• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    藤甲酰苷緩釋片的處方優(yōu)化及釋藥機(jī)制研究

    2013-03-06 08:29:05李文軍陳燁李彤旻王洋劉忠忱鄧晶晶遼寧大學(xué)藥學(xué)院沈陽(yáng)110036
    關(guān)鍵詞:釋藥甲酰量瓶

    李文軍,陳燁,李彤旻,王洋,劉忠忱,鄧晶晶(遼寧大學(xué)藥學(xué)院,沈陽(yáng) 110036)

    藤甲酰苷緩釋片的處方優(yōu)化及釋藥機(jī)制研究

    李文軍,陳燁,李彤旻,王洋,劉忠忱,鄧晶晶(遼寧大學(xué)藥學(xué)院,沈陽(yáng) 110036)

    目的 制備藤甲酰苷緩釋片并探討其藥物釋放機(jī)制。方法 以羥丙基甲基纖維素(HPMC)為緩釋材料、乙基纖維素(EC)為凝膠骨架材料,以及乳糖等為填充劑制備藤甲酰苷緩釋片,采用正交設(shè)計(jì)法進(jìn)行處方優(yōu)化。使用DDslover軟件擬合釋放曲線。結(jié)果 采用濕顆粒壓片法制得的骨架型藤甲酰苷緩釋片具有良好的緩釋效果。藤甲酰苷緩釋片的體外釋藥行為符合Higuchi 模型,是擴(kuò)散和溶蝕協(xié)同作用的結(jié)果,其釋藥過(guò)程用 Higuchi平面擴(kuò)散模式方程,相關(guān)系數(shù)r=0.999 3(1~12 h)。結(jié)論 本方法制備的藤甲酰苷緩釋片符合體外釋放度要求。

    藤甲酰苷;羥丙基甲基纖維素;緩釋片;釋藥機(jī)制

    藤甲酰苷(garcinia glycosides)為新實(shí)體化合物,體外藥理學(xué)研究表明,藤甲酰苷對(duì)白血病細(xì)胞株HL-60(TB)和黑色素瘤細(xì)胞株LOX IMVI具有明顯的抑制作用[1]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究顯示,其口服半衰期為2.2 h,代謝速度較快。多次連續(xù)給藥不利于臨床對(duì)患者的治療,同時(shí)產(chǎn)生很大的毒性,為研制出適合臨床治療的更為安全、有效、方便的抗腫瘤新藥,筆者采用親水性高分子材料羥丙基甲基纖維素(HPMC)為主要緩釋材料、乙基纖維素(EC)為骨架材料、乳糖為致孔劑、微晶纖維素為添加劑,制備藤甲酰苷親水凝膠骨架型緩釋片,并以不同時(shí)間點(diǎn)的累積釋放度為評(píng)價(jià)指標(biāo),確定具有較理想緩釋行為的優(yōu)化處方,制備了12 h服1次的藤甲酰苷緩釋片(60 mg·片-1),并對(duì)其藥物釋放機(jī)制進(jìn)行初步探討。

    1 儀器與試藥

    DP30型單沖壓片機(jī)(上海天凡藥機(jī)制造廠);RZC-6C2型藥物溶出儀(上海黃海藥物儀器有限公司);Waters 1525 Brnary 高效液相色譜儀/泵(美國(guó)Waters公司);Waters 2487 Dual λ高效液相色譜儀/檢測(cè)器(美國(guó)Waters公司);Lambda 25 型可見(jiàn)-紫外分光光度計(jì)(美國(guó)Perkin Elmer公司);數(shù)字顯示式恒溫干燥箱(余姚市遠(yuǎn)東數(shù)控儀器廠);電子天平(Mettler-Toledo Group)。

    藤甲酰苷對(duì)照品(遼寧大學(xué)藥學(xué)院研制,純度:99.5%,批號(hào):20100306);藤甲酰苷原料(遼寧大學(xué)藥學(xué)院研制,批號(hào):20100507);羥丙基甲基纖維素K4M(上???lè)康包衣技術(shù)有限公司,批號(hào):PD234600);乙基纖維素RT-N-10(山東瑞泰化工集團(tuán)有限公司,批號(hào):SH220590);硬脂酸鎂(廣州市升迅化工有限公司,批號(hào):20090822);微晶纖維素(上海為昌醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司,批號(hào):20090603);乳糖(哈爾濱制藥廠,批號(hào):20100320),其余試劑均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 緩釋片分析方法的建立

    2.1.1 紫外吸收波長(zhǎng)的選擇 稱(chēng)取藤甲酰苷對(duì)照品2.3 mg,用甲醇溶解并定容至濃度為46 μg·mL-1的溶液,以溶劑為空白,于200~600 nm內(nèi)進(jìn)行紫外掃描。結(jié)果表明,藤甲酰苷在254,331 nm處均有最大吸收。確定331 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

