乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理因素與BRCA1和BRCA2表達的相關(guān)性分析

姚江等

摘 要 目的：探討乳腺上皮中BRCA1和BRCA2的表達與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的臨床病理特征的相關(guān)性。方法：應(yīng)用免疫組化S-P法檢測BRCA1、BRCA2在33例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組和31例乳腺良性病變組的表達情況，并聯(lián)合ER、PR、CerBb-2的表達，分析它們與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的年齡、腫塊大小、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等特征之間的關(guān)系。結(jié)果：①BRCA1的陽性表達與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的年齡、分化程度、是否絕經(jīng)均有顯著相關(guān)性（P<0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤大小無顯著相關(guān)性（P>0.05）。BRCA2的陽性表達與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫塊大小、是否絕經(jīng)均有顯著相關(guān)性（P<0.05），與分化程度無顯著相關(guān)性（P>0.05）。②BRCA1、BRCA2的表達與CerBb-2的表達均呈顯著的負相關(guān)（r=-0.355，-0.517，P<0.05）。結(jié)論：BRCA1和BRCA2的突變在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，主要通過轉(zhuǎn)錄途徑作用于CerBb-2，BRCA1和BRCA聯(lián)合CerBb-2可作為評價乳腺癌生物學(xué)特性和預(yù)后的潛在指標(biāo)。

關(guān)鍵詞 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌 BRCA1 BRCA2 免疫組織化學(xué)

近年，我國乳腺癌發(fā)病情況呈上升趨勢，特別是在一些經(jīng)濟發(fā)達地區(qū)和大城市，乳腺癌的發(fā)病率已居女性惡性腫瘤的第1位或第2位[1]。本實驗運用免疫組織化學(xué)染色法（IHC）S-P法檢測乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織及乳腺良性病變組織中BRCA1、BRCA2的表達，比較BRCA1、BRCA2在兩組之間的差異，并聯(lián)合ER、PR、CerBb-2分析它們與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的年齡、腫塊大小、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等特征之間的關(guān)系。

資料與方法

2005～2009年收治乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者33例，均為漢族女性，年齡37～77歲；所有乳腺癌病例無1級或2級親屬患乳腺癌，術(shù)前均未行放療、化療及內(nèi)分泌治療。乳腺良性病變組織31例（包括纖維腺病、纖維囊性乳腺病、小葉增生病變等），均為漢族女性，年齡26～67歲。

主要試劑及儀器：BRCA1、BRCA2山羊抗人多克隆抗體均，S-P法免疫組化試劑盒，全自動脫水機、染色機、免疫組化儀。

實驗方法：所有標(biāo)本術(shù)后經(jīng)10%福爾馬林固定，石蠟包埋、制備4μm連續(xù)切片，供常規(guī)染色及免疫組化染色。BRCA1、BRCA2工作濃度1：200，采用免疫組化S-P法檢測兩組BRCA1、BRCA2的表達，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。所有切片在光學(xué)顯微鏡下進行觀察、拍照，由專業(yè)病理醫(yī)師讀片。

結(jié)果判定：陽性染色細胞：染色呈均勻棕黃色顆粒，灶性及散在分布，背景清晰。BRCA1、BRCA2的陽性表達位于細胞核和細胞漿。陽性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：BRCA1、BRCA2以細胞核和細胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性表達，陽性細胞數(shù)<10%“-”，10%～25%“+”，25%～75%“++”，>75%“+++”。

分析指標(biāo)：回顧分析33例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者和31例乳腺良性病變患者的基本臨床資料，包括年齡、腫瘤大小、分化程度、腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤的臨床分級（參照2003年國際抗癌聯(lián)盟（UICC）和美國腫瘤聯(lián)合會（AJCC）分期標(biāo)準(zhǔn)）及ER、PR、CerBb-2的表達。分析BRCA1、BRCA2的表達與ER、PR和CerBb-2表達的相關(guān)性，以及與腫瘤臨床特征的相關(guān)性。

統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS16.0軟件包完成統(tǒng)計學(xué)分析，各種構(gòu)成的比較采用X2檢驗，P<0.05表示明顯具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié) 果

BRCA1、BRCA2在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組和乳腺良性病變組的表達：乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組和乳腺良性病變組經(jīng)染色，BRCA1和BRCA2均有特異性的陽性表達；良性病變組織的表達部位主要在細胞核，乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織表達部位不僅限于細胞核，在部分細胞胞漿也有明顯表達。乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組BRCA1陽性表達率64.5%，乳腺良性病變組陽性表達率63.6%，兩組間無顯著差異（X2=0.05，df=1，P>0.05）。

乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組臨床病理特征與BRCA1、BRCA2表達量的關(guān)系，見表1。

乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組臨床病理特征與BRCA1、BRCA2陽性表達率的關(guān)系，見表2、3。

乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組ER、PR、CerBb-2與BRCA1、BRCA2的關(guān)系，見表4。

討 論

本研究顯示，BRCA1和BRCA2在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者組與乳腺良性病變組兩組間的陽性表達率無差異[2，3]，說明BRCA1和BRCA2作為乳腺癌的預(yù)測指標(biāo)是不準(zhǔn)確的。BRCA1和BRCA2在表達量與在臨床特征的各指標(biāo)間無顯著差異，但是乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者BRCA1的陽性表達率在50歲以上年齡的患者癌組織中有較低的表達，并且BRCA1的陽性表達率隨著腫瘤組織的分化程度的增加反而顯著的降低；絕經(jīng)前后的患者也呈明顯的差異。

BRCA2的陽性表達率在大于50歲年齡的患者癌組織中有較低的表達；在淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移的瘤組織中也有顯著的高表達；隨腫塊體積的增加，BRCA2的陽性表達率顯著性的降低；絕經(jīng)前也明顯高于絕經(jīng)后的表達。僅與分化程度無明顯相關(guān)性。證明了這兩個基因調(diào)控的復(fù)雜性和系統(tǒng)性。