高遷移率蛋白1（HMGB1）在宮頸癌中表達(dá)及其意義

劉變利　郭霞

[摘 要] 目的：探討高遷移率蛋白1（HMGB1）在宮頸癌中表達(dá)及其意義。方法：采用免疫組化法檢測(cè)HMGB1在宮頸癌組織及正常宮頸組織中表達(dá)，并結(jié)合臨床、病理資料進(jìn)行分析。結(jié)果：HMGB1在正常宮頸組、宮頸癌組中強(qiáng)陽性表達(dá)率分別為0%、81.48%，兩組差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；淋巴轉(zhuǎn)移患者及無轉(zhuǎn)移患者HMGB1強(qiáng)陽性表達(dá)率分別為100%、75%，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）； 不同宮頸癌分期、分化程度、年齡組HMGB1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：HMGB1在宮頸癌組織中呈過表達(dá)，并與淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

[關(guān)鍵詞] 高遷移率蛋白1；宮頸癌；免疫組織化學(xué)

中圖分類號(hào)：R737.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-5200（2015）06-086-03

DOI：10.11876/mimt201506034

[Abstract] Objective：To explore the expression of HMGB1 in cervical cancer and its significance. Method： To detect the expression of HMGB1 in cervical cancer and normal cervical tissue by immunohistochemistry. Results：The positive expression rate of HMGB1 in normal cervix was 0%， while the expression in cervical cancer was higher significantly （81.48%） （P<0.05）. The positive-expression rate was much higher in lymphonode metastasis （100%） than that in non-metastasis group （75%） （P<0.05）. The difference was not statistically significant between age， clinical stages and degree of differentiati. Conclusions：HMGB1 was over-expression in cervical cancer， and it was significantly related to the metastases to local lymph nodes.

[Key words] HMGB1；cervical cancer；immunohistochemistry

HMGB1（高遷移率蛋白1）是與染色體結(jié)合的非組蛋白成分之一，功能復(fù)雜，可參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞分化、遷移、增殖、凋亡及神經(jīng)生長等，并在肝癌、結(jié)腸癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中過表達(dá)[1-3]。研究發(fā)現(xiàn)，HMGB1與腫瘤發(fā)生浸潤及淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[4-5]。本研究采用免疫組化檢測(cè)Ia-IIb宮頸鱗狀細(xì)胞浸潤癌與正常宮頸組織中HMGB1表達(dá)，旨在探討其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇2012～2014年27例行廣泛子宮切除及盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)宮頸癌患者，年齡32～65歲，平均年齡（49.07±8.9）歲。所有患者術(shù)前均未經(jīng)放化療，術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)均為原發(fā)性宮頸鱗狀細(xì)胞癌。FIGO臨床分期：Ia期1例；Ib期7例；IIa期11例；IIb期8例。分化程度：低分化9例；中高分化18例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：伴淋巴轉(zhuǎn)移7例；無淋巴轉(zhuǎn)移20例。同時(shí)選取5例因子宮肌瘤或子宮腺肌征行子宮全切術(shù)，術(shù)后病檢回示為正常宮頸鱗狀上皮組織者作為對(duì)照。所有患者臨床資料完整，病理資料由病理科專業(yè)醫(yī)師指導(dǎo)，實(shí)驗(yàn)標(biāo)本選取典型病灶，進(jìn)行石蠟連續(xù)切片觀察，切片厚度4μm。

1.2 方法

采用免疫組織化學(xué)SP法。鼠抗人HMGB1單克隆抗體為香港abcam公司產(chǎn)品，HMGB1，一抗工作濃度1︰200，二抗為福建邁新有限公司產(chǎn)品。按說明書操作，DAB顯色，蘇木精復(fù)染，脫水、透明和封固。以PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。HMGB1陽性主要表達(dá)于細(xì)胞漿，部分細(xì)胞核中也有一定程度表達(dá)。以胞漿內(nèi)出現(xiàn)淡黃色至棕黃色顆粒為標(biāo)準(zhǔn)，依據(jù)棕色反應(yīng)陽性強(qiáng)度和面積綜合評(píng)定結(jié)果，對(duì)每張切片陽性細(xì)胞強(qiáng)度按無著色、淡黃色、棕黃色和棕褐色分別評(píng)為0、1、2、3分：陽性著色面積按無著色、著色面積小于1/3、1/3-2/3、≥2/3分別評(píng)為0、1、2、3分。根據(jù)兩項(xiàng)評(píng)分之和判斷結(jié)果。0～3分判斷為陰性或弱陽性，≥4分判斷為強(qiáng)陽性表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，因總病例數(shù)小于40例，計(jì)數(shù)資料采用Fisher確切概率法進(jìn)行檢驗(yàn)， P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