    2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    2.1.2.1 色譜條件 流動(dòng)相:0.5%磷酸水溶液-甲醇(13∶87);色譜柱:Waters ODS2 C18(4.6 mm× 250 mm,5 μm);柱溫:室溫;進(jìn)樣量:20 μL;檢測(cè)波長(zhǎng):331 nm;流速:1.0 mL·min-1。

    2.1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密稱(chēng)取藤甲酰苷對(duì)照品25.3 mg置于50 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,備用。精密吸取儲(chǔ)備液2.0,2.3,2.5,2.7,3.0 mL,分別置于25 mL量瓶中,稀釋至刻度,搖勻,進(jìn)樣。在331 nm處測(cè)定峰面積A,并以濃度c對(duì)吸收度A進(jìn)行線性回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:A=13 806.6c+7 887.6(r=0.999 8,n=5),結(jié)果表明,藤甲酰苷在40.48~60.72 μg·mL-1內(nèi)線性關(guān)系良好。

    2.1.2.3 釋放度測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密吸取50.6 μg·mL-1的對(duì)照品溶液10 mL于100 mL量瓶中,定容。精密吸取1,3,6,9,12 mL,分別置于25 mL量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,進(jìn)樣。在331 nm處測(cè)定峰面積A,并以濃度c對(duì)吸收度A進(jìn)行線性回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:A=19.98c+7 863.6(r=0.999 7,n=5),結(jié)果表明,藤甲酰苷在0.5~6.0 μg·mL-1內(nèi)線性關(guān)系良好。

    2.1.3 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密稱(chēng)取藤甲酰苷原料藥,并按處方量稱(chēng)取相應(yīng)比例的輔料,制備含藤甲酰苷約96 μg·mL-1的甲醇溶液,經(jīng)0.8 μm微孔濾膜濾過(guò),于0,2,4,6,12,24 h,按“2.1.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明,藤甲酰苷溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定,RSD為1.26%。

    2.1.4 回收率及精密度試驗(yàn) 分別按處方量精密稱(chēng)取相當(dāng)于含30 mg的藤甲酰苷量的輔料及80%,100%,120%的對(duì)照品各3份于量瓶中,用甲醇稀釋后經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò),按“2.1.2.1”項(xiàng)下色譜條件,計(jì)算回收率,結(jié)果表明,藤甲酰苷的平均回收率為100.22%,RSD為0.54%,本法在線性范圍內(nèi)高、中、低濃度的日內(nèi)精密度RSD分別為0.52%,0.40 %,0.51 %(n=3);高、中、低濃度的日間精密度 RSD分別為0.75%,0.50%,0.39% (n=3)。高、中、低濃度的回收率分別為(100.49± 0.98)%,(99.67±1.05)%,(100.59±0.65)%(n=3)。

    2.1.5 釋放度試驗(yàn) 取緩釋片,采用溶出度測(cè)定法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄ⅩC)[2]中的第一法,以900 mL 0.5%十二烷基硫酸鈉為釋放介質(zhì),溫度為(37.0±0.5)℃,轉(zhuǎn)速為100 r·min-1,依法操作,在規(guī)定的時(shí)間分別取樣,經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò),按“2.1.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,并按下式計(jì)算累積釋放度百分率Q,以時(shí)間為橫坐標(biāo),藥物的累積釋放度為縱坐標(biāo),繪制釋藥曲線圖。

    式中:C為釋放液的濃度(mg·mL-1);V為釋放介質(zhì)的體積(mL);D為稀釋倍數(shù);W為片劑的重量(g);F為藥物在制劑中的百分含量(%)。

    2.2 緩釋片的制備

    分別按處方量稱(chēng)取原料藥及輔料倍量稀釋法混合,連續(xù)3次過(guò)100目篩混合均勻,加適量無(wú)水乙醇制軟材,20目篩制粒,55 ℃干燥,30目篩整粒,用ψ 11 mm淺凹沖模單沖壓片機(jī)壓片,控制片子硬度在4.0~6.0 kg·cm-2之間。片重約為300 mg,含藥量約為60 mg·片-1。

    2.3 含量測(cè)定

    取“2.2”項(xiàng)下制備的藤甲酰苷緩釋片20片,研成粉末,精密稱(chēng)取約含藤甲酰苷30 mg的粉末,置于50 mL量瓶中,加入適量甲醇,超聲10 min,加入甲醇稀釋至刻度,所得溶液經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò),棄去初濾液,取續(xù)濾液2 mL置于25 mL量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,作為樣品溶液;精密稱(chēng)取藤甲酰苷約30 mg置于50 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,吸取配制的藤甲酰苷溶液2 mL于25 mL量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,作為對(duì)照品溶液。分別取樣品溶液和對(duì)照品溶液,按“2.1.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算樣品的含量。測(cè)定結(jié)果表明,含量測(cè)定符合要求。

