不同提取條件對紫竹莖中總黃酮提取量的影響

摘要：文章通過分光光度法測定紫竹莖中總黃酮的含量；并經(jīng)正交實(shí)驗(yàn)選定紫竹莖中總黃酮的最佳提取工藝條件為A2B3C1D1：即提取溫度為90℃，提取次數(shù)為4次，回流時(shí)間為60min，料液比為1：15。

關(guān)鍵詞：紫竹；總黃酮；正交實(shí)驗(yàn)

中圖分類號：S-3 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-0432（2012）-12-0040-2

基金項(xiàng)目：國家林業(yè)局948項(xiàng)目（2008-4-30） “竹子重要性狀的基因工程研究技術(shù)引進(jìn)”、云南省科技計(jì)劃項(xiàng)目2009CD073、云南省中青年學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人后備人才培養(yǎng)項(xiàng)目（2010CI016 ） 共同資助研究。

紫竹（Phyllostachysnigra （Lodd.） Munro）， 又名黑竹、烏竹等，屬禾本科竹亞科剛竹屬，我國南北各地多有栽培[1]。紫竹為多用途徑經(jīng)濟(jì)竹種，集園林觀賞、工藝品加工與竹材等眾多優(yōu)點(diǎn)于一體， 已成為現(xiàn)代竹產(chǎn)業(yè)開發(fā)的新興資源。竹類植物中含有豐富的黃酮類化合物[2]。近年來我國學(xué)者對竹類植物黃酮類化合物做了大量研究，研究表明，竹類植物黃酮類化合物具有明顯的抗癌活性、降血脂和降血清膽固醇的作用、顯著的抗衰老和抗疲勞作用[3-4]。本文通過討論料液比、提取溫度、回流時(shí)間、提取次數(shù)等因素對總黃酮提取的影響，研究了乙醇—水溶劑為提取劑提取紫竹莖中總黃酮的可行性，為紫竹資源綜合利用提供理論依據(jù)。

1 儀器、試劑與材料

1.1 儀器

752-紫外分光光度計(jì)、冷凝回流裝置、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）、電熱恒溫水浴鍋、天平等。

1.2 試劑

乙醇、蘆丁標(biāo)品、硝酸鋁溶液等，所用試劑均為分析純。

1.3 材料

采自西南林業(yè)大學(xué)竹園，將新鮮紫竹竹莖洗凈，冷凍干燥后粉碎，過30目篩置于冰箱中備用。

2 方法與結(jié)果

2.1 水平因素的考察

單因素實(shí)驗(yàn)分析最佳提取條件。根據(jù)實(shí)驗(yàn)因素選用料液比、提取溫度、提取次數(shù)、回流時(shí)間4個(gè)因素，每個(gè)因素選擇3個(gè)水平，設(shè)定因素水平表，見表1。

2.2 提取方法

按L9（34）正交表設(shè)計(jì)方案進(jìn)行試驗(yàn)，稱取干燥過30目的紫竹竹莖2.00g于冷凝回流裝置中，加入一定量的70%乙醇溶劑，在不同溫度下，回流提取一定次數(shù)和時(shí)長， 將提取液合并后，再濃縮并定容，并稱取一定量該試液，與硝酸鋁試液進(jìn)行顯色反應(yīng)，并以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)溶液，用752-紫外分光光度計(jì)在510nm下測定吸光度，然后計(jì)算出提取液中總黃酮的含量及提取率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析結(jié)果見表2。

從表2實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得出：提取溫度對于總黃酮提取率的影響顯著，其次是提取次數(shù)，料液比和回流時(shí)間對提取率的影響最??；以70%乙醇溶劑提取紫竹莖中的總黃酮時(shí)，提取溫度以水平A2為最好，提取次數(shù)以水平B3為最好，回流時(shí)間以水平C1為最好，料液比以水平D1為最好，即最佳的工藝條件是A2B3C1D1。進(jìn)一步進(jìn)行方差分析結(jié)果如下：

方差分析的F值檢驗(yàn)結(jié)果（表3）表明，因素A、B、C、D差異極顯著，表明本試驗(yàn)中提取溫度（℃）、提取次數(shù)、回流時(shí)間（min）、料液比（g/mL）是影響提取紫竹竹莖總黃酮含量的主要因素。

3 結(jié)論

采用L9（34），做溫度、提取次數(shù)、回流時(shí)間和料液比的四因素三水平的正交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明最佳的工藝條件為A2B3C1D1：即提取溫度為90℃，提取次數(shù)為4次，回流時(shí)間為60min，料液比為1：15。四個(gè)因素影響的主次順序是提取溫度>提取次數(shù)>料液比>回流時(shí)間。

參考文獻(xiàn)

[1] 吳征鎰.云南植物志[M].北京：科學(xué)出版社，2003.

[2] Peterson J，Dwyer J.Flavonoids：Dietary occurrence and biochemical activity[J].Nutrition Research，1998，18：1995-2018.

[3] 高錦明.植物化學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2003：191-193.

[4] 丁明，陳少妃，徐耀華.黃條金剛竹中總黃酮的提取及含量測定[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（4）：910-913.

作者簡介：王明悅（1987-），女，河南鄲城人，碩士研究生，研究方向：植物化學(xué)。

通訊作者：王娟（1966-），女，云南建水人，云南省林業(yè)科學(xué)院教授，博士，從事竹類植物研究工作。