙抗夾心熒光免疫法，檢測(cè)范圍為5～5000pg/mL。NT-proBNP使用美國(guó)普林斯頓公司（PBM）的StatusFirst？ CHF測(cè)試板，方法為固相免疫層析法，檢測(cè)范圍為20～5000 pg/mL。對(duì)于檢測(cè)結(jié)果大于5000 pg/mL的標(biāo)本，用0.9%生理鹽水1：1稀釋后再測(cè)定。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，相關(guān)分析采用直線回歸分析法。

2結(jié)果

2.1結(jié)果見(jiàn)圖1，把BNP（x）與NT-proBNP（y）的檢測(cè)結(jié)果做相關(guān)性分析，由于BNP與NT-proBNP的檢測(cè)結(jié)果均為非正態(tài)分布，秩相關(guān)r=0.9459，經(jīng)t檢驗(yàn)，P<0.001，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。得到的直線回歸方程為y=3.3128x + 83.031。

2.2按照BNP的參考值<100 pg/mL，計(jì)算得相應(yīng)的NT-proBNP為<414.31 pg/mL

圖1 BNP與NT-proBNP的關(guān)系

3討論

人的心肌細(xì)胞首先合成含108個(gè)氨基酸的B型鈉尿肽原（pro-B- type natriuretic peptide，proBNP），之后在內(nèi)切酶的作用下切割為含76個(gè)氨基酸的N末端B型鈉尿肽原（NT-proBNP）和含32個(gè)氨基酸的C端多肽B型鈉尿肽（BNP），二者來(lái)源相同并且等摩爾分泌。目前BNP主要應(yīng)用于心衰的診斷、鑒別診斷及預(yù)后分析。BNP的測(cè)定方法經(jīng)歷了第一代放射免疫方法，第二代的酶聯(lián)免疫法測(cè)定，第三代的熒光免疫分析方法，和第四代的免疫化學(xué)發(fā)光方法。

雖然Biosite Triage BNP是床旁快速檢測(cè)（Point of Care Test， POCT）類(lèi)產(chǎn)品，屬于第三代熒光免疫分析技術(shù)，但它是美國(guó)FDA第一個(gè)批準(zhǔn)的BNP檢測(cè)產(chǎn)品。由于BNP檢測(cè)所使用的單克隆抗體針對(duì)的抗原表位稍有差異，也沒(méi)有統(tǒng)一的參考物質(zhì)，各廠家所用的免疫學(xué)檢測(cè)方法也不同，各系統(tǒng)間的BNP測(cè)定結(jié)果存在差異，尤其在高值時(shí)差異較大。但各BNP檢測(cè)系統(tǒng)均根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCLS）的指南，以最早的Biosite為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)各自的分析結(jié)果進(jìn)行了比較，因此在醫(yī)學(xué)決定水平附近具有較好的一致性。

NT-proBNP檢測(cè)現(xiàn)在最佳的方法是電化學(xué)發(fā)光技術(shù)，本文所采用的方法也是屬于POCT類(lèi)產(chǎn)品。由于NT-proBNP采用的是針對(duì)相同氨基酸殘基的多克隆抗體，不同廠家的系統(tǒng)間測(cè)定結(jié)果也存在差異。目前國(guó)內(nèi)NT-proBNP主要應(yīng)用于心衰的診斷、鑒別診斷及預(yù)后分析，在這些方面的臨床應(yīng)用研究及文獻(xiàn)報(bào)道也有很多，大家普遍認(rèn)識(shí)到NT-proBNP是較好的心衰診斷標(biāo)志物，可以對(duì)慢性心衰患者進(jìn)行危險(xiǎn)分層和預(yù)后評(píng)估，能夠?qū)粑щy的病因是心源性還是肺源性進(jìn)行鑒別。

本文得到的BNP（x）與NT-proBNP（y）關(guān)系y = 3.3128x + 83.031與 Maisel[8]的結(jié)果NT-proBNP水平較與其相伴隨的BNP高4倍是相近的，

本文以BNP為參照計(jì)算得到的NT-proBNP參考值為<414.31 pg/mL，但是，NT-proBNP的說(shuō)明書(shū)給出的參考值為75歲以下患者：125 pg/mL，75歲和75以上患者：450 pg/mL 。與計(jì)算出的結(jié)果有很大差別。雖然此實(shí)驗(yàn)由于時(shí)間和經(jīng)濟(jì)因素未做年齡分組，但在37份標(biāo)本中，75歲及以上患者的標(biāo)本只有6份，占1/6，不足以引起如此大的差別。可能是由于說(shuō)明書(shū)給出的參考值是北美地區(qū)人群的參考值，與我國(guó)人群的參考值是有差異的。史曉敏[9]等人做的北京地區(qū)的NT-proBNP參考范圍調(diào)查結(jié)果顯示中國(guó)人的參考范圍：≤60歲，男性>83.72 pg/mL，女性<131.6 pg/mL；>60歲，男性<158.17 pg/ml，女性<205.54 pg/ml，明顯低于歐美人群，這說(shuō)明除了年齡和性別影響NT-proBNP的水平外，種族也是一個(gè)十分重要的影響因素。NT-proBNP的參考值在不同年齡組和不同性別都有顯著差異，女性組高于男性組；還隨年齡的增長(zhǎng)數(shù)值會(huì)逐漸上升，與國(guó)內(nèi)報(bào)道相近[10]。

本文得到的參考值明顯高于歐美人群，但史曉敏[9]等得到的參考值明顯低于歐美人群，這應(yīng)該是使用的方法不同造成的，本文的方法是固相免疫層析法，而史曉敏的方法是電化學(xué)發(fā)光法，這也同樣印證了NT-pro BNP不同測(cè)定系統(tǒng)之間是具有差異的。

本文得到的數(shù)值由于是以BNP為參考計(jì)算得出的數(shù)值，并不能稱(chēng)為參考值，只能是對(duì)我院醫(yī)生臨床診斷的輔助參考。我們檢驗(yàn)工作者應(yīng)在充分認(rèn)識(shí)二者生物學(xué)特性的基礎(chǔ)上，正確開(kāi)展其檢測(cè)工作，并指導(dǎo)臨床應(yīng)用。 建議有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)自己建立NT-proBNP不同方法的參考值。

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編輯/許言