    2.4 緩釋片的處方篩選及質(zhì)量評(píng)價(jià)

    2.4.1 正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)及最佳處方的確定 通過(guò)處方單因素和工藝單因素的考察,確定了主要輔料的種類(lèi)、規(guī)格、用量等,在此基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)篩選出最優(yōu)處方。以HPMC K4M作為親水性骨架緩釋材料,EC、乳糖為填充劑,控制片劑硬度在4.0~6.0 kg·cm-2內(nèi)。按“2.2”項(xiàng)下方法制備緩釋片,選擇主要因素HPMC K4M的用量(A)、EC的用量(B)、乳糖的用量(C)作為主要考察因素,每個(gè)因素又選取3個(gè)水平,采用正交設(shè)計(jì)法L9(34)進(jìn)行試驗(yàn),正交試驗(yàn)表見(jiàn)表1。以轉(zhuǎn)籃法轉(zhuǎn)速為100 r·min-1分別測(cè)定12 h內(nèi)藥物的累計(jì)釋放百分率。

    表1 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的因素及水平Tab 1 Facts and levels of excipient for orthogonal test

    緩釋制劑的評(píng)價(jià)方法有多種[3]。根據(jù)藥物的理化性質(zhì)和劑型的作用特點(diǎn),本實(shí)驗(yàn)采用藥物在2,6,12 h的累計(jì)釋放百分率作為評(píng)價(jià)指標(biāo),進(jìn)行處方篩選。本緩釋片規(guī)定緩釋片2 h釋放量為20%~40%、6 h釋放量為40%~65%、12 h釋放量80%以上,確定理想釋放量2 h為20%,6 h為55%,12 h為85%,根據(jù)不同時(shí)間點(diǎn)的累積釋放量,可以在一定程度上判斷出緩釋片的緩釋效果的好壞。因此為了準(zhǔn)確的反映各種輔料對(duì)藥物釋放的影響,采用了綜合評(píng)分法對(duì)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行分析,即把累積釋放量Q2h、Q6h、Q12h用參數(shù)S來(lái)表示。

    S值越小,表明處方中藥物在2,6,12 h的累積釋放百分率越接近理想值,即緩釋效果越好,S的具體數(shù)值見(jiàn)表2。通過(guò)直觀分析,由極值R可知[4],各因素對(duì)釋藥速率的影響大小依次為:A>B>C。綜合以上結(jié)果,可以確定最佳處方工藝組合為A2B2C2,即最優(yōu)處方為:每100片含主藥藤甲酰苷6.0 g、HPMC 8.0 g、EC 4.0 g、乳糖 12.0 g、硬脂酸鎂 1.5 g。

    表2 正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)計(jì)算結(jié)果Tab 2 The calculation of the orthogonal experimental results

    2.4.2 優(yōu)化處方的批間重復(fù)性和均一性 按“2.4.1”項(xiàng)下方法,按優(yōu)化處方制備3批藤甲酰苷緩釋片樣品,照“2.3”項(xiàng)下方法進(jìn)行釋放度測(cè)定,考察緩釋片的批間重復(fù)性,結(jié)果表明,緩釋片批間具有良好的重復(fù)性,結(jié)果見(jiàn)圖1。按“2.4.1”項(xiàng)下方法,按優(yōu)化處方制備藤甲酰苷緩釋片,取同批樣品6片,按“2.1.5”項(xiàng)下方法進(jìn)行釋放度測(cè)定,考察緩釋片的批內(nèi)均一性,結(jié)果表明,緩釋片批間具有良好的均一性。結(jié)果見(jiàn)圖2。

    圖1 藤甲酰苷緩釋片不同批次的釋藥曲線Fig 1 Release profile of garcinia glycosides sustainedrelease tablets of diferent batches

    圖2 藤甲酰苷緩釋片同一批次的釋藥曲線Fig 2 Release profile of garcinia glycosides sustainedrelease tablets from one batches

    2.5 釋放機(jī)制的初步探討

    藥物從制劑中釋放一般包括外擴(kuò)散和溶蝕兩個(gè)過(guò)程。HPMC親水凝膠骨架片遇水后首先在片劑表面濕潤(rùn),形成水凝膠層,使表面藥物溶出;凝膠層繼續(xù)水化,骨架膨脹,凝膠層厚度增加,延緩藥物的釋放,對(duì)于水溶性藥物可以通過(guò)水凝膠層擴(kuò)散進(jìn)行釋放,而水難溶性成分,則可能多數(shù)以固體顆粒形式分散于凝膠層中,進(jìn)一步通過(guò)凝膠層的溶解才能釋放出來(lái);片劑骨架逐漸水化并溶蝕,水份向片芯滲透至骨架,使骨架完全溶蝕,最后藥物完全釋放[5]。

