無(wú)花果葉中芳香物質(zhì)的提取工藝研究

陸進(jìn)等

3山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，山東濟(jì)南250100）

摘要：采用不同方法對(duì)當(dāng)年采集的新鮮無(wú)花果葉中芳香族成分進(jìn)行萃取，并利用HPLC技術(shù)對(duì)無(wú)花果葉初提物、減壓蒸餾及真空干燥提取物主要成分進(jìn)行歸一化分析，以補(bǔ)骨脂素得率為指標(biāo)，探討了不同抽提方法的優(yōu)劣。正交試驗(yàn)表明，將無(wú)花果葉細(xì)碎20目，8倍乙醇索氏抽提，回流2次，每次提取2 h補(bǔ)骨脂素及乙醇抽提物得率較高。

關(guān)鍵詞：補(bǔ)骨脂素；索氏抽提；真空干燥

中圖分類號(hào)：S663.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2013）05-0100-03

無(wú)花果樹為多年生落葉灌木，其特殊的芳香味不吸引蟲害?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)花果葉提取物具有抗腫瘤、抗菌、降血糖、降血脂等多項(xiàng)藥理作用[1，2]。無(wú)花果葉揮發(fā)油中主要含酯和醇類，主要成分是香豆素類，其中補(bǔ)骨脂素占很大比例。無(wú)花果葉與果實(shí)提取物中的天然補(bǔ)骨脂素、佛手柑內(nèi)酯、苯甲醛已經(jīng)被證明具有明顯的抗癌活性，目前已作為抗腫瘤治療輔助藥物應(yīng)用于臨床[3]。

水蒸氣蒸餾是將水蒸氣通入不溶于水或難溶于水但具有一定揮發(fā)性的有機(jī)物質(zhì)中（無(wú)花果葉精油具有一定揮發(fā)性）， 使該有機(jī)物質(zhì)在低于100℃的溫度下隨水蒸氣一起蒸餾出來(lái)， 再經(jīng)進(jìn)一步分離獲得較純物質(zhì)。

有機(jī)溶劑提取法是用適宜的揮發(fā)性有機(jī)溶劑直接浸泡無(wú)花果葉，經(jīng)滲透、溶解、分配、擴(kuò)散等一系列物理過(guò)程，將精油從無(wú)花果葉中提取出來(lái)。用有機(jī)溶劑提取無(wú)花果葉精油可同時(shí)將低沸點(diǎn)和高沸點(diǎn)組分提取出來(lái)，從而減少芳香油成分的損失，所得精油的香氣更接近天然無(wú)花果的香氣，得率也更高。

本試驗(yàn)分別用水和乙醇對(duì)無(wú)花果葉進(jìn)行初提，然后分別用乙酸乙酯進(jìn)行減壓蒸餾和用乙醇真空干燥進(jìn)一步提取香氣的有效成分，并借助高效液相色譜對(duì)不同提取方法下無(wú)花果葉中補(bǔ)骨脂素的含量進(jìn)行了測(cè)定，最終確定了最佳提取工藝條件。

1試驗(yàn)材料、設(shè)備及主要工藝流程

11試驗(yàn)材料

以當(dāng)年從常州日升生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司無(wú)花果基地采集的新鮮無(wú)花果葉為試材。

12主要設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室用提取罐、旋轉(zhuǎn)真空濃縮器、高效液相色譜。

13工藝流程

新鮮無(wú)花果葉→清洗→剪切→殺青烘干→破碎→提取→濃縮。

2試驗(yàn)方法

將新鮮無(wú)花果葉清洗后剪切成2 cm寬的葉條，置于70～75℃烘箱干燥4 h，冷卻后備用。

21無(wú)花果葉初提物提取

211水蒸氣蒸餾提取1 kg無(wú)花果葉粉碎后水蒸氣蒸餾，按100～200 kg/h 通入蒸氣， 經(jīng)蒸氣夾帶，精油與蒸氣混合蒸出， 通過(guò)冷凝器冷凝變成油水混合液流出。餾出液溫度不高于40℃，得200 g初提物。

212乙醇蒸餾提取200 g無(wú)花果葉粉碎后用95%乙醇1 600 ml回流提取2 h。

22初提物中芳香物質(zhì)的再提取

221乙酸乙酯萃取將水蒸氣蒸餾所得初提物繼續(xù)用乙酸乙酯萃取，體積比（初提物 ∶乙酸乙酯）為2 ∶1。無(wú)水硫酸鈉處理后，用減壓蒸餾的方法進(jìn)一步抽提，溫度50～60℃。

222乙醇萃取將乙醇初提物每次加入1 L 95%乙醇，在80℃下蒸餾2 h，蒸2次。將抽提液采用旋轉(zhuǎn)真空濃縮器真空濃縮，得到的粘稠狀物質(zhì)真空干燥8～12 h，濃縮溫度、干燥溫度均設(shè)定為45℃。

23芳香物質(zhì)的化學(xué)成分分析

采用GC/MS對(duì)無(wú)花果葉芳香物質(zhì)化學(xué)成分進(jìn)行分析。

24不同方法提取的抽提物中補(bǔ)骨脂素的含量測(cè)定

采用高效液相色譜法的測(cè)定。具體步驟如下。

241標(biāo)準(zhǔn)樣液制備配制補(bǔ)骨脂素標(biāo)準(zhǔn)溶液：補(bǔ)骨脂素200 mg溶解，轉(zhuǎn)移至500 ml容量瓶中定容，得到04 mg/ml的補(bǔ)骨脂素標(biāo)準(zhǔn)樣液。

242供試品溶液供試品溶液Ⅰ：水蒸氣蒸餾得到的初提物；供試品溶液Ⅱ：乙酸乙酯減壓蒸餾萃取得到的抽提物；供試品溶液Ⅲ：乙醇蒸餾萃取得到的抽提物。

243結(jié)果處理記錄峰面積，以補(bǔ)骨脂素標(biāo)準(zhǔn)樣液的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出每個(gè)供試品溶液中補(bǔ)骨脂素的濃度。