如圖1所示，HMGB1主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞漿。27例患者中強(qiáng)陽性22例，強(qiáng)陽性表達(dá)率為81.48%。而在正常宮頸組織內(nèi)表達(dá)為陰性或弱陽性，強(qiáng)陽性表達(dá)率為0%（見圖2）。對(duì)兩組平均積分行確切概率法分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

本實(shí)驗(yàn)中7例宮頸癌伴淋巴轉(zhuǎn)移患者，HMGB1均呈強(qiáng)陽性表達(dá)，強(qiáng)陽性表達(dá)率為100%，而在淋巴轉(zhuǎn)移陰性宮頸癌患者中，強(qiáng)陽性表達(dá)率為75%，兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

11例年齡小于45歲宮頸癌患者中，7例表達(dá)為強(qiáng)陽性，強(qiáng)陽性率為63.64%，而在16例≥45歲病例中，15例表達(dá)為強(qiáng)陽性，強(qiáng)陽性百分率為93.75%，兩組間差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

隨著分子生物學(xué)及基因工程發(fā)展，從蛋白水平研究宮頸癌腫瘤生物學(xué)行為越來越引起人們重視。HMGB1是一種非組蛋白染色體結(jié)合蛋白，廣泛分布于心、肝、腎等組織中[6]。既往實(shí)驗(yàn)表明，HMGB1及其受體表達(dá)水平與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[7-8]，HMGB1可通過抑制巨噬細(xì)胞增殖或促進(jìn)其凋亡，降低巨噬細(xì)胞數(shù)目，減弱其在抗腫瘤轉(zhuǎn)移中作用，抑制機(jī)體抗腫瘤免疫機(jī)制有效發(fā)揮[9]。Guo等[10]應(yīng)用免疫組化法研究胃癌組織中HMGB1表達(dá)，結(jié)果顯示，76例胃癌組織標(biāo)本中，HMGB1主要表達(dá)于胞核，多數(shù)呈強(qiáng)陽性表達(dá)，與正常組相比具有顯著性差異，其中低分化組強(qiáng)陽性表達(dá)率明顯高于高分化組，而在患者年齡、手術(shù)分期、性別、淋巴轉(zhuǎn)移等方面，兩組表達(dá)無明顯差異。龐曉奡等[11]通過研究正常宮頸、宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌組織中HMGB1表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)宮頸癌中HMGB1表達(dá)水平明顯上調(diào)，并與FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)。Xue等[12]

李妍等[13]發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者中HMGB1表達(dá)水平與淋巴轉(zhuǎn)移狀態(tài)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、手術(shù)分期、復(fù)發(fā)等密切相關(guān)，可作為評(píng)價(jià)預(yù)后及復(fù)發(fā)重要指標(biāo)之一，并可通過聯(lián)合應(yīng)用SCCA、CYFRA21-1等提高診斷敏感性及特異性，本實(shí)驗(yàn)中亦發(fā)現(xiàn)宮頸癌伴淋巴轉(zhuǎn)移患者中HMGB1強(qiáng)陽性表達(dá)率明顯高于非淋巴轉(zhuǎn)移組，進(jìn)一步提示HMGB1可能與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移有關(guān)，可作為患者預(yù)后及生存率重要指標(biāo)，也是評(píng)估患者術(shù)后是否予以后續(xù)放化療治療依據(jù)?？笻MGB1表達(dá)亦有望成為抑制腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移方法之一。但本研究結(jié)果顯示HMGB1表達(dá)水平與患者年齡、臨床分期無明顯相關(guān)性，低分化及中高分化組宮頸癌組織中HMGB1強(qiáng)陽性表達(dá)率分別為88.89%及77.78%，雖然兩組間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但低分化組HMGB1過表達(dá)率較中高分化組有所增加。

本實(shí)驗(yàn)證實(shí)HMGB1在宮頸癌組織中呈過表達(dá)，并與淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)?？笻MGB1表達(dá)亦有望成為抑制腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移方法之一。

參 考 文 獻(xiàn)

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