    關(guān)于藥物的釋放機(jī)制科研人員已經(jīng)做了大量的探討和研究,建立了諸多的模型方程,主要有零級(jí)釋藥方程:Mt/M∞=kt;一級(jí)釋藥方程:Mt/M∞=1-ekt;Higuchi平面擴(kuò)散模式方程:Mt/M∞=kt1/2;Ritger-Peppas方程:Mt/M∞=ktn。其中,t為時(shí)間,Mt為t時(shí)刻的藥物釋放量,M∞為最大藥物釋放量,k為藥物釋放速度常數(shù)[6-9]。

    將按照優(yōu)化處方制備的藤甲酰苷緩釋片的釋放度數(shù)據(jù)分別用零級(jí)釋藥方程、Higuchi方程、一級(jí)釋藥方程和Ritger-Peppas方程對(duì)最優(yōu)處方的釋放曲線進(jìn)行擬合,采用DDsolver 軟件計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表 3。AIC值越小,MSC值越大,R2adj越大,擬合效果越好[10],MSC最大原則較為常用[11]。

    表3 釋藥數(shù)據(jù)的擬合方程Tab 3 Fitting equation of releasing curves

    由表 3數(shù)據(jù)可知,藤甲酰苷緩釋片的釋藥曲線較符合Higuchi方程,同時(shí)Ritger-Peppas方程[12]中,n為擴(kuò)散指數(shù),與藥物釋放機(jī)制有關(guān)。當(dāng) n≤0.43 時(shí),藥物釋放機(jī)制為 Fickian 擴(kuò)散;當(dāng)0.43<n<0.85 時(shí),藥物釋放機(jī)制為non-Fickian擴(kuò)散(anomalous transport),即藥物擴(kuò)散和骨架溶蝕協(xié)同作用;當(dāng)n≥0.85時(shí),藥物釋放機(jī)制為骨架溶蝕。根據(jù)該模型擬合式求得0.43<n=0.548<0.85,可進(jìn)一步說(shuō)明該骨架型緩釋片的釋放為擴(kuò)散和骨架溶蝕協(xié)同作用。

    3 結(jié)論

    本實(shí)驗(yàn)建立了藤甲酰苷緩釋片的分析方法,采用HPLC對(duì)藤甲酰苷緩釋片進(jìn)行含量測(cè)定,采用一親水性高分子材HPMC為主要緩釋材料、EC為骨架材料、乳糖為致孔劑、微晶纖維素為添加劑,濕法制粒壓片法制備藤甲酰苷親水凝膠骨架型緩釋片。通過(guò)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)篩選出最優(yōu)處方。分別用零級(jí)釋藥方程、Higuchi方程、一級(jí)釋藥方程和Ritger-Peppas方程對(duì)最優(yōu)處方的釋放曲線進(jìn)行擬合,DDsolver 軟件計(jì)算結(jié)果得出,藤甲酰苷緩釋片的釋藥曲線較符合Higuchi方程,Ritger-Peppas方程擬合式得出,n值為0.548可進(jìn)一步說(shuō)明該骨架型緩釋片的釋放為擴(kuò)散和骨架溶蝕協(xié)同作用。

    REFERENCES

    [1] XU L F. Gambogic acid glucoside derivatives and analogues and their preparation method and USES: China, 101289482A [P]. 2008-10-22.

    [2] Ch.P(2010)Vol Ⅱ(中國(guó)藥典2010年版. 二部) [S]. 2010: Appendix 87.

    [3] XIA J H, LIU C X. Statistical evaluation and analysis of the in vitro dissolution of solid pharmaceutical preparations [J]. Chin Pharm J(中國(guó)藥學(xué)雜志), 2000, 35(2):130-131.

    [4] DONG Z C. Hydroxypropyl methyl cellulose in gel skeleton application [J]. World Pharm(國(guó)外醫(yī)藥), 1993 ,14(1): 41-44.

    [5] YAN Y D. The Design and Development of Controlled Release Formulations of Sustained-release(緩釋控釋制劑的設(shè)計(jì)與開(kāi)發(fā)) [M]. Beijing: China Medical Science and Technology Press, 2006: 68-90.

    [6] WANG X, ZHANG W G, LI X Q, et al. Preparation and in vitro dissolution behaviors of Yiganqing-HPMC K4M/PVP K30 matrix tablet [J]. Chin J Mod Appl Pharm(中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)), 2012, 29(1): 50-55.

    [7] SHI L, QIAN J Q. Preparation and study on release rate in vitro for sustained-release tablets of simvastatin [J]. Chin J Mod Appl Pharm(中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)), 2011, 28(11): 1013-1017.

    [8] HIGUCHI T. Mechanism of sustained-action medication. Theoretical analysis of rate of release of solid drugs dispersed in solid matrices [J]. J Pharm Sci, 1963, 52(12): 1145-1149.

    [9] PEPPAS N. Analysis of Fickian and non-Fickian drugs drug release from polymers [J]. Pharm Acta Helv, 1985, 60(4): 110-111.

    [10] ZHANG Y, HUO M, ZHOU J, et al. DDSolver: an add-in program for modeling and comparison of drug dissolution profiles [J]. AAPS J, 2010, 12(3): 263-271.

    [11] YUKSEL N, KANIK A E, BAYKARA T. Comparison of in vitro dissolution profiles by ANOVA-based, model dependent and independent methods [J]. Int J Pharm, 2000, 209(1/2): 57-67.

    [12] RITGER P L, PEPPAS N A. A simple equation for description of solute release. Ⅱ. Fickian and anomalous release from swellable device [J]. J Control Release, 1987, 5(1): 37-42.

    Formulation Optimization and the Release Mechanism of Garcinia Glycosides Sustained-release Tablets

    LI Wenjun, CHEN Ye, LI Tongmin, WANG Yang, LIU Zhongchen, DENG Jingjing
    (School of Pharmacy, Liaoning University, Shenyang 110036, China)

    OBJECTIVE To prepare the garcinia glycosides sustained-release tablets and study drug release mechanism in vitro. METHODS Garcinia glycosides sustained-release tablets were prepared using hydroxypropylmethyl cellulose(HPMC) as gel matrix material, ethyl cellulose (EC) as skeleton material, lactose as filler and so on. The formulation was optimized using orthogonal experimental design. DDslover software was used to fitting drug release curve. RESULTS Garcinia glycosides sustained-release tablets had good sustained-release profile. The release behavior of the tablets in vitro followed Higuchi equation. It was the synergies of diffusion and dissolution and the main mechanism of drug release was diffusion for fitting well with Higuchi equation, r=0.999 3(1-12 h). CONCLUSION The garcinia glycosides sustained-release tablets prepared meet the release requirement in vitro.

    garcinia glycosides; HPMC; sustained-release tablets; release mechanism

    R944. 4

    B

    1007-7693(2013)10-1081-05

    2013-01-05

    國(guó)家“十一五”規(guī)劃“重大新藥創(chuàng)制”重大科技專(zhuān)項(xiàng)資助項(xiàng)目(2009ZX09103-030);遼寧大學(xué)“211工程”三期建設(shè)重點(diǎn)資助項(xiàng)目

    李文軍,女,碩士生 Tel: (024)62202323 E-mail: wenjun_0224@126.com

    猜你喜歡
    釋藥甲酰量瓶
    基于聚半乳糖醛酸的聚合物膠束制備及性能
    N-氨甲酰谷氨酸對(duì)灘羊乏情期誘導(dǎo)同期發(fā)情效果的影響
    蛇床子素滲透泵控釋片制備工藝的優(yōu)化及其體外釋藥行為
    中成藥(2018年9期)2018-10-09 07:18:38
    高效液相色譜法測(cè)定甲磺酸多沙唑嗪控釋片含量
    山東化工(2018年15期)2018-09-20 08:55:34
    大川芎方多組分制劑釋藥特性的評(píng)價(jià)
    中成藥(2017年5期)2017-06-13 13:01:12
    N-氨基甲酰谷氨酸在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用
    廣東飼料(2016年5期)2016-12-01 03:43:22
    新型meso-四(4-十四氨基甲酰苯基)卟啉及其金屬(Co)配合物的合成與液晶性能
    天丹通絡(luò)膠囊中總黃酮的含量測(cè)定
    對(duì)羥基安息香醛苯甲酰腙的合成、表征及熱穩(wěn)定性
    蜂蜜對(duì)新目安眼用凝膠中更昔洛韋在兔離體角膜中的滲透釋藥行為的影響
    亚洲乱码一区二区免费版| 欧美最新免费一区二区三区| 久久久久久久亚洲中文字幕| 99热这里只有是精品在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 色噜噜av男人的天堂激情| 日韩欧美 国产精品| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲欧美精品综合久久99| 精品无人区乱码1区二区| 高清毛片免费观看视频网站| 中文字幕熟女人妻在线| 色哟哟·www| 99热只有精品国产| avwww免费| 精品人妻视频免费看| 97碰自拍视频| 九九在线视频观看精品| 免费看光身美女| a级一级毛片免费在线观看| 一本精品99久久精品77| 欧美极品一区二区三区四区| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 精品熟女少妇av免费看| 国产探花极品一区二区| 中国美白少妇内射xxxbb| 在线看三级毛片| 日日撸夜夜添| 五月伊人婷婷丁香| 日韩人妻高清精品专区| 1000部很黄的大片| 国产高清视频在线播放一区| 免费av不卡在线播放| 欧美不卡视频在线免费观看| 天天一区二区日本电影三级| 国产精品99久久久久久久久| 赤兔流量卡办理| 国产成人a区在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 午夜久久久久精精品| 精品久久久久久成人av| 校园春色视频在线观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 中文字幕熟女人妻在线| 亚洲精品国产成人久久av| 国产欧美日韩精品亚洲av| 美女黄网站色视频| 精品国产三级普通话版| 亚洲自拍偷在线| 免费人成视频x8x8入口观看| www日本黄色视频网| 国产精品福利在线免费观看| 欧美又色又爽又黄视频| 我的老师免费观看完整版| av.在线天堂| 国产老妇女一区| 国产精品1区2区在线观看.| 国产精品99久久久久久久久| 成人精品一区二区免费| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 精品午夜福利视频在线观看一区| 欧美日韩乱码在线| 亚洲性夜色夜夜综合| 偷拍熟女少妇极品色| 露出奶头的视频| 中文字幕熟女人妻在线| a级毛片a级免费在线| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲性夜色夜夜综合| 最近视频中文字幕2019在线8| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 99在线人妻在线中文字幕| 丰满的人妻完整版| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲乱码一区二区免费版| 五月伊人婷婷丁香| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 舔av片在线| 观看美女的网站| 国产精华一区二区三区| 丝袜美腿在线中文| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产 一区精品| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 精品午夜福利视频在线观看一区| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲欧美日韩高清专用| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产亚洲av嫩草精品影院| 午夜爱爱视频在线播放| 午夜激情福利司机影院| 亚洲成a人片在线一区二区| 日本黄色片子视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久久久精品国产欧美久久久| 校园春色视频在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 亚洲在线自拍视频| 一级毛片aaaaaa免费看小| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 赤兔流量卡办理| 亚洲成av人片在线播放无| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产精品国产高清国产av| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 一级黄色大片毛片| 亚洲欧美精品自产自拍| 91午夜精品亚洲一区二区三区| av天堂在线播放| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲18禁久久av| 噜噜噜噜噜久久久久久91| а√天堂www在线а√下载| 岛国在线免费视频观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 成人一区二区视频在线观看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 中文在线观看免费www的网站| 99久久成人亚洲精品观看| 免费观看精品视频网站| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 啦啦啦韩国在线观看视频| 久久久久免费精品人妻一区二区| 在线播放无遮挡| av福利片在线观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 色哟哟哟哟哟哟| 久久欧美精品欧美久久欧美| 日韩欧美精品v在线| 国产精品一及| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 九九热线精品视视频播放| 国产精品女同一区二区软件| 欧美zozozo另类| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 男插女下体视频免费在线播放| 美女cb高潮喷水在线观看| 能在线免费观看的黄片| 欧美丝袜亚洲另类| 内地一区二区视频在线| 一本精品99久久精品77| 免费一级毛片在线播放高清视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 免费看光身美女| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久人人精品亚洲av| 国产精品,欧美在线| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 欧美zozozo另类| 亚洲成人久久爱视频| 精品日产1卡2卡| 国产成人a区在线观看| 人人妻人人看人人澡| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 精品久久久噜噜| 欧美国产日韩亚洲一区| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 最近在线观看免费完整版| 亚洲久久久久久中文字幕| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲欧美日韩东京热| 寂寞人妻少妇视频99o| 无遮挡黄片免费观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 大香蕉久久网| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 亚洲美女搞黄在线观看 | 久久热精品热| 五月伊人婷婷丁香| 国产精品三级大全| av卡一久久| 午夜爱爱视频在线播放| 精品久久久久久久久久久久久| 久久久欧美国产精品| 国产伦在线观看视频一区| 全区人妻精品视频| 欧美日韩在线观看h| 波多野结衣高清作品| 国产黄色小视频在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 色视频www国产| 久久久a久久爽久久v久久| 黄色配什么色好看| 男人舔奶头视频| 久久中文看片网| 免费大片18禁| 国产淫片久久久久久久久| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产极品精品免费视频能看的| 日日啪夜夜撸| 久久精品国产清高在天天线| 听说在线观看完整版免费高清| 欧美激情在线99| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲三级黄色毛片| 伊人久久精品亚洲午夜| 悠悠久久av| 国产成人91sexporn| 超碰av人人做人人爽久久| 久久久色成人| 人妻久久中文字幕网| a级一级毛片免费在线观看| 国产视频一区二区在线看| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久久久国产a免费观看| 一本久久中文字幕| 成人二区视频| 可以在线观看毛片的网站| 国产精品久久久久久久电影| 在线观看一区二区三区| 亚洲性夜色夜夜综合| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产乱人偷精品视频| 特级一级黄色大片| 国产高清视频在线播放一区| 香蕉av资源在线| 97热精品久久久久久| 久久久国产成人免费| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 美女被艹到高潮喷水动态| 波野结衣二区三区在线| 久久精品国产自在天天线| 最近视频中文字幕2019在线8| 97热精品久久久久久| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 成人一区二区视频在线观看| 成年版毛片免费区| 国产三级在线视频| 亚洲无线在线观看| 免费观看的影片在线观看| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 午夜爱爱视频在线播放| 老女人水多毛片| 国产精品亚洲一级av第二区| 一a级毛片在线观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲国产精品成人久久小说 | 亚洲国产精品国产精品| 免费看光身美女| 午夜福利18| 一个人免费在线观看电影| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 99久久成人亚洲精品观看| 欧美最新免费一区二区三区| 男人舔女人下体高潮全视频| 欧美日韩乱码在线| 麻豆乱淫一区二区| 欧美日本视频| 国产三级中文精品| 精品久久久久久久久av| 精品欧美国产一区二区三| 国产在视频线在精品| 在线观看66精品国产| 久久亚洲精品不卡| 欧美在线一区亚洲| 欧美高清性xxxxhd video| 白带黄色成豆腐渣| 少妇被粗大猛烈的视频| 成人午夜高清在线视频| 成人二区视频| 国产精品亚洲美女久久久| 国产精品福利在线免费观看| 91久久精品国产一区二区三区| 精品久久久久久久末码| 成年av动漫网址| 看免费成人av毛片| 少妇丰满av| 久久久久国内视频| 99热这里只有精品一区| 伦理电影大哥的女人| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久人人爽人人片av| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 成人无遮挡网站| 日本一本二区三区精品| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲av.av天堂| 一本久久中文字幕| 国产成人a区在线观看| 免费观看在线日韩| 亚洲熟妇熟女久久| 熟女人妻精品中文字幕| 赤兔流量卡办理| 国产三级在线视频| 欧美一区二区亚洲| 精品日产1卡2卡| 国产毛片a区久久久久| 少妇人妻一区二区三区视频| 欧美一区二区亚洲| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 日韩一区二区视频免费看| 悠悠久久av| 精品久久国产蜜桃| 最近的中文字幕免费完整| 麻豆一二三区av精品| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| a级毛片免费高清观看在线播放| 久久九九热精品免费| 丝袜喷水一区| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品一区二区三区四区久久| 免费人成视频x8x8入口观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 免费av不卡在线播放| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲av熟女| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 在线观看一区二区三区| 一个人观看的视频www高清免费观看| 最新在线观看一区二区三区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲成人精品中文字幕电影| 免费观看人在逋| 欧美成人免费av一区二区三区| 免费av观看视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 嫩草影院新地址| 午夜精品国产一区二区电影 | 美女黄网站色视频| 日韩欧美精品免费久久| av黄色大香蕉| 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美在线一区亚洲| 国产麻豆成人av免费视频| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲欧美日韩无卡精品| 一夜夜www| 亚洲美女搞黄在线观看 | 丰满乱子伦码专区| 成人性生交大片免费视频hd| 日韩一区二区视频免费看| 日本色播在线视频| 69人妻影院| 最近的中文字幕免费完整| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 少妇丰满av| 国产亚洲av嫩草精品影院| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久久久久九九精品二区国产| 热99在线观看视频| 亚洲最大成人手机在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 日韩成人伦理影院| 久久精品国产自在天天线| 免费观看的影片在线观看| 免费观看精品视频网站| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产亚洲精品av在线| 欧美又色又爽又黄视频| 嫩草影院新地址| av黄色大香蕉| 一级黄色大片毛片| 久久人人爽人人爽人人片va| 亚洲人与动物交配视频| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲综合色惰| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲性久久影院| 午夜福利18| 欧美成人a在线观看| 亚洲美女搞黄在线观看 | 有码 亚洲区| 精品无人区乱码1区二区| 在线播放无遮挡| 91av网一区二区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 99热这里只有是精品在线观看| 丝袜喷水一区| 亚洲成人精品中文字幕电影| 六月丁香七月| 亚洲在线自拍视频| 国内精品美女久久久久久| 久久久精品94久久精品| 性欧美人与动物交配| 女同久久另类99精品国产91| 久久久久久久午夜电影| 男人狂女人下面高潮的视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产日本99.免费观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 三级国产精品欧美在线观看| 嫩草影院精品99| av黄色大香蕉| 嫩草影视91久久| 性插视频无遮挡在线免费观看| 直男gayav资源| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 嫩草影院新地址| 国产亚洲精品久久久com| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲熟妇熟女久久| 精品国产三级普通话版| 久久精品国产清高在天天线| 哪里可以看免费的av片| 久久人人爽人人片av| 亚洲经典国产精华液单| 久久久精品94久久精品| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 免费av不卡在线播放| 久久久成人免费电影| 国产精品一区www在线观看| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲内射少妇av| 色尼玛亚洲综合影院| 国产精品福利在线免费观看| 日本一二三区视频观看| 中文字幕av在线有码专区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 久久久久久伊人网av| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产人妻一区二区三区在| 国产亚洲精品av在线| 香蕉av资源在线| 色视频www国产| 国产精品一区二区性色av| 91久久精品国产一区二区成人| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲av中文av极速乱| 午夜免费激情av| 伦精品一区二区三区| 十八禁网站免费在线| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 中文字幕av成人在线电影| 一区二区三区免费毛片| av在线亚洲专区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 在线天堂最新版资源| 亚洲七黄色美女视频| 欧美bdsm另类| 久久这里只有精品中国| 国产综合懂色| 我的老师免费观看完整版| 卡戴珊不雅视频在线播放| 日韩一区二区视频免费看| 婷婷六月久久综合丁香| 最近2019中文字幕mv第一页| 一级黄色大片毛片| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产伦精品一区二区三区四那| 蜜臀久久99精品久久宅男| 毛片女人毛片| 国产探花极品一区二区| 色哟哟·www| 级片在线观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 色综合色国产| 久久久久久久午夜电影| 色尼玛亚洲综合影院| 美女大奶头视频| 可以在线观看的亚洲视频| 日本黄大片高清| 精品久久久久久久末码| 一个人看视频在线观看www免费| 精品国产三级普通话版| 日本黄色片子视频| 日韩av不卡免费在线播放| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲,欧美,日韩| 露出奶头的视频| 成人欧美大片| 国产成年人精品一区二区| 级片在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 毛片女人毛片| 伦理电影大哥的女人| 国产精品女同一区二区软件| 一级毛片aaaaaa免费看小| 色吧在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 免费看a级黄色片| 国产麻豆成人av免费视频| 国产极品精品免费视频能看的| 69人妻影院| 免费av观看视频| 国产亚洲91精品色在线| 级片在线观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 性欧美人与动物交配| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 精品欧美国产一区二区三| 高清午夜精品一区二区三区 | 国产一区二区在线av高清观看| 人妻久久中文字幕网| 亚洲精品一区av在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| av天堂中文字幕网| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲,欧美,日韩| 九九热线精品视视频播放| 午夜视频国产福利| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲第一电影网av| 精品久久久久久久久亚洲| 又爽又黄无遮挡网站| 日本免费一区二区三区高清不卡| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲色图av天堂| 亚洲av一区综合| 亚洲成av人片在线播放无| 色5月婷婷丁香| 国产男人的电影天堂91| 日韩欧美国产在线观看| 看非洲黑人一级黄片| 国产视频内射| 久久久午夜欧美精品| 日韩高清综合在线| 免费无遮挡裸体视频| 成人午夜高清在线视频| 国产精品99久久久久久久久| 日韩强制内射视频| 麻豆一二三区av精品| 亚洲国产欧美人成| 精品国内亚洲2022精品成人| 美女黄网站色视频| 日韩欧美国产在线观看| 丰满的人妻完整版| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲精品一区av在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久久久国产网址| 成人特级av手机在线观看| 赤兔流量卡办理| 99热只有精品国产| 亚洲熟妇熟女久久| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产一区亚洲一区在线观看| 99久久成人亚洲精品观看| 美女免费视频网站| 国产精品久久久久久久久免| 日韩欧美精品v在线| 国产视频内射| 亚洲精品一区av在线观看| 久久99热6这里只有精品| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 三级毛片av免费| 神马国产精品三级电影在线观看| 高清毛片免费观看视频网站| 色综合色国产| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 日韩成人伦理影院| 乱人视频在线观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产黄色小视频在线观看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久亚洲精品不卡| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 欧美成人免费av一区二区三区| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 12—13女人毛片做爰片一| 日本欧美国产在线视频| 国产高潮美女av| 最近2019中文字幕mv第一页| 男人舔奶头视频| 又爽又黄无遮挡网站| 一级a爱片免费观看的视频| 99热这里只有精品一区| 国产精品av视频在线免费观看| a级毛色黄片| 欧美日韩精品成人综合77777| 啦啦啦啦在线视频资源| 日本色播在线视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 色吧在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 成人特级av手机在线观看| 91狼人影院| av视频在线观看入口| 亚洲国产精品合色在线| 欧美zozozo另类| 国产视频一区二区在线看| 男人的好看免费观看在线视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 午夜a级毛片| 真实男女啪啪啪动态图| 国产欧美日韩精品亚洲av| 午夜视频国产福利| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久韩国三级中文字幕| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲av免费高清在线观看| 午夜福利高清视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 无遮挡黄片免费观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区|